等电聚焦电泳.ppt
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等电聚焦电泳.ppt
等电聚焦电泳背景介绍基本原理如果在电泳系统中建立一个由阳极至阴极,pH由低到高(即环境由酸到碱)的连续而稳定的pH梯度,则处于一个系统的各种蛋白质分子,将根据各自的pI值与所处位点的oH值的差别带上正电或负电。载体两性电解质pH梯度(carrierampholytepHgradient)等电聚焦,即在电场中通过两性缓冲离子建立pH梯度。固相pH梯度(immobilizedpHgradients,IPG)等电聚焦,是利用一系列具有弱酸或弱碱性质的丙烯酰胺衍生物滴定时,在滴定终点附近形成pH梯度并参与丙烯酰胺
等电聚焦电泳.pptx
等电聚焦电泳张素芳背景介绍基本原理如果在电泳系统中建立一个由阳极至阴极,pH由低到高(即环境由酸到碱)的连续而稳定的pH梯度,则处于一个系统的各种蛋白质分子,将根据各自的pI值与所处位点的PH值的差别带上正电或负电。载体两性电解质pH梯度(carrierampholytepHgradient)等电聚焦,即在电场中通过两性缓冲离子建立pH梯度。固相pH梯度(immobilizedpHgradients,IPG)等电聚焦,是利用一系列具有弱酸或弱碱性质的丙烯酰胺衍生物滴定时,在滴定终点附近形成pH梯度并参与丙
实验九、等电聚焦电泳.ppt
实验九聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点一、目的要求二、原理聚丙烯酰胺等电聚焦电泳(IsoelectricFocusing-PAGE,简称IEF-PAGE):利用各种蛋白质pI不同,以聚丙烯酰胺凝胶为电泳支持物,并在其中加入两性电解质载体(carrierampholytes),两性电解质载体在电场作用下,按各自pI形成从阳极到阴极逐渐增加的平滑和连续的pH梯度。在电场作用下,蛋白质在此pH梯度凝胶中泳动,当迁移至pH值等于pI处时,就不再泳动,而被浓缩成狭窄的区带。两性电解质载体(carrier
等电聚焦电泳PPT课件.ppt
等电聚焦电泳一、IEFE定义各种蛋白质各自都有一个等电点,在一特殊的pH环境中,蛋白质分子呈电中性,在电场中不会迁移。等电聚焦就是在电泳介质中放入载体两性电解质,当通以直流电时,两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,在此体系中,不同的蛋白质即移动到或聚焦于其相当的等电点位置上,也就是说被聚焦于一个狭的区带中,电泳技术中的等电点聚焦也称为聚焦电泳。二、IEFE的特点(二)缺点1.要求用无盐溶液,而在无盐溶液中蛋白质可能发生沉淀。2.样品中的成分必须停留在其pI,不适用在pI不溶或发生变性的蛋白
等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点.doc
实验三等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点一、实验目的了解等电聚焦的原理。通过蛋白质等电点的测定,掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直管式等电聚焦电泳技术。二、实验原理等电聚焦(Isoelectricfocusing,简称IEF)是六十年代中期出现的新技术。近年来等电聚焦技术有了新的进展,已迅速发展成为一门成熟的近代生化实验技术。目前等电聚焦技术已可以分辨等电点(pI)只差0.001pH单位的生物分子。由于其分辨力高,重复性好,样品容量大,操作简便迅速,在生物化学、分子生物学及临床医学研