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应用生态学报2004年8月第15卷第8期 CHINESEJOURNALOFAPPLIEDECOLOGY,Aug.2004,15(8)∶1481~1486 RAPD技术在昆虫学研究中的进展3 胡艳红迟德富33 (东北林业大学,哈尔滨150040) 【摘要】综合论述了RAPD技术在昆虫分类学、物种的亲缘关系、系统发育、分子连锁图谱的构建、有害 生物鉴定、害虫抗药性诊断、分子标记辅助育种和生态学这几方面研究中的应用,指出RAPD技术存在的 问题,并提出一定的相关对策,阐明随着理论的发展和试验技术的进步,分子标记技术将使昆虫分子生物 学研究迈上一个新台阶. 关键词昆虫学RAPD技术分子遗传标记 文章编号1001-9332(2004)08-1481-06中图分类号Q963文献标识码A ResearchadvanceinapplicationofRAPDtechniquesinentomology.HUYanhong,CHIDefu(Northeast ForestryUniversity,Harbin150040,China).2Chin.J.Appl.Ecol.,2004,15(8):1481~1486. ThispapersummarizedtheapplicationofRAPDtechniquesininsecttaxologyandecology,relativeofspecies,sys2 temicdevelopment,identificationofpest,diagnosingforpestresistance,constructionofmolecularlinkagemap, andmolecularassistantbreeding.TheproblemsexistingintheapplicationsofRAPDinentomologywereindicat2 ed,andtheircountermeasuresweregiven.Itwasmentionedthatwiththedevelopmentoftheoriesandexperi2 mentaltechniques,insectmolecularbiologywouldmakenewprogressandconquerallthoseproblems. KeywordsEntomology,RAPDtechnique,Moleculargeneticmarkers. 的多态性标记还是能区分它们,因而证明通过RAPD指纹技 1引言 术,借助于合适的统计分析法,可以对处于不同发育阶段的 随机引物扩增(RAPD)标记突破了表达型标记的局限细胞系进行鉴定或对已知物种的细胞系进行描述.Wald2 [45] 性,其变异只来源于基因DNA序列的差异,能快速而容易地schmidt等用RAPD标记,分析了膜翅目蜜蜂科昆虫 提供遗传变异的信息,具有信息含量高、不同层次和类群之Meliponaquadrifasciata“(mandacaia”)的69个品系的遗传变 间广泛可比等优越性,因而成为遗传标记中强有力的工具.异,根据遗传距离将其区分为M1q1anthidioides和 此技术被大量的应用于昆虫的研究中.M1q1quadrifasciata两个不同的种群,与形态学分析相符. 面对昆虫分类的难题,一种简洁、快速、成本低的方法肯 2RAPD技术在昆虫学研究中的应用 定是受欢迎的,而RAPD技术正符合这种要求,所以它很快 211分类学被昆虫分类学家运用到实际工作中.南美果蝇(Anastrepha 现代遗传学表明,物种的遗传性状是由基因决定的,而fraterculus)的分类地位一直是一个具有争论性的问题,主要 基因的变异是由于DNA分子中碱基序列的变化造成的,因是因为对其遗传变种的误解.Basso等[3]用RAPDs2PCR分离 此人们采用分子生物学技术和生化技术,以DNA分子或其多态性片段研究表明,被实验的变种属于1个种,但具有丰 它大分子为材料进行研究,希望从根本上解决形态分类不能富的多态性,不支持其丰富的染色体多态性所暗示的存在隐 解决的问题.含种复合体的假设.在昆虫纲里,同翅目与半翅目的关系也 嗜人锥蝇(Cochliomyiahominivorax)的幼虫是西半球牲一直存在一些争论,目前分类学家大多支持将同翅目划为一 畜的主要害虫,其发育未成熟的早期阶段(1~2龄)同次生个独立的目,应用分子生物学手段分析的结果也证实了这一 [39] 锥蝇(C1macellaria)极其相似.Skoda等使用120个随机观点. 引物,对其进行了RAPD2PCR分析,经过筛选,有21个引物212物种亲缘关系及系统发育 可产生清晰且能够重复的谱带,完全能区分出这两个种.2