作为新型疫苗使用的活的减毒的重组伪狂犬病毒的概述.pdf

姓名：张克龙
专业：动物科学院预防兽医学
学号：1618305017

作为新型疫苗使用的活的减毒的重组伪狂犬病毒的概述

摘要：伪狂犬病病毒（PRV）是一种双链，猪源DNA病毒，其基因组

大小约为150kb。PRV具有许多非必需基因，其可以被编码异源抗原

但对病毒繁殖没有有害影响的基因替代。表达的天然和外来抗原的重

组PRV能够刺激免疫应答。在本文中，我们对当前具有控制动物中的

病毒感染的可能的活减毒重组PRV和基于PRV的活载体疫苗进行概述。

简介

1.1PRV背景

伪狂犬病病毒（PRV）是疱疹病毒家族的一个成员，α疱疹病毒亚亚

科和伪狂犬病（PR）或Aujezsky氏病的病原体。感染PRV之后导致

神经紊乱，呼吸困难，消瘦，年轻仔猪死亡，流产感染。该病毒具有

双链线性DNA基因组1.43×105kb 的长度和含有独特的长区域（UL），

独特的短区域（US），一个末端重复序（TRS），和内部重复序列（IRS）。

到目前为止，已经鉴定了至少11种不同的PRV糖蛋白（gB，gC，gD，

gE，gG，gH，gI，gK，gL，gM或gN），并且编码这些蛋白质的基

因已经测序。PRV的必需糖蛋白包括gBgD，gH，gL和gK;其他被

认为是不必要的[5，6]。有PRV的诸如胸腺激酶（TK）和蛋白激酶

（PK），其与致病[相关的多个非结构蛋白6，7];然而，该基因子集
可以被异源基因替代而不影响感染性或病毒繁殖，只要基本基因保持

完整。显示在关于在PRV基因组的基因插入常见的部位的示意图如

图1.

图1

PRV基因组中用于插入外源基因的常见位点。编码TK，PK，gG的，

国电电力，GI和gE基因的基因是插入外源序列的最常见位点。TK基

因位于独特的长区（UL）内，并且PK，gG的，国电电力，GI和gE

基因基因位于独特的短区（US）内。IR=内部重复序列;TR=末端重复

序列。附图不是按比例的。

已经研究了多价PRV疫苗的功效。在这里，我们概括研究使用减毒重

组PRV（rPRVs）作为疫苗候选的作为应用应用的进展，用于推动rPRV

载体疫苗的发展。

1.2减毒活PRV疫苗的简介

重组PRV病毒最有希望改进现有疫苗和开发新的的途径以及即将开

发新疫苗。在原则上，设计的伪狂犬病毒载体疫苗在活PRV基因组的

前提是被用来插入和表达编码来自其他病原体包括病毒，细菌的保护

性抗原的基因，和寄生虫等。所表达的外源抗原可以在随后用来刺激

相关的免疫反应。许多非必需基因中的大PRV基因组中的存在允许多

个外源基因的同时插入，使接种多种矿院对抗多种疾病有了希望。
PRVBartha-K61是rPRV的常见亲本菌株。它是减毒的PRV，可以在

猪肾细胞中，鸡卵，以及鸡胚细胞反复传代。在这株序列中，完整的

gE基因和GI基因的一部分已被删除。然而，该种结构见证了在开发

多价疫苗，以控制各种传染病应用取得了成功。

使用rPRV的共同方法及构建携带PRV基因组的一部分的转移载体。

将该载体与天然PRV一起转染入易感细胞，然后筛选细胞中重组体。

除了PRV基因组的一部分，转移载体还含有启动子，感兴趣的外源基

因和报告基因。PRV序列应该出现在载体的始断和末端，以允许载体

的臂和病毒基因组之间的同源重组。有研究表明，人巨细胞病毒（CMV）

启动子在指导病毒基因合成方面比PRV启动子更有效。因此，CMV早

期基因启动子已经成为在这些构建体中使用的最常见的启动子。它也

可以用于rPRV的鉴定。除了产生重组体的常规方法，病毒基因组可

以被克隆到细菌人工染色体（BAC）载体中。生成定点和转座子诱变

重组使用BAC的疱疹病毒已有很深研究。

2.减毒PRV活疫苗的功效

到目前为止，已经插入PRV基因组大多数外源基因的编码来源于动物

病毒的关键抗原。迄今为止开发构建的总结如表，其包括亲PRV毒株，

外源基因，并插入位点。下面的例子提供了对这种技术的成功使用进

入更深入的讨论。

2.1PRRSV/PRV重组病毒疫苗

猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是一种有包膜，正链RNA病毒，

是动脉炎病毒科。它会导致巨大的经济损失和世界范围内各个国家最
重要的疾病，并且此病更加严重。PRRSV的基因组是15kb的长度和

包含九个开放阅读框指定ORF1A，ORF1b，ORF2a，ORF2b，ORF3，ORF4，

ORF5，ORF6，ORF7。

十年前，开发了表达PRRSV的GP5包膜蛋白的减毒的rPRV，rPRV-GP5;

GP5蛋白由ORF5编码。rPRV-GP5能够在接种的猪中针对临床症状起

到显着保护并减少由PRRSV攻击引起的病原性损伤的作用。用rPRV