一种暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的合成方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106069187A(43)申请公布日2016.11.09(21)申请号201610431882.6(22)申请日2016.06.17(71)申请人云南省热带作物科学研究所地址666100云南省西双版纳傣族自治州景洪市宣慰大道99号(72)发明人刘静曹旸张春霞何明霞王文兵许欣景高锋方艺伟(74)专利代理机构昆明今威专利商标代理有限公司53115代理人赛晓刚(51)Int.Cl.A01G1/04(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的合成方法(57)摘要本发明涉及菌类仿生栽培领域，具体而言，涉及一种暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的合成方法。该菌腔虫瘿的合成方法，包括下列步骤：1)暗褐网柄牛肝菌固体原种，由云南省热带作物科学研究所植物保护与微生物研究中心牛肝菌课题提供；2)从野外宿主树根上菌腔虫瘿里面挑取粉蚧，用南瓜饲养扩繁；3)培养宿主树的无菌苗；4)待无菌苗长出侧根时，在其根系接种暗褐网柄牛肝菌固体菌种和粉蚧，保持基质湿润，维持温度为28℃±2℃，培养得到暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿。本发明提供的合成方法可有效建立暗褐网柄牛肝菌与宿主树的共生关系，能够成功合成菌腔虫瘿，菌腔感染率高达83％-90％。CN106069187ACN106069187A权利要求书1/1页1.一种暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的合成方法，其特征在于，步骤如下(1)获得暗褐网柄牛肝菌的固体原种；(2)从野外宿主树根上菌腔虫瘿里面挑取粉蚧，用南瓜饲养扩繁；(3)培养寄主树的无菌苗；(4)待无菌苗长出侧根时，在其根系接种暗褐网柄牛肝菌固体原种和粉蚧，保持基质湿润，维持温度为28℃±2℃，培养得到暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿。2.根据权利要求1所述的暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的合成方法，其特征在于，步骤(2)中所述的粉蚧是大洋臀纹粉蚧(Planococcusminor)，选用咖啡树为宿主树种；采用从宿主树咖啡树根上的菌腔虫瘿里面挑取，带回室内镜检后接种到南瓜上饲养扩繁，南瓜用75％的酒精消毒表面，晾干后方可接粉蚧；步骤(3)所述培养寄主树的无菌苗是将咖啡种子培养至萌发出芽点，移栽入无菌苗培养基中培养，培养后得到无菌苗。3.根据权利要求1所述的暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的合成方法，其特征在于，所述步骤(1)中的暗褐网柄牛肝菌固体原种，由云南省热带作物科学研究所植物保护与微生物研究中心牛肝菌课题提供，其菌种编号：13013，培菌室培养时间为40-60d。4.根据权利要求1所述的暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的合成方法，其特征在于，在步骤(2)中，大洋臀纹粉蚧(Planococcusminor)的培养温度为25℃±2℃，南瓜表面用75％的酒精消毒，晾干后方可饲养粉蚧。5.根据权利要求1所述的暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的合成方法，其特征在于，在步骤(3)中，无菌苗培养基包括下列组分，按体积计：草炭30–50份，蛭石20–40份，牛粪10–30份，珍珠岩40–60份，菜园土60–80份。6.根据权利要求1所述的暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的合成方法，其特征在于，在步骤(3)中，无菌苗培养基的pH值4.0–6.0。7.根据权利要求3所述的暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的合成方法，其特征在于，在步骤(4)中，接种的暗褐网柄牛肝菌固体原种掰成3cm3–5cm3大小的块，每株树菌种的接种量为50g–100g。8.根据权利要求1或4所述的暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的合成方法，其特征在于，在步骤(4)中，大洋臀纹粉蚧(Planococcusminor)的接种量为50–100头/株。9.根据权利要求1所述的暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的合成方法，其特征在于，在步骤(4)中，基质湿度保持在40％–60％，维持温度为28℃±2℃。10.根据权利要求1所述的暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的合成方法，其特征在于，在接种暗褐网柄牛肝菌固体原种和大洋臀纹粉蚧之前，对基质进行121℃灭菌1小时的灭菌处理，冷却后方可接种。2CN106069187A说明书1/4页一种暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的合成方法技术领域[0001]本发明涉及菌类仿生栽培领域，具体而言，涉及一种暗褐网柄牛肝菌菌腔虫瘿的合成方法。背景技术[0002]暗褐网柄牛肝菌Phlebopusportentosus(Berk.&Broome)Boedijn，又名巨型牛肝菌，俗名“黑牛肝菌”，属于牛肝菌目小牛肝菌科网脉柄牛肝菌属。分布于斯里兰卡、越南、印度尼西亚、泰国、巴西、墨西哥、澳大利亚,新西兰等地区,国内主要分布在云南，广西和海南也都有分布。其子实体硕大，肉肥厚，柄粗壮，营养丰富，富含蛋白质和钾、钙、镁、铁、锌等多种人体所需的矿质元素，其价格是普通食用菌的几倍、十几倍，具有很高的经济价值。[0003