一种龟甲胶及其制品的检测物及其液质联用检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103630622103630622A(43)申请公布日2014.03.12(21)申请号201310518572.4(22)申请日2013.10.28(71)申请人山东东阿阿胶股份有限公司地址252201山东省聊城市东阿县阿胶街78号(72)发明人段小波秦玉峰尤金花周祥山田守生郭尚伟嵇传良牛伟霞(74)专利代理机构北京和信华成知识产权代理事务所(普通合伙)11390代理人胡剑辉(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)权权利要求书1页利要求书1页说明书7页说明书7页附图2页附图2页(54)发明名称一种龟甲胶及其制品的检测物及其液质联用检测方法(57)摘要本发明提供了一种检测龟甲胶及其制品的方法，其利用龟甲胶制品与其他仿制品基因组中具有特异性核苷酸序列或氨基酸序列的不同进行检测，所述特异性氨基酸序列如SEQIDNo.1所示。本发明的方法，能够快速检测龟甲胶及其制品中的驴、马、牛、猪、羊、鹿等伪品成分，从而分辨真伪。本发明还涉及多肽，及其由所述多肽与相应载体组成的组合物。此外，还包括所述多肽及其组合物在检测龟甲胶及其制品中驴、马、牛、猪、羊或鹿源性成分中的应用。CN103630622ACN10362ACN103630622A权利要求书1/1页1.一种检测龟甲胶及其制品的方法，其利用龟甲胶制品与其他仿制品基因组中具有特异性核苷酸序列或氨基酸序列的不同进行检测，所述特异性氨基酸序列如SEQ.IDNo1所示。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述龟甲胶制品选自龟甲胶制成的食品、保健品或药品中的一种，且配方中不含有驴、马、牛、猪、羊、鹿源性成分。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述其他仿制品是指驴、马、牛、猪、羊或鹿中的一种或几种熬制而成的胶类物质。4.根据权利要求1～3中任意一项所述的方法，其具体包括如下步骤：（1）选取龟甲胶制品与其他仿制品基因组中特异性氨基酸序列或氨基酸序列,所述特异性氨基酸序列如SEQ.IDNo1所示;（2）将龟甲胶或其制品溶解，或提取所述龟甲胶或其制品的蛋白多肽类成分并溶解，随后加入限制性内切酶进行酶切；（3）将步骤（2）得到的酶切后的溶液放入液质联用仪，以龟甲胶纯品为基质，加入步骤（1）所述氨基酸序列作为对照，并选择该氨基酸序列的母离子m/z553.3及其子离子进行监测。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤（2）中所述溶解所用的试剂为1%、pH值8.0的NH4HCO3溶液；所述限制性内切酶为胰蛋白酶。6.一种检测龟甲胶及其制品的分子标记物，该分子标记物的氨基酸序列如SEQ.IDNo1所示。7.编码权利要求6所述的蛋白的基因。8.权利要求6所述的分子标记物在检测龟甲胶中是否含有驴、马、牛、猪、羊或鹿源性成分中的应用。9.一种药物组合物，其特征在于，包含药学有效量的权利要求6所述的蛋白和一种或多种药学上可接受的载体。10.权利要求9所述的药物组合物在检测龟甲胶中是否含有驴、马、牛、猪、羊或鹿源性成分中的应用。2CN103630622A说明书1/7页一种龟甲胶及其制品的检测物及其液质联用检测方法技术领域[0001]本发明涉及一种驴、马、牛、猪、羊或鹿源性成分的检测物及其检测方法，具体可应用于龟甲胶及其制品的真伪鉴定，属于中药检测领域。背景技术[0002]龟甲，即龟科动物乌龟(Chinemysreevesii)的背甲及腹甲，属于传统名贵中药。据最新版的中国药典记载，服用龟甲能够滋阴潜阳，益肾强骨，养血补心。近些年来，随着生物学水平的提高，龟甲的相关研究也不断深入。有研究表明，龟甲粉末及其提取物不仅能够增强肝功能、缓解压力，还具有抗癌以及调节免疫抵抗力的功效。以龟甲为原料而制成的两类产品龟苓膏和龟甲胶在整个中药市场上占据着重要的位置。[0003]据2010年版中国药典记载，龟甲胶是以龟甲为原料，经水煎煮、浓缩制成的固体胶，性咸、甘、凉，归肝、肾、心经。能够滋阴、养血、止血，主要用于阴虚潮热、骨蒸盗汗、腰膝酸软、血虚萎黄、崩漏带下等。长期服用龟甲胶还有利于增强机体自身调节，能够延年益寿，也利于阴虚阳亢患者的身体康复。随着生活水平的不断提高，与阿胶类似，龟甲胶也成为人们进补的首选之一。[0004]由于龟甲自身比较名贵，药用价值显著，并且龟肉也常常用于烹饪各类补品供人们食用，近些年来对各种龟类的捕杀现象十分严重，甚至于某些龟类品种濒临灭绝。因此，龟甲原料的供应非常有限，并且价格高昂，也直接影响到了龟甲胶的生产。在龟甲胶市场上存在某些假冒伪劣产品，其制作原料并非龟甲，而是由其他动物杂皮、碎骨代替，包括猪皮、牛皮，甚至病死动物之皮，脏皮、烂皮等。该类假冒伪劣产品一旦成形，无论外观、色泽、