淫羊藿EsSVP蛋白、编码该蛋白的基因及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103694325103694325A(43)申请公布日2014.04.02(21)申请号201310370795.0(22)申请日2013.08.22(71)申请人西南大学地址400715重庆市北碚区天生路2号(72)发明人李志能(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002代理人王朋飞(51)Int.Cl.C07K14/415(2006.01)C12N15/29(2006.01)C12N15/82(2006.01)C12N1/15(2006.01)C12N1/19(2006.01)C12N1/21(2006.01)A01H5/00(2006.01)权利要求书1页权利要求书1页说明书10页说明书10页序列表2页序列表2页附图5页附图5页(54)发明名称淫羊藿EsSVP蛋白、编码该蛋白的基因及其应用(57)摘要本发明提供淫羊藿EsSVP蛋白、编码该蛋白的基因及其应用，所述淫羊藿EsSVP蛋白的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，编码该蛋白的基因序列如SEQIDNo.2所示。本发明首次克隆获得淫羊藿EsSVP基因，并通过转基因技术，在植物（拟南芥、矮牵牛）中验证了该基因的功能。对于淫羊藿花期和花瓣、萼片的性状及其调控机制方面的研究提供参考和依据，为进一步改良观赏性植物，如淫羊藿的观赏性状提供可能。CN103694325ACN10369425ACN103694325A权利要求书1/1页1.淫羊藿EsSVP蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。2.编码权利要求1所述蛋白的基因。3.如权利要求2所述的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQIDNo.2所示。4.含有权利要求2或3所述基因的载体。5.含有权利要求2或3所述基因的工程菌。6.权利要求2或3所述基因在改良植物花瓣性状中的应用。7.权利要求2或3所述基因在调控植物花期、花萼形状、大小、厚度及花瓣开合程度中的应用。8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述植物为拟南芥或矮牵牛。9.权利要求2或3所述基因在制备转基因植物中的应用。10.一种转基因植株的构建方法，其特征在于，采用农杆菌介导的方法，将权利要求4所述的载体转入植物组织中，筛选转基因植株。2CN103694325A说明书1/10页淫羊藿EsSVP蛋白、编码该蛋白的基因及其应用技术领域[0001]本发明涉及基因工程领域，具体地说，涉及淫羊藿EsSVP蛋白、编码该蛋白的基因及其应用。背景技术[0002]淫羊藿隶属毛茛目、小檗科Berbridaceae，该属植物花型奇特，花色、叶色丰富，多数为常绿草本，具有非常优良的园林观赏特性，自然生境多为林下、草丛或灌丛，其耐阴性和适应性强（Stearn,2002），在欧美及中国部分地区已广泛应用于盆栽、专类园、岩石园、花境和地被（任璘等，2008）。中国是淫羊藿种质资源较为重要的起源中心之一，在已知的50多个品种中，原产于中国的就多达40多种，约占总数的80%，丰富优良的野生资源为开发淫羊藿属植物作为新型观赏植物提供了可能。[0003]淫羊藿属是古老的基部真双子叶植物，在进化上属于双子叶植物和单子叶植物分离后的第一个分枝，是古老的二倍体（2n＝2x＝12），是小檗科唯一具有二基数花的属，花被共6轮，两两对生，成花时每两轮接近排列成一轮，呈3轮：外萼片、内萼片和花瓣(Terabayashi,1979)。然而，目前尚未发现有关淫羊藿花瓣、萼片的性状及其调控机制方面研究的报道。[0004]花发育相关基因中大部分来自于一个保守的转录因子基因家族—MADS-box基因家族。MADS的名称来源于MCM1（Minichromosomemaintenancegene）（来自啤酒酵母）（Passmoreetal.1988）、AG（来自拟南芥）（Yanofskyetal.1990）、DEF（DEFICIENS）（来自金鱼草）（Schwarz-Sommeretal.1992;Sommeretal.1990）和SRF（Serumresponsefactor）（来自现代人）（Normanetal.1988）四个最早被鉴定的该家族成员的首字母。[0005]目前已经从被子植物各大类群中分离到了大量的MIKCc型MADS-box基因，并对这些基因的系统发育关系进行了重建，研究表明，被子植物中的这些MADS-box基因可被划归至12个主要的基因亚家族（genesubfamilies）中：AP1/SQUA、AP3/PI、AG/STK、SEP、AGL6、GGM13、SVP/STMADS11、SOC1/TM3、AGL12、AG