痰液脱落细胞检查专家讲座.pptx

第六章细胞病理学诊疗工作相关技术指南一、目标采集痰液方法和质量直接影响痰检验阳性率，采集痰液分析基本要求是：
①痰液必须是从肺部咳出；
②痰液必须新鲜；
③对首次痰检验患者，应亲自指导和观察患者咳痰。痰液检验二、方法学2、采集
⑴一次咳痰提议留取3-5口痰液。
⑵存放标本容器必须是无吸水性干燥塑料或玻璃器皿,须有盖子密封,标签明确，标签应统计相关内容,包含姓名、门诊号（住院号）、送检时间等。
⑶二种标准送检方法：
每日一次，连续三天送检，天天制片。
每日一次，连续三天，天天搜集后先预固定，一次性提取细胞成份后离心沉渣涂片或制成细胞蜡块（CB）。3、送检：标准上留取后马上送检，保持标本新鲜；普通夏天存放时间应＜2小时，冬天＜4小时，如确有困难或须做沉渣切片则能够预固定后放置冰箱内冷藏，但不宜＞5天。
4、接收：查对送检单与样本盒（瓶）上相关信息，一致后签收标本，若信息不一致则需重新与相关人员、科室查对，标本签收制度必须严格按要求执行。注意事项：痰标本应尽快涂片，在室温下，能够保留2～4小时，在冰箱内可保留两天；痰液量普通以3ml-5ml(3-5口痰)为宜；
采痰时应采取内面涂蜡痰盒，可预防痰液被吸收而难于挑痰制片；
采集痰标本没有禁忌证，但假如病人在行支气管镜检验之后，马上进行痰细胞学检验，往往会混有一些嗜酸性细胞碎片和炎性细胞，而误认为高分化鳞癌。最好在支气管镜检验5～10天后再行痰细胞学检验。（二）制片性状:
粘液痰：多见于慢性支气管炎缓解期、支气管哮喘或肺癌病例。痰液透明、无色、粘稠，用镊子牵拉时，往往可拉成很长细丝。假如其中有乳白色颗粒状物，往往提醒有肺癌可能，必须取这部分痰液做涂片检验。粘液脓性痰：是在粘液痰基础上混有一部分脓液。检验时必须仔细挑选粘液丝部分做细胞学检验，以提升癌细胞检验阳性率。脓性痰：为黄色或黄绿色粘痰，因细菌种类不一样，痰粘稠度和颜色可有不一样。常见于气管、支气管和肺化脓性感染。其中有大量中性粒细胞和核碎片。对这种痰最好经抗感染治疗后再送检，以取得很好结果。泡沫痰：即痰呈泡沫状，此种痰应在除去泡沫后，采取其中粘液丝做涂片检验。血丝痰：即痰内带有少许血液，这是支气管黏膜某个局部小血管破裂出血或肺泡内出血所致。常见于肺癌或支气管结核，有时也见于支气管炎。为了明确出血原因，应将带血丝及其附近部分痰全部制成涂片，进行检验。
气味:正常无特殊气味,
血腥味(血性痰),恶臭(合并厌氧感染)，
特殊臭味(晚期肺癌)（2）取样：选择性取有价值部分
用镊子、竹签等无吸水性材料夹取,不主张用玻璃制品、棉签等取样。
标准上优先选取以下部位：
含血丝粘液痰。
灰白色豆渣样痰丝（形似白色细线）。
透明粘液丝丰富处。
血液与粘液交界处痰液。
黏液丰富样本与水样样本应注意区分取样痰液量，普通情况下后者取样量应多于前者。2、制片
⑴普通涂片：
①直接涂片：用镊子或竹签直接涂抹在玻片上，尽可能分开粘液丝及血性部份，做到相对均匀，涂片面积应超出玻片空白部位三分之二，其优点是粘液丝分布显著，病变细胞相对集中，缺点是涂片厚薄不匀、重合现象多见而影响观察及封片，普通一次制片二张以上。
②压拉涂片：将取样标本置于一张玻片上后另一张玻片正面朝下压拉下一张玻片，屡次推拉、挤压均匀后二边分开得到二张涂片；优点是相对厚薄均匀，但可能细胞挤压分散，镜下沿粘液丝查找线索相对不显著。⑵液基制片：是指经过标本预处理后先把痰液粘液溶解、液化且细胞固定后再经过一定技术伎俩把细胞成份转移到玻片上制片方法，制作过程等同普通液基片，然应注意标本预处理中以下方面。

选取痰液样本量通常为一张普通制片痰液量3-5倍。
在清洗、固定作用保留液内存放15分钟以上，保留液各厂家不尽相同，但主要成份类似：酒精、甲醛、甲醇等。
1，4-二硫苏糖醇（DTT）液消化粘液：用清洗液加10%DTT粉剂配制成DTT液加入到保留液中1-2ml,震荡10分钟以上，即可完全溶解保留液中粘液，使标本完全液体化。⑶沉渣涂片或细胞蜡块制作：
需要较大样本量，通常是用三天咳痰量混合在一起制作取样，须注意标本预固定及适当保留。
标本需作液化、离心沉淀预处理（同前）。
沉淀后细胞量少作涂片用，3-5张；沉淀后细胞丰富者作细胞蜡块。
普查、科研等情况下应用较多，因其样本量大也可深入应用分子、免疫等新技术。3、制片质量控制

⑴样本选取：直接关系到检验阳性率，屡次检验多张涂片结果前后一致性应大于80%以上。
⑵涂片应相对均匀，重合部份面积＜20%，涂片部分面积应大于玻片面积三分之二以上，合格涂片百分比应＞80%。（三）固定

（六）痰液标本安全管理与院感控制
（七）分子病理学技术在痰液样本中应用痰液检验痰液检验痰液检验㈠镜检前准备及镜检规范：
㈡镜检内容
1、标本满意度评定：
在满意标本前提下检验样本才含有可信