烟草分子遗传连锁图谱的构建.pdf

福建农林大学

硕士学位论文

烟草分子遗传连锁图谱的构建

姓名：李延坤

申请学位级别：硕士

专业：作物遗传育种

指导教师：祁建民

20090401
摘要利用烟草不同栽培类型间品种烤烟台烟7号和白肋烟白肋21进行杂交，构建了F2遗传作图群体，通过ISSR、SRAP、标准RAPD和双引物RAPD标记多态性引物的PCR扩增和遗传连锁分析，构建了一张烤烟×白肋烟(栽培类型间)(1)以烤烟台烟7号和白肋烟白肋2l杂交，Fl自交获得187株F2代分离群体作为(2)从19x27对SRAP上游与下游引物组合、42个ISSR引物、126个黜廿D引物和数个PAPD双引物组合对中，以台烟7号和白肋21为模板筛选出58对多态性较好的S凡心引物组合、10个多念性较好的ISSR引物、1括97个SRAP标记位点、21个ISSR标记位点l7个RAPD标记位点和67个RAPD双引物标记位点的烟草遗传连锁图，202个标记进入25个连锁群(LOD>_3．O)，另有16个标记未进入连锁群。该图谱总长为4007．1cM，标记位点平均间距为19．8cM。标关键词：SRAP；ISSR；标准RAPD；双引物RAPD；烟草遗传连锁图谱；分子标记遗传连锁图，主要研究结果如下：作图群体。1个多态性较好的RAPD弓]物和51个多态性较好的RAPD双引物组合对。(3)利用SRAP、ISSR、标准RAPD和双引物RAPD四种分子标记筛选出了130个引物组合及引物，对F2作图群体进行PCR扩增，共产生218条多态条带，平均每个引物组合产生1．7个多态条带，最多的可以产生6条多态性条带。(4)使用MAPMAKER／EXPVersion3．0b和MapDrawV2．1软件，我们构建了包记间的最大距离为48．4cM，最小距离为0cM，每个连锁群上的标记数在2-40个之间，连锁群的长度在0．616．6cM之间。福建农林大学硕上学位论文、
amplificationMimmumgroups．ThebetweenlinkageMolecularMapandmajor(1)1(2)58standard(3)These1．7，and(4)UsingMAPMAKER／EXPMapDrawgroups(LOD>3．0)and4007．1cM19．8cM．Anothermaximumadjacent48．4cM，andcM．The6．6cM．Themolecularmapwaswimmappingfrompolymorphismprimers’PCRwereF2astheprimerprimers，1primersdouble-primerpolymorphismspolymorphicmarkersprimer／pairWasmarkers，21markers，1numbermakersdistributionMarkersentiregroupuniform，nophenomenonKeywords：SRAP；ISSR；RAPD；double-primerRAPD；GeneticConstructionofGeneticLinkageTobaccoAbstractThegeneticconstructedpopulmionflue-curedtobaccovarietiesTaiyan7burleyBurley21byusingSRAP，ISSR,standardRAPDdouble—primeranalysis．Theresultsfollows：87individualsselectedpopulationwhichflue—cured1．SRAPpairs，10ISSR5pairscouldrevealscreenedgenerated8bandsinPCRpopulation．Theaverageproduced6．Version3．0bV2．1，atobacooconstructed,whichconsisted9767distributediIl25coveredwithdistance16hadenteredintoeach2—4lengthgroups0-6gettingtogetherhappened．tobacco；out．notacrossoneall
指导教师亲笔签名。玄下∥殳虱⋯㈨⋯一繇态蜓呻吼沙7．6、d学位(毕业)论文作者亲笔签名：力§菠苣婶日期：2润’．V‘．，∑醐：舢7矗9独创性声明论文使用授权的说明本人声明，所呈交的学位(毕业)论文，是本人在指导教师的指导下独立完了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位(毕业)论文的规定，即学校有权送交论文