第六章第一节痰液脱落细胞检查.ppt

第六章细胞病理学诊断工作相关技术指南一、目的采集痰液的方法和质量直接影响痰检查阳性率，采集痰液分析基本要求是：
①痰液必须是从肺部咳出；
②痰液必须新鲜；
③对首次痰检查患者，应亲自指导和观察患者咳痰。痰液检查二、方法学2、采集
⑴一次咳痰建议留取3-5口痰液。
⑵存放标本的容器必须是无吸水性的干燥塑料或玻璃器皿,须有盖子密封,标签明确，标签应记录相关内容,包括姓名、门诊号（住院号）、送检时间等。
⑶二种标准的送检方法：
每日一次，连续三天送检，每天制片。
每日一次，连续三天，每天收集后先预固定，一次性提取细胞成份后离心沉渣涂片或制成细胞蜡块（CB）。3、送检：原则上留取后立即送检，保持标本新鲜；一般夏天存放时间应＜2小时，冬天＜4小时，如确有困难或须做沉渣切片则可以预固定后放置冰箱内冷藏，但不宜＞5天。
4、接收：核对送检单与样本盒（瓶）上的相关信息，一致后签收标本，若信息不一致则需重新与相关人员、科室核对，标本的签收制度必须严格按规定执行。注意事项：痰标本应尽快涂片，在室温下，可以保存2～4小时，在冰箱内可保存两天；痰液量一般以3ml-5ml(3-5口痰)为宜；
采痰时应采用内面涂蜡的痰盒，可防止痰液被吸收而难于挑痰制片；
采集痰标本没有禁忌证，但如果病人在行支气管镜检查之后，立即进行痰细胞学检查，往往会混有一些嗜酸性的细胞碎片和炎性细胞，而误认为高分化鳞癌。最好在支气管镜检查5～10天后再行痰细胞学检查。（二）制片性状:
粘液痰：多见于慢性支气管炎的缓解期、支气管哮喘或肺癌病例。痰液透明、无色、粘稠，用镊子牵拉时，往往可拉成很长的细丝。如果其中有乳白色的颗粒状物，往往提示有肺癌的可能，必须取这部分痰液做涂片检查。粘液脓性痰：是在粘液痰的基础上混有一部分脓液。检查时必须仔细挑选粘液丝的部分做细胞学检查，以提高癌细胞检查的阳性率。脓性痰：为黄色或黄绿色的粘痰，因细菌种类的不同，痰的粘稠度和颜色可有不同。常见于气管、支气管和肺化脓性感染。其中有大量中性粒细胞和核碎片。对这种痰最好经抗感染治疗后再送检，以取得较好的结果。泡沫痰：即痰呈泡沫状，此种痰应在除去泡沫后，采取其中的粘液丝做涂片检查。血丝痰：即痰内带有少量的血液，这是支气管黏膜某个局部小血管破裂出血或肺泡内出血所致。常见于肺癌或支气管结核，有时也见于支气管炎。为了明确出血的原因，应将带血丝的及其附近部分的痰全部制成涂片，进行检查。
气味:正常无特殊气味,
血腥味(血性痰),恶臭(合并厌氧感染)，
特殊臭味(晚期肺癌)（2）取样：选择性取有价值的部分
用镊子、竹签等无吸水性材料夹取,不主张用玻璃制品、棉签等取样。
原则上优先选取以下部位：
含血丝粘液痰。
灰白色豆渣样痰丝（形似白色细线）。
透明粘液丝丰富处。
血液与粘液交界处痰液。
黏液丰富的样本与水样样本应注意区别取样的痰液量，一般情况下后者的取样量应多于前者。2、制片
⑴普通涂片：
①直接涂片：用镊子或竹签直接涂抹在玻片上，尽量分开粘液丝及血性部份，做到相对均匀，涂片面积应超过玻片空白部位的三分之二，其优点是粘液丝分布明显，病变细胞相对集中，缺点是涂片厚薄不匀、重叠现象多见而影响观察及封片，一般一次制片二张以上。
②压拉涂片：将取样的标本置于一张玻片上后另一张玻片正面朝下压拉下一张玻片，多次推拉、挤压均匀后二边分开得到二张涂片；优点是相对厚薄均匀，但可能细胞挤压分散，镜下沿粘液丝查找的线索相对不明显。⑵液基制片：是指通过标本的预处理后先把痰液的粘液溶解、液化且细胞固定后再通过一定的技术手段把细胞成分转移到玻片上的制片方法，制作过程等同一般的液基片，然应注意标本预处理中以下方面。

选取的痰液样本量通常为一张普通制片痰液量的3-5倍。
在清洗、固定作用的保存液内存放15分钟以上，保存液各厂家不尽相同，但主要的成份类似：酒精、甲醛、甲醇等。
1，4-二硫苏糖醇（DTT）液消化粘液：用清洗液加10%的DTT粉剂配制成DTT液加入到保存液中1-2ml,震荡10分钟以上，即可完全溶解保存液中的粘液，使标本完全液体化。⑶沉渣涂片或细胞蜡块制作：
需要较大的样本量，通常是用三天的咳痰量混合在一起制作取样，须注意标本的预固定及适当的保存。
标本需作液化、离心沉淀预处理（同前）。
沉淀后细胞量少作涂片用，3-5张；沉淀后细胞丰富者作细胞蜡块。
普查、科研等情况下应用较多，因其样本量大也可进一步应用分子、免疫等新技术。3、制片的质量控制

⑴样本的选取：直接关系到检查的阳性率，多次检查多张涂片结果的前后一致性应大于80%以上。
⑵涂片应相对均匀，重叠部份面积＜20%，涂片部分面积应大于玻片面积三分之二以上，合格涂片比例应＞80%。（三）固定

（六）痰液标本的安全管理与院感控制
（七）分子病理学技术在痰液样本中的应用痰液检查痰液检查痰液