模块三、鸡胚蛋孵化、清洗消毒鸡胚、鸡胚接种病毒的操作.pdf

鸡胚蛋孵化、清洗消毒鸡胚、鸡胚
接种病毒的操作(已读)

任务1、SPF蛋的收集、清洗消毒、孵化
学习目标

了解SPF(SpecificPathogenFree,无特定病原)蛋的收集、清洗消毒、孵化。
任务提出：
病毒除了利用原代鸡胚细胞培养外，也可利用鸡胚直接培养，要利用鸡胚直接培养病毒，
需采用SPF种蛋，就要进行SPF蛋的收集、清洗消毒、孵化。按生产指令单向仓库领取相
关材料并核对，填写收料记录，并按相关的SOP进行操作。
任务分析：
要进行SPF蛋的收集、清洗消毒、孵化，首先要得到生产指令单，根据接种所需，向
仓库领取所需要的各种材料，再按照SOP的要求，进行SPF蛋的收集、清洗消毒、孵化。
任务实施：
一、准备工作
领取各种材料，填写领料单。
二、材料和仪器
SPF蛋、孵化器、蛋架、铅笔、照蛋器、甲醛
三、操作方法

1．SPF蛋的收集、灭菌、保存
每天用蛋盒从隔离器中收集蛋(1次/d)后,用细砂纸和刀片清理干净蛋表面的脏物,
在蛋的大头表面上用铅笔写隔离器号和收蛋日期。随后,按隔离器号依次装在塑料蛋盘中,

放进熏蒸柜里,用多聚甲醛硅油法进行灭菌,灭菌后的SPF蛋按家系集中在一起放进12～
15℃的贮藏柜里保存。上述的工作过程中,严防用赤手直接触摸SPF蛋,一定要带一次性无
菌手套进行操作,以防SPF蛋的污染。在贮藏柜中的保存时间不要过长,一般不要超过7d,
以免降低SPF蛋的利用率。
2．SPF鸡胚的孵化
2.1孵化前准备工作
(1)孵化前应彻底清理干净孵化室和出雏室及其内的孵化器等设备,放进孵化时所用
的工具和记录用品。
(2)用多聚甲醛硅油法熏蒸孵化室和出雏室,待检查灭菌结果合格时进入使用,如不合
格重新熏蒸,达到合格为止。
(3)在孵化室的缓冲间里放进孵化时工作人员所要用的灭菌的工作服,鞋帽、口罩和一

次性手套,打开紫外线灯(24hPd)。
(4)调试孵化器的温度和湿度,温度设定在3718℃左右。湿度设定在53%～57%,

调试后24h其温度和湿度正常时方可上蛋孵化。
(5)种蛋的选择及灭菌
种蛋的选择:种蛋品质要新鲜,种蛋保存的时间愈短,对胚胎生活力的影响愈小,孵化率

也愈高。一般产后一周内为合适,以3～5d最好。种蛋的形状和大小要合适。蛋形应正常,
过长过圆的蛋不宜孵化,种蛋过小过大都不好,鸡蛋以55～65g为宜。蛋壳结构要正常,蛋
应致密均正,蛋壳过薄,壳面粗糙的“沙皮蛋”,蛋壳过于坚硬的“钢皮蛋”都不能用来孵化。
种蛋的灭菌:用多聚甲醛硅油法灭菌后,无菌操作移到孵化室的缓冲间,如种蛋从冷藏

柜刚拿出时(12～15℃)与室温温差过大,必须放在室温过24h后进行灭菌。
2.2上蛋
孵育前的鸡卵先用清水以布洗净，再用干布擦干，放入孵卵器内进行孵育（37℃，相
对湿度是45—60%）。一切准备就绪以后,即可上蛋正式开始孵化,种蛋在保存期间一般温度

较低,为了上蛋后能很快地恢复孵化器的温度,在孵前12h左右即将按品系或家系,蛋大头
朝上装好盘的种蛋移至孵化室中,然后放进孵化器里进行孵化。
2.2.1孵化器的管理:立体孵化器由于构造已经机械化、自动化、机器管理非常简单。
主要应注意温度的变化,观察调节器的灵敏度,遇有温度上升或下降时可以及时调节。要注意
温度计的水银柱有否断裂现象,注意孵化器的湿度,非自动调湿的孵化器,每天要定时往水盒
加用水壶烧开过的温水(要无菌)。要注意湿度计的纱布在水中易因钙盐作用而变硬或
沾染灰尘和绒毛,影响水分的蒸发,必须保持清洁,经常清洗或更换,湿度计的水管只盛
蒸馏水,如使用非自动翻蛋孵化器时一天至少手动翻蛋5～6次。每天上午、下午和晚间各
检查一次孵化器的运转情况并记好检查记录,出现异常现象时及时报告并解决。
2.2.2照蛋:孵至第4日，用检卵灯观察鸡胚发育情况，未受精卵，只见模糊的卵黄
黑影，不见鸡胚的形迹，这种鸡卵应淘汰。活胚可看到清晰的血管和鸡胚的暗影，比较大一
些的可以看见胚动，随后每日观察一次，将胚动呆滞或没有运动的、血管昏暗模糊者，即可

能是已死或将死的鸡胚，要随时加以淘汰在孵化5～7d时,,以便及时验出无精蛋和中死
蛋,并观察胚胎发育情况。
表1孵化记录表
批次使用单位隔离器号上蛋日期上蛋数中死受精蛋数受精率%

四、注意事项
种蛋保存时间不宜过长。
评分标准：
序项目与技术要求评分比例%检测标准实训记录得分
号
1准备30正确填写领料单
2操作20按照SOP正确操作
3结果50胚胎的成活率
问答题

1、接种病毒的鸡胚为什么要用SPF蛋？
SPF蛋是指无特定病原的鸡蛋，无鸡的主要传染病，不含有或者少量杂菌和病毒，利于病毒
的接种。

任务2、鸡胚接种病毒

学习目标：

1．了解