污海水脱氮弧菌菌剂的制备方法及其菌剂的用途.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106434423A(43)申请公布日2017.02.22(21)申请号201610723502.6(22)申请日2016.08.23(83)生物保藏信息CGMCCNo.123112016.03.25(71)申请人国家海洋局天津海水淡化与综合利用研究所地址300192天津市南开区科研东路1号(72)发明人任华峰邱金泉成玉陈进斌苗英霞姜天翔(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)C02F3/34(2006.01)C12R1/63(2006.01)C02F101/16(2006.01)权利要求书2页说明书9页序列表1页附图5页(54)发明名称污海水脱氮弧菌菌剂的制备方法及其菌剂的用途(57)摘要一种污海水脱氮弧菌菌剂的制备方法及其菌剂的用途，所述方法具有将菌株接种于培养基中，培养菌种的步骤，其中，菌株接种是将该弧菌试管种接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，培养温度为20℃-40℃、振荡速度为120-180转/分钟，摇瓶振荡培养至对数期；弧菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏编号为CGMCCNo.12311。污海水脱氮弧菌菌剂的用途为用弧菌菌株制成微生物净污菌剂用于海水养殖废水处理，其产业应用前景良好。CN106434423ACN106434423A权利要求书1/2页1.一种污海水脱氮弧菌菌剂的制备方法，该方法具有将菌株接种于培养基中，培养菌种的步骤，其中，菌株接种是将该弧菌试管种接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，培养温度为20℃-40℃、振荡速度为120-180转/分钟，摇瓶振荡培养至对数期；所述的污海水脱氮弧菌，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏编号为CGMCCNo.12311。2.如权利要求1所述的污海水脱氮弧菌菌剂的制备方法，还有，将培养好的菌种接入到发酵罐培养基的步骤：将培养好的菌种，按培养基重量的0.5％-1％或1％-2％的接种量接入到预设容积的发酵罐中，发酵罐中有预设量的发酵罐培养基，培养至对数生长期。3.如权利要求2所述的污海水脱氮弧菌菌剂的制备方法，还有，发酵培养的步骤：菌种接入到发酵罐后，无菌空气的通气量为10-30升/分钟，或/和，搅拌速度为120转/分钟-200转/分钟，或/和，培养温度为25℃-40℃，或/和，全流程培养时间为24-48小时，或/和，发酵完成后培养液分装，或采用无菌附着物吸附、干燥，制成固体菌剂。4.如权利要求1-3之一所述的污海水脱氮弧菌菌剂的制备方法，其中，将菌株接种于培养基中，培养菌种的步骤，其中，所述的牛肉膏蛋白胨培养基具有：蛋白胨1％，牛肉膏0.3％，氯化钠0.5％，pH7.0，余量为添加剂。5.如权利要求2-4之一所述的污海水脱氮弧菌菌剂的制备方法，其中，将培养好的菌种接入到发酵罐培养基的步骤：所述发酵罐培养基成分具有：Na2HPO4、KH2PO4、KNO3、葡萄糖和海水；当海水量为1000毫升时，Na2HPO4为7.9克，KH2PO4为1.5克，KNO3为1.0克，葡萄糖为9.4克，发酵罐培养基pH值为7.0-7.5。6.如权利要求1-5之一所述的污海水脱氮弧菌菌剂的制备方法，其中，将菌株接种于培养基中，培养菌种的步骤，其中，培养温度为20℃-25℃或26℃-30℃或31℃-35℃或36℃-37℃或38-40℃的任一范围值。7.如权利要求1-6之一所述的污海水脱氮弧菌菌剂的制备方法，其中，将菌株接种于培养基中，培养菌种的步骤，其中，振荡速度为120-150转/分钟或151-160转/分钟或161-170转/分钟或171-180转/分钟的任一范围值。8.如权利要求3-7之一所述的污海水脱氮弧菌菌剂的制备方法，其中，发酵培养的步骤：菌种接入到发酵罐后发酵培养，无菌空气通气量优选为10升/分钟或20升/分钟或30升/分钟的任一值；或/和，搅拌速度优选为60-90转/分钟或91-120转/分钟的任一范围值；或/和，培养温度优选为25℃-30℃或31℃-35℃或36℃-40℃的任一范围值；或/和，所述全流程培养时间优选为24-30小时或31-36小时或37-42小时或43-48小时任一范围值；或/和，所述污海水脱氮净污菌，适合pH值在5.0-6.0或6.1-7.0或7.1-8.0或8.1-9.0任一范围值；或/和，所述污海水脱氮菌菌株的适合碳源为葡萄糖或乙酸钠或丁二酸钠或草酸钠或柠檬酸钠任一种。9.如权利要求1-8之一所述方法制备的污海水脱氮弧菌菌剂，其中，所述具有污海水脱氮能力的弧菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏编号为CGMCCNo.12311；或/和，所述具有污海水脱氮能力的弧菌，所述具有污海水脱氮能力的弧菌，适合碳源为葡萄糖或乙