一种葛根异黄酮提取方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113662983A(43)申请公布日2021.11.19(21)申请号202110959848.7(22)申请日2021.08.20(71)申请人傅美静地址350002福建省福州市仓山区西江林语花园27号楼704室(72)发明人傅美静(51)Int.Cl.A61K36/488(2006.01)A61P9/12(2006.01)A61P3/10(2006.01)A61P35/00(2006.01)A61P37/04(2006.01)A61P39/06(2006.01)A61K125/00(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称一种葛根异黄酮提取方法(57)摘要本发明提供一种葛根异黄酮提取方法。该提取方法包含如下步骤：氯化胆碱/尿素的制备：将139.6g的氯化胆碱与120.1‑240.2g的尿素混合，直到形成透明溶液，然后在60℃真空干燥箱中干燥36h，即得深度共熔溶剂氯化胆碱/尿素，在恒温水浴锅中提取后得到葛根异黄酮粗提液，然后分离纯化得到葛根异黄酮。本发明的目的在于提供一种葛根异黄酮提取方法，利用深度共熔溶剂氯化胆碱/尿素对植物细胞壁具有溶解破坏作用，以及与黄酮类化合物形成氢键促进其溶解等特性，同时添加乙醇提高葛根异黄酮的提取效率；称量葛根异黄酮粉末重量，最终提取率为21.48‑27.23mg/g(按葛根原料计算)，并测定葛根异黄酮的羟基自由基清除率、DPPH清除率、ABTS清除率，结果表明与VC活性吻合。CN113662983ACN113662983A权利要求书1/1页1.一种葛根异黄酮提取方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：(1)氯化胆碱/尿素的制备：将139.6g的氯化胆碱与120.1‑240.2g的尿素混合(即摩尔比控制在1：2‑4)，在80℃的水浴锅中磁力搅拌2‑3h，直到形成透明溶液，然后在60℃真空干燥箱中干燥36h,即得深度共熔溶剂氯化胆碱/尿素，保藏在干燥器中，待用。(2)用蒸馏水配置提取溶液，包含20‑40％氯化胆碱/尿素和20‑40％乙醇，然后添加至60目的葛根粉中并搅拌均匀，在恒温水浴锅中提取后得到葛根异黄酮粗提液，然后分离纯化得到葛根异黄酮。2.根据权利要求1所述的一种葛根异黄酮提取方法，其特征在于：将139.6g的氯化胆碱与120.1‑240.2g的尿素混合(即摩尔比控制在1：2‑4)。3.根据权利要求1所述的一种葛根异黄酮提取方法，其特征在于：用蒸馏水配置提取溶液，包含20‑40％氯化胆碱/尿素和20‑40％乙醇。4.根据权利要求1所述的一种葛根异黄酮提取方法，其特征在于：所述的葛根粉与提取液的料液比在1：10‑25。5.根据权利要求1所述的一种葛根异黄酮提取方法，其特征在于：提取过程中，温度在40‑60℃，提取时间在30‑60min。混合物使用台式高速离心机12000g下离心10min分离固体颗粒，得到葛根异黄酮提取液。然后使用旋转蒸发仪，在真空和加热温度为50℃条件下，将葛根异黄酮提取液中的乙醇蒸发去除，然后添加蒸馏水将浓缩后的体积调整至原体积，得到粗提液。6.根据权利要求1所述的一种葛根异黄酮提取方法，其特征在于：将15mL粗取液缓慢加入至层析柱中，接着用600mL去离子水洗脱其他杂质，再用70％的乙醇溶液洗脱，并收集乙醇洗脱液。然后，用旋转蒸发仪将洗脱液浓缩至10mL，用稀盐酸调pH至3.0。将浓缩液放置在4℃环境中，静置24h，葛根异黄酮晶体析出，过滤并冷水洗涤后得粗品葛根异黄酮。粗品葛根异黄酮以石灰水加热溶解，0.22um膜过滤，滤液用盐水调至pH3.0，冷却静置，使其重新结晶析出沉淀，过滤，冷水洗涤，冻干，得到精制葛根异黄酮。2CN113662983A说明书1/5页一种葛根异黄酮提取方法技术领域[0001]本发明涉及技术领域，具体为一种葛根异黄酮提取方法，属于食品加工领域。背景技术[0002]葛根为豆科植物野葛(Puerarialobata(Willd))的干燥根，属药食同源类植物,含有丰富的功能性异黄酮类化合物,其具有改善血液循环、降血压、降血糖、预防癌症、增强机体免疫力等功效，在食品工业、日用、保健、医药等领域具有广阔的前景，因此探究葛根异黄酮的提取工艺具有重要意义。[0003]目前最常用的提取方法是有机溶剂提取法，操作简便，对仪器设备要求不高，但往往存在提取时间长，效率低、有机溶剂消耗大的缺点。[0004]本发明内容[0005]本发明方法中，利用深度共熔溶剂氯化胆碱/尿素对植物细胞壁具有溶解破坏作用，以及与黄酮类化合物形成氢键促进其溶解等特性，同时添加乙醇提高葛根异黄酮的提取效率。[0006]本发明可通过以下方案实现目的，包括如下步聚，但不仅限于：[0007](1)氯化胆碱/尿