乙型肝炎表面抗原测定试剂盒以及检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103630531103630531A(43)申请公布日2014.03.12(21)申请号201310652173.7(22)申请日2013.12.06(71)申请人苏州长光华医生物医学工程有限公司地址215163江苏省苏州市高新区科技城锦峰路8号4号楼(72)发明人陈秀发胡庆锋常立峻徐海伟李勇(74)专利代理机构南京纵横知识产权代理有限公司32224代理人董建林(51)Int.Cl.G01N21/76(2006.01)权利要求书1页权利要求书1页说明书5页说明书5页(54)发明名称乙型肝炎表面抗原测定试剂盒以及检测方法(57)摘要本发明提供一种乙型肝炎表面抗原测定试剂盒，包括试剂M、试剂R1、试剂R2以及校准品，试剂M中组分包括亲和素包被磁微粒，亲和素包被磁微粒经诊断试剂防腐剂处理；试剂R1中的组分包括生物素化Anti-HBs、磷酸盐缓冲液以及诊断试剂防腐剂；试剂R2中的组分包括吖啶酯标记的Anti-HBs、磷酸盐缓冲液以及诊断试剂防腐剂；对照组包括人源性乙肝表面抗原、新生牛血清以及诊断试剂防腐剂。本发明涉及的乙型肝炎表面抗原测定试剂盒，制备简单，使用方便，易于储存，可用于定量测定人体血清（血浆）中乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的浓度，HBsAg检测可用于辅助诊断HBV感染和预防HBV通过血制品传播，也可用于急性、慢性乙肝患者的病程监测。CN103630531ACN10365ACN103630531A权利要求书1/1页1.一种乙型肝炎表面抗原测定试剂盒，其特征在于，包括试剂M、试剂R1、试剂R2以及校准品，所述试剂M中组分包括亲和素包被磁微粒，所述亲和素包被磁微粒经诊断试剂防腐剂处理；所述试剂R1中的组分包括生物素化Anti-HBs、磷酸盐缓冲液以及诊断试剂防腐剂；所述试剂R2中的组分包括吖啶酯标记的Anti-HBs、磷酸盐缓冲液以及诊断试剂防腐剂；所述对照组包括人源性乙肝表面抗原、新生牛血清以及诊断试剂防腐剂。2.根据权利要求1所述的乙型肝炎表面抗原测定试剂盒，其特征在于，所述亲和素包被磁微粒的亲和素为链霉亲和素、中性亲和素或类亲和素，所述亲和素包被磁微粒中的磁微粒是以四氧化三铁为内核表面包裹活性基团的聚合物，所述磁微粒的直径为1.5um。3.根据权利要求1所述的乙型肝炎表面抗原测定试剂盒，其特征在于，试剂R1和试剂R2中所述磷酸缓冲液的浓度均为0.01M，pH值为7.4。4.根据权利要求1所述的乙型肝炎表面抗原测定试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂防腐剂为0.1%的Proclin300防腐剂。5.根据权利要求1所述的乙型肝炎表面抗原测定试剂盒，其特征在于，所述试剂R1的量为6ml，所述试剂R2的量为12ml，所述试剂M的量为3ml。6.根据权利要求1所述的乙型肝炎表面抗原测定试剂盒，其特征在于，所述校准品包括校准品1和校准品2两组，所述校准品1的量为0.5ml，HBsAg浓度为0.1IU/ml，所述校准品2的量为0.5ml，HBsAg浓度为30IU/ml。7.一种使用权利要求1-6所述的乙型肝炎表面抗原测定试剂盒的检测方法，其特征在于，包括以下几步：（1）在将待测样品和含有生物素化Anti-HBs的试剂R1进行反应，形成含有抗原-抗体复合体的反应液1；（2）在反应液1中加入含有亲和素包被磁微粒的试剂M，反应液1中的复合体在生物素和亲和素的相互作用下形成固相，得到了反应液2；（3）反应液2置于一个磁场内，检测其中的磁微粒将被吸附，通过洗涤液洗涤，将未结合物冲洗除去，得到反应液3；（4）在反应液3中加入含有吖啶酯标记的Anti-HBs的试剂R2，吖啶酯标记的Anti-HBs与磁微粒上的HBsAg复合物反应，得到反应液4；（5）将反应液4置于化学发光测定仪上进行检测，在磁场中磁微粒将被吸附，通过洗涤液洗涤，将未结合物冲洗除去；然后，注入化学发光激发液1及化学发光激发液2，检测其化学发光光子强度；产生的光强度与样本内乙型肝炎表面抗原浓度成正比。8.根据权利要求7所述的乙型肝炎表面抗原测定试剂盒的检测方法，其特征在于，所述化学发光激发液1中含有过氧化氢，所述化学发光激发液2中含有氢氧化钠，所述洗涤液含有磷酸盐缓冲液。2CN103630531A说明书1/5页乙型肝炎表面抗原测定试剂盒以及检测方法技术领域[0001]本发明涉及乙型肝炎诊断试剂盒，具有设计基于双抗原化学发光原理的乙型肝炎表面抗原测定试剂盒及检测方法。背景技术[0002]乙型肝炎是由乙型肝炎病毒（HBV）感染引起的一种传染性疾病。HBV可以通过血液和体液直接传播，常见的传播方式包括输血、注射、伤口接触、母婴传播等；常见的临床症状有不适、发热、黄疸、无症状肝炎、暴发性肝炎以