PARTB生物分离工程实验.doc

PARTB生物分离工程实验

实验十三不同茶叶产物的提取及分离

一、实验目的
让学生了解不同茶叶产物的性质和提取工艺，掌握溶剂萃取技术和离子沉淀方法。

二、实验原理
茶叶中含有大量的茶多酚、茶多糖等物质，它们具有抗氧化、提高免疫力等生理功能。茶多酚是一种小分子酚酸类物质，主要以儿茶素、表儿茶素的形式存在，可通过大吸附树脂、离子沉淀等技术进行提取。茶多糖是一种糖缀合物，主要与酚类及蛋白质结合，可通过乙醇沉淀进行提取分离。另外本实验中也涉及了咖啡因的脱除方法。

三、实验仪器
小型万能粉碎机、搅拌器、水浴锅、离心机、旋转蒸发仪、循环水式真空泵、分液漏斗、干燥箱、烧瓶、烧杯、玻璃棒、量筒

四、实验材料与试剂
原料：茶叶500g
试剂：工业酒精、二氯甲烷、无水硫酸钠、盐酸、氯化锌、乙酸乙酯

五、实验步骤
1.用小型粉碎机将茶叶粉碎为40目左右；
2.取20g粉末放入1L烧杯中，按1：8比例加入蒸馏水，在70℃下搅拌提取1小时；
3.1×5000g离心10min，将上清液移入另一烧杯中；
4.加入终体积为80%的酒精，混匀，静置20min；
5.1×5000g离心10min，分离出沉淀即为茶多糖；
6.将上清移入烧杯中，在-0.1MPa、60℃下进行真空浓缩，浓缩至体积30ml左右；
7.将浓缩液移入分液漏斗中，以体积比1；1比例加入二氯甲烷进行萃取，分离有机相，并加入少量无水硫酸钠干燥，滤纸过滤，40℃下挥干，得晶体即为咖啡因；
8.用2M盐酸将分液漏斗中水相调pH值为6左右，并加入饱和氯化锌溶液，至沉淀产生完全；
9.1×5000g离心，分离沉淀；
10.将沉淀物用6M盐酸水解，至沉淀完全溶解，再加入等体积乙酸乙酯萃取；
11.分离有机相，在干燥箱中于40℃下进行真空干燥，所得固体即为茶多酚。

六、思考题
1.利用相似相溶的原理，分析不同茶叶产物的性质；
2.观察咖啡厅结晶现象，并试分析影响结晶因素。