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实验一细胞与基本组织 [实验内容] (一)观察细胞。 (二)观察四大基本组织。 [实验目的] (一)掌握细胞膜、细胞质和细胞核的结构和功能。 (二)了解小肠柱状细胞和杯状细胞。 (三)识别胶原纤维和腱细胞(跟腱纵切片)。 (四)识别哈佛氏管、哈佛氏骨板和骨陷窝(长骨横断面磨片、软骨切片)。 (五)识别肌纤维和肌细胞核(肌肉组织纵横切片)。 (六)识别神经原纤维、尼氏体和轴突及髓鞘(脊髓横切片)。 [材料与器具] 显微镜、幻灯机或投影机,猪或人肝(或其它动物肝)切片标本(HE染色),小肠切片标本(HE染色),透明软骨切片标本(HE染色),长骨横断面磨片标本,跟腱纵切片标本(HE染色),骨骼肌、心肌、平滑肌纵横切片标本(HE染色),脊髓横切片标本(镀银染色、HE染色))。 [方法与步骤] (一)观察细胞的结构 熟悉显微镜的使用方法。简要了解HE染色的基本原理:HE染色即苏木精和伊红染色,苏木精为碱性染料,易与细胞核中的脱氧核糖核酸的酸性成分结合,故细胞核被染成蓝紫色;伊红为酸性染料,易与细胞质中的基质等碱性成分结合,故细胞质被染成粉红色。 1.肉眼观察取肝脏切片标本,标本中肝小叶分界不清。 2.低倍镜观察可见若干多边形的肝小叶结构,肝小叶中立方形的肝细胞数量很多。 3.高倍镜观察可见肝细胞膜、细胞质和细胞核。细胞质染成粉红色,中央呈圆形或椭圆形的细胞核被染成蓝紫色(图2-1-1)。 思考细胞膜、细胞质和细胞核的功能。 图2-1-1肝组织切片-高倍镜观察(HE染色) (二)观察单层柱状上皮组织 1.肉眼观察取小肠切片标本,标本一侧起伏不平,被染成蓝紫色,为小肠环状皱襞,其上有丰富的小肠绒毛。 2.低倍镜观察找到小肠绒毛,其表面覆盖有一层单层柱状上皮,多数为柱状细胞,其中夹有杯状细胞。 3.高倍镜观察柱状细胞密集排列,核为椭圆形,近基底部被染成蓝紫色,细胞的游离面有一层粉红色膜状结构,称纹状缘,电子显微镜下称微绒毛。杯状细胞呈高脚酒杯状,细胞上端膨大,下端细小,核呈三角形或半圆形,位于细胞酒杯状的底部,其杯内积有大量的粘液颗粒,镜下由于标本处理的原因粘液颗粒丢失而呈空泡(图2-1-2)。 (三)观察致密结缔组织 1.肉眼观察取跟腱纵切标本,粉红色长条形组织为纵切面。 2.低倍镜观察大量粉红色的胶原纤维束呈平行而紧密的排列,其间有腱细胞。 图2-1-2小肠横断面切片−高倍镜观察(HE染色) 3.高倍镜观察胶原纤维束较粗大,纤维束内由许多平行排列的胶原纤维组成,在纤维束之间分布有排列成单行长椭圆形或杆状细胞核的腱细胞,被染成蓝紫色。 (四)观察骨组织 1.肉眼观察取长骨横断面磨片标本,紫色的同心圆状结构隐约可见。 2.低倍镜观察许多同心圆排列的骨板,称为哈佛氏骨板。中央有一个黑紫色较大的圆形管称为哈佛氏管。哈佛氏管和哈佛氏骨板组成哈佛氏系统,哈佛氏管之间有相连的穿通管。在哈佛氏系统之间,有一些排列不规则的骨板,称为间骨板。外环骨板较厚位于密质骨外表面,为较整齐排列的数层环形骨板。内环骨板较薄,面向骨髓腔,为几层不规则的骨板。 3.高倍镜观察骨板间有许多扁的卵圆形呈黑色的小腔隙即骨陷窝。骨陷窝向四周发出许多细而呈放射状有分支的骨小管。相邻骨陷窝之间的骨小管彼此相通,靠近哈佛氏管的骨小管则与哈佛氏管相通(图2-1-3)。 图2-1-3骨横断面磨片−高倍镜观察(大力紫染色) (五)观察透明软骨组织(气管横断面) 1.肉眼观察取透明软骨标本,在气管横断面被染成蓝紫色C形的部分为透明软骨。 2.低倍镜观察从透明软骨表面向中心观察,软骨周边呈粉红色的为透明软骨膜,蓝紫色软骨基质中有成群的同源软骨细胞群。 3.高倍镜观察靠近软骨膜的软骨细胞较小,从透明软骨表面向中心方向软骨细胞逐渐增大,常以3-5个同源软骨细胞群出现(图2-1-4)。 图2-1-4气管横断面切片−高倍镜观察(HE染色) (六)观察骨骼肌组织 1.肉眼观察取骨骼肌纵、横切片标本,长条形的为纵断面,椭圆形的为横断面。 2.低倍镜观察呈长条形,红色的肌纤维即为纵切面,肌外膜的结缔组织伸入到肌组织内,形成肌束;呈红色大小不等的多边形肌纤维即为横切面。 3.高倍镜观察纵切面肌纤维呈长条形,有明显的横纹,肌原纤维沿着肌纤维长轴排列。染色深的为暗带,染色浅的为明带。横切片上,肌原纤维呈小红点状。肌原纤维在肌浆内排列均匀,细胞核为卵圆形呈蓝紫色紧贴肌膜内侧,数量较多。有时也可以在横切面上显现出多角形的小区(图2-1-5)。 图2-1-5骨骼肌纵断面切片−低倍镜观察(HE染色) (七)观察心肌组织 1.肉眼观察取心肌纵、横切片标本,长条形的为纵断面,椭圆形的为横断面。 2.低倍镜观察纵切面上红色的心肌纤维呈不规则的短带状,有分支,互相连接;横切面上