荧光定量PCR技术讲座20110904.ppt
kp****93
亲,该文档总共52页,到这已经超出免费预览范围,如果喜欢就直接下载吧~
相关资料
荧光定量PCR技术讲座20110904.ppt
北京康为世纪生物科技有限公司内容microRNA长度20∼24nt单链小分子RNA与目标基因3’端非编码区的识别位点相结合导致目标基因mRNA分子稳定性下降,半衰期变短,或mRNA分子结构变化(5‘脱帽),从而表达水平下降。microRNA的来源miRNA前体与成熟体靶点识别–不严格互补配对miRNA与siRNA的异同miRNAsiRNAmiRNA检测与定量miRNA芯片–基因表达谱Pre-miRNA检测SpecificmiRNAquantificationbyrealtimePCR–waytogo解决m
荧光定量PCR技术讲座培训课件.ppt
荧光定量PCR技术讲座大纲一、荧光定量PCR技术的基础理论一、荧光定量PCR技术的基础理论一、荧光定量PCR技术的基础理论一、荧光定量PCR技术的基础理论一、荧光定量PCR技术的基础理论一、荧光定量PCR技术的基础理论一、荧光定量PCR技术的基础理论一、荧光定量PCR技术的基础理论一、荧光定量PCR技术的基础理论一、荧光定量PCR技术的基础理论一、荧光定量PCR技术的基础理论一、荧光定量PCR技术的基础理论一、荧光定量PCR技术的基础理论一、荧光定量PCR技术的基础理论一、荧光定量PCR技术的基础理论一、
荧光定量PCR.doc
荧光定量PCR荧光定量PCR荧光定量PCR一、样品RNA的抽提1.匀浆将—80℃冻结的RNA提取样品迅速转移至用液氮预冷的研钵中,用研杵研磨组织,其间不断加入液氮,直至研磨成粉末状,向研钵中加入与样品匀浆量匹配的适量的RNAisoPlus,并将组织样粉末覆盖。2。抽提室温放置5min,使核蛋白复合物完全溶解后转移至1。5mL无酶离心管中,室温静置5min,12000r/min,4℃离心15min;小心吸取上清液移入新离心管,加上清液的1/5体积量的氯仿,静置10min;12000r/min,4℃离心10m
一种荧光定量PCR反应液及荧光定量PCR方法.pdf
本发明属于分子生物学技术和实验方法领域,具体涉及一种荧光定量PCR反应液,其特征在于包含PCR反应增强剂,所述PCR反应增强剂选自二甲亚砜、甘油、牛血清白蛋白、甲酰胺、聚乙二醇6000、亚精胺、硫酸铵和甜菜碱中的一种或多种,例如二甲亚砜、牛血清白蛋白和甜菜碱。本发明的荧光定量PCR反应液还包含具有5′-3′聚合酶活性和5′-3′外切酶活性的耐热DNA聚合酶,优选为同时具有3′-5′外切酶活性的耐热DNA聚合酶和热启动耐热DNA聚合酶。本发明还涉及包含所述反应液的试剂盒以及利用所述反应液进行荧光定量PCR的
荧光定量PCR步骤.doc
荧光定量PCR步骤荧光定量PCR步骤荧光定量PCR步骤2。3。2反转录反应2.3.2.1去除基因组DNA反应按如下成分于冰上配制反应混合液,为了保证反应液配制的准确性,进行各项反应时,应先按反应数+2的量配制MasterMix,然后再分装到每个反应管中,最后加入RNA样品。试剂使用量5×gDNAEraserBμffer2.0μlgDNAEraser1.0μlTotalRNA1μgRNaseFreedH2Oμpto10μl42℃水浴2min,冰上放置.2.3。2.2反转录反应反应液配制请在冰上进行。为了保证