基于表面增强拉曼活性芯片对牛奶中三聚氰胺进行检测的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN103411950A*(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103411950103411950A(43)申请公布日2013.11.27(21)申请号201310254299.9(22)申请日2013.06.24(71)申请人吉林大学地址130012吉林省长春市前进大街2699号(72)发明人赵冰郭志男王旭阮伟东宋薇(74)专利代理机构长春吉大专利代理有限责任公司22201代理人张景林王恩远(51)Int.Cl.G01N21/65(2006.01)权权利要求书1页利要求书1页说明书4页说明书4页附图3页附图3页(54)发明名称基于表面增强拉曼活性芯片对牛奶中三聚氰胺进行检测的方法(57)摘要基于表面增强拉曼活性芯片对牛奶中三聚氰胺进行检测的方法，属于食品中添加剂检测技术领域。包括对含有三聚氰胺牛奶样品的前处理；用于检测待检测样品的具有表面增强拉曼活性基底的制备；待检测样品对具有表面增强拉曼活性基底的处理方法；通过拉曼光谱仪采集待检测样品中三聚氰胺的表面增强拉曼信号等步骤。根据三聚氰胺特殊的表面增强拉曼光谱信号完成在牛奶样品中对其的检测。本发明通过三聚氰胺的特有表面增强拉曼信号，直接将其区分于牛奶体系中的其它分子，进而判断其在牛奶中的有无和多少。该方法的检测限度符合牛奶中三聚氰胺的国家标准，可以为牛奶中三聚氰胺的检测提供一种快速灵敏的检测方法。CN103411950ACN103495ACN103411950A权利要求书1/1页1.一种基于表面增强拉曼活性芯片快速直接检测牛奶中三聚氰胺的方法，其步骤如下：（a）制备具有表面增强拉曼活性的中空的金属纳米粒子溶胶；（b）制备表面增强拉曼活性芯片；（c）对待检测的牛奶样品进行离心处理，取上清液为待测液；（d）将待测液中的三聚氰胺分子结合到表面增强拉曼活性芯片上；（e）对上述芯片进行表面增强拉曼检测，得到牛奶样品的表面增强拉曼光谱；（f）将该表面增强拉曼光谱与“三聚氰胺浓度-拉曼光谱特征峰强度”的标准曲线进行比对，从而实现对牛奶样品中三聚氰胺的定性和定量检测。2.如权利要求1中所述的一种基于表面增强拉曼活性芯片快速直接检测牛奶中三聚氰胺的方法，其特征在于：步骤（a）中的金属纳米粒子为金或银纳米粒子。3.如权利要求1中所述的一种基于表面增强拉曼活性芯片快速直接检测牛奶中三聚氰胺的方法，其特征在于：步骤（b）首先是将具有微米级别平整度的玻璃片、单质硅片或二氧化硅片基底进行表面羟基化，使基底表面带负电荷；然后用聚正电解质对羟基化的基底表面进行修饰，使修饰后的基底表面带正电荷；最后将带正电荷的基底加入到步骤（a）制备的金属纳米粒子溶胶内浸泡2～5小时，取出后用去离子水洗净，氮气吹干，即制备得到具有表面增强拉曼活性的芯片。4.如权利要求1中所述的一种基于表面增强拉曼活性芯片快速直接检测牛奶中三聚氰胺的方法，其特征在于：步骤（c）中的离心速度为6000～10000转每分钟，离心时间为10～20分钟，离心次数为2～3次。5.如权利要求1中所述的一种基于表面增强拉曼活性芯片快速直接检测牛奶中三聚氰胺的方法，其特征在于：步骤（d）是将表面增强拉曼活性芯片浸泡在待测液中5～15分钟，将芯片取出后用去离子水冲净，氮气吹干，从而使待测液中的三聚氰胺分子结合到表面增强拉曼活性芯片上。6.如权利要求1中所述的一种基于表面增强拉曼活性芯片快速直接检测牛奶中三聚氰胺的方法，其特征在于：步骤（f）中标准曲线是进行步骤（a）、（b）、（c）、（d）、（e）的操作，步骤（c）中待检测牛奶样品中三聚氰胺的浓度是已知的，从而拟合得到“三聚氰胺浓度与拉曼光谱特征峰712cm-1强度”的浓度-强度线性关系曲线。2CN103411950A说明书1/4页基于表面增强拉曼活性芯片对牛奶中三聚氰胺进行检测的方法技术领域[0001]本发明属于食品中添加剂检测技术领域，具体涉及一种基于表面增强拉曼活性芯片对牛奶中三聚氰胺分子进行检测的方法。背景技术[0002]三聚氰胺分子（1,3,5-三嗪-2,4,6-三胺）是一种用于制造三聚氰胺树脂的原材料。近年来，不法分子将三聚氰胺分子非法添加到牛奶等蛋白质类食品中，其主要目的是为了提高产品的虚假蛋白质含量。原因是三聚氰胺分子氮元素含量高达66%，而常规检测食品中蛋白质含量的方法正是根据产品中氮元素含量来确定蛋白质的含量,如凯氏定氮法，无法将蛋白质和三聚氰胺分子区分开来。所以不法分子通过非法添加三聚氰胺的方法，达到虚假提高产品蛋白质含量的目的。三聚氰胺分子进入人体会造成很大的危害，尤其是对泌尿系统的危害最为严重。2008年某品牌的奶粉中非法掺入三聚氰胺，使得在很多食用过该品牌奶粉的儿童体内发现患有肾结石。2007年在美国，由于宠物食品中的非法