一种牛奶和奶粉中氰化物含量的检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105699574A(43)申请公布日2016.06.22(21)申请号201610204617.4(22)申请日2016.04.05(71)申请人秦皇岛出入境检验检疫局检验检疫技术中心地址066004河北省秦皇岛市经济技术开发区六盘山路1号(72)发明人崔宗岩曹彦忠钱云开王飞贾光群张少博石秋玉黄学者(74)专利代理机构北京市诚辉律师事务所11430代理人唐宁(51)Int.Cl.G01N30/88(2006.01)G01N30/06(2006.01)权利要求书2页说明书5页附图3页(54)发明名称一种牛奶和奶粉中氰化物含量的检测方法(57)摘要一种牛奶和奶粉中氰化物含量检测的气相色谱-串联四级杆质谱检测方法，样品在碱性条件下，使用十八烷基三甲基溴化铵为相转移催化剂，以五氟苄基溴(PFB-Br)为衍生试剂，将氰根离子(CN-)衍生为挥发性的衍生产物五氟苯基乙腈(PFB-CN)，采用气相色谱-串联四级杆质谱(GC-MS/MS)检测，标准曲线法定量，得到样品中氰化物含量。采用本发明方法检测牛奶和奶粉中氰化物的含量，具有操作简便、灵敏度高的优点。CN105699574ACN105699574A权利要求书1/2页1.一种牛奶和奶粉中氰化物的检测方法，其特征在于，采用十八烷基三甲基溴化铵作为相转移催化剂和蛋白沉淀剂，五氟苄基溴(PFB-Br)为衍生试剂，气相色谱-串联四级杆质谱法进行检测。2.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述方法具体包括以下步骤：(1)取牛奶样品(奶粉样品使用去离子水按照1：10(m/v)的比例进行稀释，混匀)，加入适量的氢氧化钾溶液调节其pH值为10左右，然后加入十八烷基三甲基溴化铵溶液和五氟苄基溴-二氯甲烷溶液，混匀后在水浴条件下衍生反应；(2)离心后取下层有机相，过有机相滤膜后的待测溶液转移至进样瓶中，进行气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)检测；(3)将样品检测结果通过外标法和氰化物基质标准曲线进行比对，计算样品中氰化物的含量。3.根据权利要求2所述检测方法，其特征在于，步骤(1)具体参数为：1)氢氧化钾溶液浓度0.1mol/L，2)十八烷基三甲基溴化铵(0.05mol/L)溶液：牛奶样本的比例为，1:5(v/v)，3)五氟苄基溴-二氯甲烷(0.4％，v/v)溶液：牛奶样本的比例为，1:1(v/v)，4)通过在涡旋混匀器上涡旋2min混匀；5)衍生反应条件为30℃水浴30min。4.根据权利要求2或3所述检测方法，其特征在于，所述的检测方法的步骤(2)具体参数为：1)离心转速10000r/min，温度4℃，时间15min；2)用注射器取下层有机相；3)有机相滤膜为0.45μm孔径。5.根据权利要求2-4任一所述检测方法，其特征在于，所述GC-MS/MS分析条件如下：(1)色谱分离条件：色谱柱：DB-5MS毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)；程序升温：初始温度50℃，保持1min，然后以20℃/min升至250℃，保持3min。柱流量：1.2mL/min；进样口温度：250℃；载气：高纯氦(纯度不低于99.999％)；进样方式：不分流进样；进样量：1.0μL。(2)质谱检测条件：离子源为EI源；传输线温度250℃；离子源温度230℃；溶剂延迟4.0min；碰撞气为氩气；氰根离子(CN-)衍生产物五氟苯基乙腈(PFB-CN)的保留时间为5.49min；定量离子对及对应的碰撞电压分别为207>157，15eV；2CN105699574A权利要求书2/2页辅助定性离子对及对应的碰撞电压分别为207>188，10eV。6.根据权利要求2-4任一所述检测方法，其特征在于，所述的氰化物基质标准曲线的制备方法为：1)取多份牛奶样品，向其中分别加入适量氰化物标准，混匀，使得其中氰化物为梯度浓度，所述浓度梯度优选为0、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0mg/L；2)按照前述方法步骤(1)和(2)的操作进行标准品的衍生、分离和检测，得基质标准曲线。7.根据权利要求2-4任一所述检测方法，其特征在于，所述的外标法为：1)将步骤(2)中获得的待测溶液进行GC-MS/MS检测，得到样品中氰化物峰面积；2)采用所述基质标准曲线进行定量，得到样品溶液中氰化物含量，从而计算得到样品中氰化物的含量。8.权利要求1-7任一所述的方法在检测牛奶和奶粉中氰化物的应用。3CN105699574A说明书1/5页一种牛奶和奶粉中氰化物含量的检测方法技术领域[0001]本发明属于食品安全检测技术领域，具体涉及一种牛奶和奶粉中氰化物含量的检测方法。背景技术[0002]氰化物是一类常见剧毒物质，常见无机氰化物包括氰化钠、氰化钾和氰化氢等，氰化物进入机体