RNA干扰技术在肿瘤治疗中的应用_朱彧.pdf

中国肺癌杂志2009年7月第12卷第7期ChinJLungCancer,July2009,Vol.12,No.7·811·

·综述·
RNA干扰技术在肿瘤治疗中的应用

朱彧吴骧徐克

【中图分类号】R734.2DOI:10.3779/j.issn.1009-3419.2009.07.012

ApplicationofRNAiTechnologyinCancerTherapy
YuZHU,XiangWU,KeXU
TianjinKeyLaboratoryofLungCancerMetastasisandTumorMicroenvironment,TianjinLungCancerInstitute,TianjinMedicalUni-
versityGeneralHospital,Tianjin300052,China
Correspondingauthor:KeXU,E-mail:[e-mail]
ThisstudywassupportedbygrantsfromtheNationalNaturalScienceFoundationofChina(toKeXU)(No.30873035)
andtheKeyProjectoftheFoundationofTianjinHighEducationCommission(toKeXU)(No.ZD200714).

RNA干扰（RNAinterference,RNAi）是近年发现的反义和正义RNA均可使基因受到抑制的现象。1998年An-
一种重要的基因表达调控方式，是由转入细胞的小干扰drewFire和CraigMello发现双链RNA分子（double-stranded
双链RNA诱导同源mRNA特异性降解产生的一种转录后RNA,dsRNA）可以实现整个同源基因的完全沉默，并将这
基因沉默现象（posttranscriptiongenesilencing,PTGS）。种现象称为RNAi。
RNAi技术随着细胞生物学、分子生物学、分子遗传学、RNAi为一种双链RNA分子，在mRNA水平上关闭相
免疫学等相关学科的迅猛发展，在理论和技术上已趋成对应序列的基因表达或使其沉默的过程，即序列特异性
熟,已从实验及基础研究过渡到临床试用阶段。同其它的转录后基因沉默，可以特异性阻断真核细胞中蛋白的
肿瘤治疗手段相比，RNAi技术的主要优势在于其主要针表达[2]，大致分为起始阶段、效应阶段和扩增放大阶段。
对致病的相关基因起作用，特异性下调相关基因的表达在起始阶段中，核酸酶将dsRNA切割成21-23个核苷酸的含
以达到治疗的目的。目前在体内实现RNAi的两种常用方有3’突出端的siRNA。在效应阶段中，siRNA在TAR-RNA
式是为利用病毒载体表达短的发夹状RNA（shorthairpin,结合蛋白（TARRNA-bindingprotein,TRBP）的参与下结合
shRNA）以及化学合成的小干扰RNA（smallinterfering,到核糖核苷酸酶复合物上形成RNA诱导的基因沉默复合
siRNA）。由于化学合成的siRNA成分简单清楚，完全体（RNAinducedsilencingcomplex,RISC）。RISC依赖ATP
模拟体内天然形成的siRNA，直接进入RISC复合体中解聚siRNA双链成单链并激活RISC，激活的RISC通过碱
发挥功能，不会影响体内内源性微小RNA（microRNA,基配对定位到同源mRNA上，并在其特征性的3’端突出以
miRNA）对基因的调控过程，在治疗方面受到更多的关及dsRNA特异性核酸内切酶（dsRNAspecificendonuclease,
注[1]。Dicer）的作用下，在配对碱基的第10与11碱基之间切割并
降解靶mRNA[3]，最后再被核酸外切酶进一步降解，从而
1RNA干扰技术的作用机理干扰基因表达[4]。DsRNA特异性核酸内切酶广泛存在于
真核生物中，其类似物相继在拟南芥、秀丽线虫及哺乳动
1995年，美国科学家SuGuo和Kemphues在试图阻断物中被发现[5]。在扩增放大阶段中，siRNA可作为引物使
秀丽新小杆线虫（C.elegans）中的par-1基因时，首先发现了mRNA转变为dsRNA，在以RNA为模板指导RNA合成的聚
合酶（RNA-directRNApolymerase,RdRP）的作用下扩增
后，再被裂解成siRNA。新生的siRNA生成后与核酸酶形成
本研究受国家自然科学基金（No.30873035）和天津市高等学校科技发
复合物，随后mRNA与siRNA的正义链置换，mRNA的位
展基金计划重点项目（No.ZD200714）资助
置与最初正义链的位置相同，从而被核酸酶在相同位置