一种冻干疫苗耐热保护剂及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106237339A(43)申请公布日2016.12.21(21)申请号201610768786.0A61K47/20(2006.01)(22)申请日2016.08.30A61K47/02(2006.01)A61K39/245(2006.01)(71)申请人成都天邦生物制品有限公司A61K39/12(2006.01)地址610000四川省成都市经济技术开发A61K9/19(2006.01)区灵池街358号A61P31/22(2006.01)(72)发明人徐宏军胡来根高鹏岳丰雄A61P31/14(2006.01)黄杰(74)专利代理机构四川省成都市天策商标专利事务所51213代理人刘兴亮(51)Int.Cl.A61K47/42(2006.01)A61K47/18(2006.01)A61K47/26(2006.01)A61K47/32(2006.01)权利要求书1页说明书7页(54)发明名称一种冻干疫苗耐热保护剂及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种冻干疫苗耐热保护剂及其制备方法和应用。它包括以下质量百分比的原料：0.3～0.6％的L-谷氨酸钠、8～14％的蔗糖、2～5％的D-山梨醇、1～3％的牛血清白蛋白、0.1～0.3％的聚乙烯吡咯烷酮、0.2～1％的硫脲、3～5％的NZ-AmineAS、0.8～1.5％的水解明胶，余量为pH7.2的PBS。本发明的冻干疫苗耐热保护剂经过无菌处理后应用于猪伪狂犬病活疫苗和猪繁殖与呼吸道综合征活疫苗的冻干。两种病毒采用同样的耐热保护剂和冻干工艺，冻干损失低于0.2个滴度，37℃放置7日，病毒含量滴度降低小于1个滴度，能在2～8℃保存24个月；为冻干疫苗的生产提供了便利，同时也提高了产品质量及竞争力。CN106237339ACN106237339A权利要求书1/1页1.一种冻干疫苗耐热保护剂，其特征在于它包括以下质量百分比的原料：0.3～0.6％的L-谷氨酸钠、8～14％的蔗糖、2～5％的D-山梨醇、1～3％的牛血清白蛋白、0.1～0.3％的聚乙烯吡咯烷酮、0.2～1％的硫脲、3～5％的NZ-AmineAS、0.8～1.5％的水解明胶，余量为pH7.2的PBS。2.一种权利要求1所述的冻干疫苗耐热保护剂的制备方法，其特征在于它包括以下步骤：A，组方Ⅰ的配制：按配比称取L-谷氨酸钠、蔗糖、D-山梨醇、牛血清白蛋白、聚乙烯吡咯烷酮、硫脲和NZ-AmineAS，分别用PBS充分溶解后混合均匀，然后经0.22μm除菌滤器过滤后，4℃保存备用；B，组方Ⅱ的配制：按配比称取水解明胶，用PBS在70℃条件下充分溶解后，经115℃灭菌20min，然后置37℃保存备用；C，用PBS调节组方Ⅰ与组方Ⅱ的体积比为3：1，然后将组方Ⅰ和组方Ⅱ混合均匀后，得到所述的冻干疫苗耐热保护剂。3.一种权利要求1所述的冻干疫苗耐热保护剂的应用，其特征在于该冻干疫苗耐热保护剂用于猪伪狂犬病毒培养液或猪繁殖与呼吸综合征病毒培养液的冻干。4.根据权利要求3所述的冻干疫苗耐热保护剂的应用，其特征在于所述猪伪狂犬病毒为Bartha-k61株，猪繁殖与呼吸综合征病毒为JXA1-R株。5.根据权利要求3所述的冻干疫苗耐热保护剂的应用，其特征在于所述冻干的工艺包括以下步骤：(1)将冻干疫苗耐热保护剂与猪伪狂犬病毒培养液或猪繁殖与呼吸综合征病毒培养液混合配苗；然后按2mL/瓶进行分装；(2)将分装好的猪伪狂犬病毒培养液或猪繁殖与呼吸综合征病毒培养液依次经预冻阶段、一次干燥和解析干燥，密封后完成冻干，得到猪伪狂犬疫苗冻干产品或猪繁殖与呼吸综合征疫苗冻干产品。6.根据权利要求5所述的冻干疫苗耐热保护剂的应用，其特征在于在所述冻干的工艺的步骤(2)中，冻干疫苗耐热保护剂与猪伪狂犬病毒培养液按体积比为1:3进行配苗；或者将冻干疫苗耐热保护剂与猪繁殖与呼吸综合征病毒培养液按体积比为1:4进行配苗。7.根据权利要求5所述的冻干疫苗耐热保护剂的应用，其特征在于在所述冻干的工艺的步骤(2)中，所述预冻阶段是指在1h内将病毒培养液从常温降至-42℃后，维持该温度放置3h；所述一次干燥是将经预冻阶段的病毒培养液的温度在0.5h从-42℃升温至-5℃，维持该温度并控制压力为0.12mbar放置2h；接着10min将病毒培养液的温度从-5℃升温至0℃，维持该温度并控制压力为0.12mbar放置12h；最后10min将病毒培养液的温度从0℃升温至10℃，维持该温度并控制压力为0.12mbar放置1.5h；所述解析干燥是至将经一次干燥的病毒培养液的温度在0.5h从10℃升温至30℃，维持该温度并控制压力为0.22mbar放置5h；然后1min将病毒培养液的温度从30℃降温至28℃，维持该温度并