一种牛奶和奶粉中抗病毒药物残留检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113295785A(43)申请公布日2021.08.24(21)申请号202110501015.6(22)申请日2021.05.08(71)申请人湖南新程检测有限公司地址412000湖南省株洲市天元区天易科技城自主创业园一期A8栋103、203号(72)发明人陈辉高霞陈柏娥谭敏王刚(74)专利代理机构成都瑞创华盛知识产权代理事务所(特殊普通合伙)51270代理人邓瑞辜强(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/14(2006.01)G01N30/72(2006.01)权利要求书2页说明书8页附图7页(54)发明名称一种牛奶和奶粉中抗病毒药物残留检测方法(57)摘要本发明公开了一种牛奶和奶粉中抗病毒药物残留检测方法，属于药物残留检测技术领域，包括以下步骤：S1提供待检测牛奶样品、待检测奶粉样品、牛奶空白样品、奶粉空白样品、酸化乙腈；S2均质提取所述待检测牛奶样品和待检测奶粉样品中的目标化合物；S3分别对所述提取液一、提取液二进行净化处理；S4梯度洗脱处理；S5超高效液相色谱‑串联质谱仪检测处理；S6对所述5种抗病毒药物的标准曲线、相关系数、检测限和定量限进行检测计算；S7对所述5种抗病毒药物的加标回收率及相对标准偏差RSD进行计算。本发明提出的抗病毒药物残留检测方法，操作简单、灵敏度高、选择性好，适用于牛奶和奶粉中抗病毒类药物残留的快速检测。CN113295785ACN113295785A权利要求书1/2页1.一种牛奶和奶粉中抗病毒药物残留检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1提供待检测牛奶样品、待检测奶粉样品、牛奶空白样品、奶粉空白样品、酸化乙腈、无水硫酸镁、氯化钠；S2均质提取所述待检测牛奶样品和待检测奶粉样品中的目标化合物；S21对待检测牛奶样品中的目标化合物进行提取，得到混合液一；S22对待检测奶粉样品中的目标化合物进行提取，得到混合液二；S23提取混合液一、混合液二中的上清液，分别标记为提取液一、提取液二，备用；S3分别对所述提取液一、提取液二进行净化处理，得到标准溶液一、标准溶液二；S31移取2ml提取液一加至塑料离心管中，涡旋混匀1min，使用离心机离心处理3min后，吸取上清液过微孔滤膜，获得标准溶液一；S32移取2ml提取液二加至塑料离心管中，涡旋混匀1min，使用离心机离心处理3min后，吸取上清液过微孔滤膜，获得标准溶液二；S4对所述标准溶液一、标准溶液二进行梯度洗脱处理；S5分别对洗脱处理后的标准溶液一和标准溶液二，进行超高效液相色谱‑串联质谱仪检测处理，检测到5种抗病毒药物；所述串联质谱仪的运行条件包括：(1)所述串联质谱仪选用电喷雾离子源ESI，离子源温度为550℃；电喷雾电压为5500V；(2)所述串联质谱仪采用多反应监测MRM的检测方式；气帘气压力为35psi、碰撞气压力为9psi、雾化器压力为55psi、辅助气压力为60psi；(3)所述串联质谱仪采用正离子模式进行扫描；入口电压为10.0V、碰撞室出口电压为6V；5种抗病毒药物分别为金刚烷胺、咪喹莫特、奥司他韦、美金刚和金刚乙胺；S6对所述5种抗病毒药物的标准曲线、相关系数、检测限和定量限进行检测计算；S61在牛奶空白样品中添加一系列质量浓度的提取液一，以提取液一的质量浓度为横坐标，以质谱定量峰面积为纵坐标绘制标准曲线；S62在奶粉空白样品中添加一系列质量浓度的提取液二，以提取液二的质量浓度为横坐标，以质谱定量峰面积为纵坐标绘制标准曲线；S63以信噪比S/N＝3确定检测限，以信噪比S/N＝10确定定量限，根据标准曲线分别计算5种抗病毒药物的相关系数、检测限和定量限；S7对所述5种抗病毒药物的加标回收率及相对标准偏差RSD进行计算：S71按低、中高、高三种添加水平将标准溶液一加入牛奶样品中，每种添加水平平行测定6次，计算5种抗病毒药物的平均加标回收率和相对标准偏差；S72按低、中高、高三种添加水平将标准溶液二加入奶粉样品中，每种添加水平平行测定6次，计算5种抗病毒药物的平均加标回收率和相对标准偏差。2.根据权利要求1所述的一种牛奶和奶粉中抗病毒药物残留检测方法，其特征在于：取10ml醋酸加至乙腈中，并定容至1L得到所述酸化乙腈。3.根据权利要求1所述的一种牛奶和奶粉中抗病毒药物残留检测方法，其特征在于：称取10g牛奶样品置于50mL的离心管中，依次加入20mL酸化乙腈、5g无水硫酸镁和2g氯化钠，震荡处理1min后，使用离心机离心处理3min，得到混合液一；2CN113295785A权利要求书2/2页和/或，称取2g奶粉样品置于50mL离心管中，加10mL水进行涡旋混匀，静置30min，依次加入20m