2型糖尿病肾病大鼠模型制备研究.pdf

2840实用医学杂志2007年第23卷第18期

2型糖尿病肾病大鼠模型制备研究

宋恩峰刘晶晶贾汝汉韦桂莲任开明

摘要目的:探讨三联法制造2型糖尿病肾病大鼠模型的可行性。方法:56只SD大鼠随机分为7组,分别
予不同处理[假手术组、单纯手术组、手术+高糖高脂组、链脲佐菌素(STZ)组、手术+STZ组、高糖高脂+STZ组、手
术+高糖高脂+STZ组(三联法组)],监测大鼠血糖、血胰岛素、血脂、血肌酐、尿蛋白、肾脏肥大指数,通过PAS及
HE染色观察大鼠肾脏形态学变化。结果:三联法组血糖、血胰岛素、血脂、血肌酐、尿蛋白、肾脏肥大指数均明显高
于其他组(P<0.05),大鼠肾脏病理形态变化最明显。结论:三联法组较好地模拟了人类2型糖尿病的发病过程,
并出现了早期肾脏病变。
关键词糖尿病,2型糖尿病肾病动物模型

目前我国糖尿病的发病率呈升高趋势,但发病机电仪器有限公司生产的SN-682型放射免疫计数器。
制尚未完全阐明,在预防和治疗方面仍不完善,建立血标本采集予氯氨酮70mg/kg麻醉,心脏采血检测血
理想的动物模型对进一步研究糖尿病具有重要的意糖、血胰岛素、血甘油三酯(TG)、血胆固醇(TC)等。全
义。而国内外研究2型糖尿病肾病多采用高糖高脂饮自动仪检测血肌酐(Cr)、TG、TC及尿Cr、尿微量蛋白。
食配合小剂量链脲佐菌素(STZ)[1]的动物模型。本实1.3判断标准2型糖尿病肾病大鼠需具备以下条
验采用新的方法(三联法)制备2型糖尿病肾病模型,件:(1)随机血糖≥16mmol/L,伴胰岛素敏感性下降;
即先予以切除大鼠右肾,继而高糖高脂饮食诱导,再(2)糖尿病肾病早期肾脏肥大,肌酐清除率(Ccr)增加
小剂量STZ腹腔注射部分破坏大鼠的胰岛B细胞,或出现微量白蛋白尿。
使大鼠出现糖尿病肾病的早期改变如肾小球高滤过、1.4数据处理用SPSS10.0软件进行分析,结果以
微量白蛋白尿等。探讨此方法制造2型糖尿病肾病大均数±标准差(x±s)表示。
鼠模型的可行性。2结果
1材料与方法2.1实验过程中大鼠血糖变化三联法组大鼠血糖
1.1实验动物及模型建立清洁级雌性SD大鼠(购第6周明显高于假手术组(P<0.01)。与STZ、手术+
自华中科技大学同济医学院实验动物中心,许可证号STZ、高糖高脂+STZ组相比,亦明显升高(P﹤0.05)。
为TJLA-2003-4)56只,体重150～170g。随机分成7说明三联法组大鼠血糖符合糖尿病标准。见表1。
组:(1)假手术组,麻醉后从右背部入口分离右肾,不
做任何处理,作关闭切口。(2)单纯手术组,手术后,予表1各组空腹血糖变化x±s,mmol/L
正常饮食。(3)手术+高糖高脂组,手术后1周,予高糖组别鼠数1周5周6周
假手术组84.51±0.134.61±0.214.73±0.41
高脂饮食。(4)STZ组,不手术,正常饮食第5周末
单纯手术组84.42±0.144.62±0.314.81±0.32
腹腔注射手术组手术后周正常饮
STZ。(5)+STZ,1,手术+高糖高脂组84.62±0.214.71±0.334.91±0.23
食4周后,STZ腹腔注射。(6)高糖高脂+STZ组,不手STZ组84.51±0.234.97±0.2513.20±0.59*#
术,高糖高脂饮食4周后,STZ腹腔注射。(7)手术+手术+STZ组84.50±0.414.11±0.3314.30±0.67*#
高糖高脂+STZ组(三联法组),手术后1周,高糖高高糖高脂+STZ组84.61±0.095.28±0.4715.80±1.28*#
三联法组84.72±0.085.95±0.1520.10±2.91*
脂饮食4周后,STZ腹腔注射。高糖高脂饮食:常规
注:与假手术组比较,*P<0.01;与三联法组比较,#P<0.05
饲料加20%蔗糖,10%猪油、2.5%胆固醇。手术方法:
大鼠腹腔注射氯氨酮70mg/kg麻醉后行右肾切除2.2实验过程中大鼠胰岛素变化三联法组大鼠血
术。STZ为sigma公司产品,30mg/kg,腹腔注射,造模胰岛素在第5、6周明显升高,与假手术组相比,差异
时间共6周。有显著性(P<0.01)。各组也有升高,但均低于三联法
1.2取材及指标测定代谢笼收集尿液并记录24h组(P<0.05)。见表2。
尿量,3000r/min离心3min后取1mL,-20℃保存2.3血脂、尿蛋白、Ccr、肾重/体重变化实验第6周,
待测。血糖测定采用美国OneTouch血糖仪和试纸三联法组TC、TG、24h尿蛋白、Ccr、肾重/体重明显升
条。胰岛素活性测定采用放免试剂盒。仪器:上海核福高,与假手术组相比,差异有显著性(P<0.01)。高糖
高脂+STZ组也有明显升高(P<0.01),但三联法组变
化较高