一种海蒿子岩藻聚糖及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113754788A(43)申请公布日2021.12.07(21)申请号202111144997.4(22)申请日2021.09.28(71)申请人上海海洋大学地址201306上海市浦东新区沪城环路999号(72)发明人王培培薛卫李玲翠吴文惠包斌(74)专利代理机构上海伯瑞杰知识产权代理有限公司31227代理人周一新(51)Int.Cl.C08B37/00(2006.01)A61K31/715(2006.01)A61K36/03(2006.01)A61P31/16(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图1页(54)发明名称一种海蒿子岩藻聚糖及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种海蒿子岩藻聚糖及其制备方法和应用，其中岩藻聚糖硫酸根含量为9％–13％，相对分子质量为9–15kDa，按照摩尔百分比计包括45％–55％的甘露糖、40％–50％葡萄糖醛酸和0.1％–5％半乳糖，具有抗H1N1流感病毒活性；海蒿子岩藻聚糖的制备方法包括脱脂、热水提取、CaCl2除褐藻酸、纯化和逐步部分酸水解的步骤。本发明通过纯化和逐步部分酸水解制备的海蒿子岩藻聚糖纯度高，不含蛋白、核酸等杂质，具有较高的抗H1N1流感病毒活性，可用于制备抗H1N1流感病毒药物。CN113754788ACN113754788A权利要求书1/1页1.一种海蒿子岩藻聚糖，具有抗H1N1流感病毒活性，其中岩藻聚糖硫酸根含量为9％–13％，相对分子质量为9–15kDa。2.根据权利要求1所述的海蒿子岩藻聚糖，其特征在于，所述海蒿子岩藻聚糖按照摩尔百分比计包括45％–55％的甘露糖、40％–50％葡萄糖醛酸和0.1％–5％半乳糖。3.根据权利要求1或2所述的海蒿子岩藻聚糖，其特征在于，所述海蒿子岩藻聚糖按照摩尔百分比计由50.1％的甘露糖、44.9％葡萄糖醛酸和4.0％半乳糖组成。4.权利要求1至3任一项所述海蒿子岩藻聚糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)脱脂：海蒿子粉用95％乙醇在75–90℃下回流3–5h，重复2–3次，去除脂质并将残留物干燥；(2)热水提取：经脱脂处理的干粉按料液质量体积比为1:10–50用70–90℃热水提取2–3h，重复2–3次，离心，收集所有上清液，浓缩；(3)CaCl2除褐藻酸：3mol/LCaCl24℃沉降8–12h，重复1–2次，离心，将上清液透析、浓缩和冻干，得到粗海蒿子岩藻聚糖；(4)纯化：粗海蒿子岩藻聚糖在Q‑SepharoseFastFlow柱上层析，用去离子水和NaCl溶液(0.5、1、1.5、2mol/L)以3mL/min梯度洗脱，每管接6mL，每种流动相接60管，收集1.5mol/LNaCl洗脱得到的主多糖，用Sepharose4BFastFlow柱纯化，得到海蒿子岩藻聚糖，被命名为SF0；(5)逐步部分酸水解：将海蒿子岩藻聚糖SF0在50–70℃下用0.05–0.15mol/LTFA处理2–3h，用超滤管离心超滤除去低分子量的寡糖，浓缩液中的多糖被命名为SF1，SF1用0.2–0.3mol/LTFA在70–80℃下水解1–1.5h，并用同类型的管子进行超滤，浓缩液中的多糖被命名为SF2，SF2用0.4–0.6mol/LTFA在90–105℃下水解0.75–1.25h并超滤，浓缩液中的多糖被命名为SF3，即得。5.根据权利要求4所述海蒿子岩藻聚糖的制备方法，其特征在于，超滤管规格Mw＝3.5–5kDa。6.根据权利要求4所述海蒿子岩藻聚糖的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，海蒿子粉和热水的料液质量体积比为1:20–50。7.根据权利要求6所述海蒿子岩藻聚糖的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，海蒿子粉和热水的料液质量体积比为1:30。8.根据权利要求4所述海蒿子岩藻聚糖的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，沉淀褐藻酸的CaCl2浓度为3mol/L，沉降温度为4℃，沉降时间为10h。9.根据权利要求4所述海蒿子岩藻聚糖的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，逐步部分酸水解过程中，第一步水解中，水解温度60℃，TFA浓度0.1mol/L，水解时间3h；第二步水解中水解温度80℃，TFA浓度为0.2mol/L，水解时间1.5h；第三步水解中水解温度100℃，TFA浓度0.5mol/L，水解时间1h；上述三步水解后超滤所用的超滤管规格Mw＝5kDa。10.权利要求1至3任一项所述海蒿子岩藻聚糖在制备抗H1N1流感病毒药物中的应用。2CN113754788A说明书1/8页一种海蒿子岩藻聚糖及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及天然高分子技术领域，具体涉及一种具有抗H1N1流感病毒活性的海蒿子岩藻聚糖及其制备方法和应用。背景技术[0002]