富氢精液稀释液及其制备方法和精液的保存方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115024307A(43)申请公布日2022.09.09(21)申请号202210675068.4(22)申请日2022.06.15(71)申请人上海市农业科学院地址201106上海市闵行区北翟路2901号(72)发明人张树山张德福戴建军吴彩凤孙玲伟徐皆欢(74)专利代理机构广州市科丰知识产权代理事务所(普通合伙)44467专利代理师罗啸秋(51)Int.Cl.A01N1/02(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称富氢精液稀释液及其制备方法和精液的保存方法(57)摘要本发明涉及生物材料保存技术领域，提供了一种富氢精液稀释液，向精液稀释液中通入氢气，得到富氢精液稀释液。该稀释液用于稀释精液并保存，可提高精子活力，降低精子的氧化损伤程度。同时，本发明还公开了该稀释液的制备方法以及精液的保存方法。CN115024307ACN115024307A权利要求书1/1页1.一种富氢精液稀释液，其特征在于，向精液稀释液中通入氢气，得到富氢精液稀释液。2.根据权利要求1所述的富氢精液稀释液，其特征在于，所述富氢精液稀释液隔绝氧气条件下保存。3.根据权利要求1所述的富氢精液稀释液，其特征在于，所述富氢精液稀释液中的氢气浓度为2～2.5ppm。4.一种如权利要求1‑3任一所述的富氢精液稀释液的制备方法，其特征在于，将0.6MPa‑0.8MPa的氢气持续通入精液稀释液中，并维持至少1h；然后在隔绝氧气条件下保存该富氢精液稀释液。5.根据权利要求4所述的富氢精液稀释液的制备方法，其特征在于，氢气的通入时间为2～5h。6.根据权利要求4所述的富氢精液稀释液的制备方法，其特征在于，所述富氢精液稀释液的保存温度为富氢精液稀释液的凝固点温度以上以及8℃以下。7.根据权利要求6所述的富氢精液稀释液的制备方法，其特征在于，所述富氢精液稀释液的保存温度为富氢精液稀释液的凝固点温度以上以及4℃以下。8.一种精液的保存方法，其特征在于，将精液和如权利要求1‑3任一所述的富氢精液稀释液混合，将混合后的混合液装入瓶子中避光、恒温15‑18℃、与大气隔离保存，定期晃动；富氢精液稀释液预先加热到与精液温度一致。9.根据权利要求8所述的精液的保存方法，其特征在于，所述精液和富氢精液稀释液的稀释质量比为1:1～5；保存温度为15‑17℃。10.根据权利要求8所述的精液的保存方法，其特征在于，所述精液为哺乳动物的精液。2CN115024307A说明书1/4页富氢精液稀释液及其制备方法和精液的保存方法技术领域[0001]本发明涉及生物材料保存技术领域，具体涉及一种富氢精液稀释液及其制备方法和精液的保存方法。背景技术[0002]在现有猪精液保存方法中，猪精液常温保存(17℃)具有应用效果最好、生产成本低和操作简单等优点，结合我国方便、快捷的快递体系，极大地推动了猪人工授精技术普及应用和专门化公猪站建设。常温保存精液使用约占目前国内猪人工授精90％以上。近几年来，研究者们在稀释液研发和包装控温等方面取得了较好进展，大大延长了常温保存精液的有效保存时间和辐射区域范围。[0003]猪常温保存精液，从精液采集到送至客户手中时长可达2～5d。尽管采用隔绝空气、低温(17℃)等手段精子呼吸代谢仍会产生大量的活性氧族(ROS)，ROS导致的氧化损伤是猪冻精品质急剧下降的主要原因。故寻找低毒、有效的抗氧化剂添加在稀释液中来降低精子氧化损伤程度，一直是猪常温保存稀释液的研究热点。[0004]本案要解决的技术问题是：如何降低精子氧化损伤度并提高精子活力。发明内容[0005]本发明的目的之一在于，提供一种富氢精液稀释液，该稀释液用于稀释精液并保存，可提高精子的完整率，降低精子的氧化损伤。[0006]同时，本发明还公开了该稀释液的制备方法以及精液的保存方法。[0007]为实现上述目的，本发明提供了一种富氢精液稀释液，向精液稀释液中通入氢气，得到富氢精液稀释液。[0008]本处所述加压条件是指对氢气加压并通入稀释液中，使稀释液含有的其他气体被排出，但是本方案并不保证其他气体被绝对排除彻底，本方案优选稀释液保持氢气饱和状态。[0009]本发明的稀释液的配方及制备方法如下：[0010]稀释液BTS：准确量取葡萄糖3.7g、二水柠檬酸三钠0.6g、EDTA0.125g、碳酸氢钠0.125g、氯化钾0.075g、青霉素钠0.06g和硫酸链霉素0.1g等，溶于双蒸水、搅拌，定容至100mL，调整PH至7.2，渗透压为310mosm/L。将上述稀释分装至市售塑料中药袋(250mL)冷藏保存。[0011]本发明并不限定为以上的配方，还可以采用全能健Z精液稀释粉(成都德麟科技有限公司)等、PRIMXcell中效稀释粉(法国卡苏公司)等。[001