一种耐热保护剂、猪瘟耐热保护剂活疫苗及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105535987A(43)申请公布日2016.05.04(21)申请号201511000682.7A61K47/26(2006.01)(2006.01)(22)申请日2015.12.29A61K47/12A61K39/187(2006.01)(71)申请人瑞普（保定）生物药业有限公司地址071000河北省保定市工业园区腾飞路793号(72)发明人何平有邹立宏刘涛柳珊韩佳丽郑朝朝郁宏伟朱秀同梁武杨保收(74)专利代理机构石家庄冀科专利商标事务所有限公司13108代理人马世敏(51)Int.Cl.A61K47/42(2006.01)A61K47/34(2006.01)A61K47/32(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称一种耐热保护剂、猪瘟耐热保护剂活疫苗及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种耐热保护剂、猪瘟耐热保护剂活疫苗及其制备方法，属于生物技术领域。一种耐热保护剂，组方成分包括蔗糖10～15%，聚乙烯吡咯烷酮2～6%，聚赖氨酸2～4%，酶解明胶0.5～3%，柠檬酸钠0.2～1%，硫脲2～10%，牛血清白蛋白2～6%，芦布若尔1～4%，余量为水；将半成品病毒液与耐热保护剂混合，冷冻干燥，制成猪瘟耐热保护剂活疫苗。本发明通过添加耐热保护剂，降低了病毒在冷冻和真空干燥过程中损伤，提高了产品在保存和使用中的稳定性；本发明方法制备的猪瘟耐热保护剂活疫苗，实现了储运过程中冷藏保存，保存期延长到2～8℃保存36个月。CN105535987ACN105535987A权利要求书1/1页1.一种耐热保护剂，其特征在于，是由以质量体积百分含量计的下列组分制成：蔗糖10～15%，聚乙烯吡咯烷酮2～6%，聚赖氨酸2～4%，酶解明胶0.5～3%，柠檬酸钠0.2～1%，硫脲2～10%，牛血清白蛋白2～6%，芦布若尔1～4%，余量为水。2.根据权利要求1所述的耐热保护剂，其特征在于，所述耐热保护剂分为保护剂A和保护剂B，所述保护剂A是将蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮、酶解明胶和芦布若尔溶解于水中，除菌后备用；所述保护剂B是将聚赖氨酸、柠檬酸钠、硫脲、牛血清白蛋白溶解于水中，除菌后备用。3.一种猪瘟耐热保护剂活疫苗的制备方法，其特征在于，使用如权利要求2所述的耐热保护剂，并按以下步骤制备：a.病毒储存液制备：将新鲜的制苗用脾淋组织半成品在2～10℃下捣碎至匀浆，用稀释液稀释匀浆，匀浆与稀释液的质量体积比为1：1，将稀释的匀浆与部分保护剂B按体积比4：1～4：2混合，混合液于2～8℃的条件下放置分层，下层液体为病毒储存液，将病毒储存液分装，置-15℃以下保存；b.疫苗制备：将病毒储存液室温放置，至完全融化，用稀释液将病毒储存液稀释1～4倍，然后按稀释的病毒液与耐热保护剂体积比1：1加入保护剂A和剩余的保护剂B，充分混匀，定量分装，冷冻干燥，制成猪瘟耐热保护剂活疫苗。4.一种猪瘟耐热保护剂活疫苗的制备方法，其特征在于，使用如权利要求2所述的耐热保护剂，并按以下步骤制备：a.病毒储存液制备：将猪瘟细胞毒半成品病毒液与部分保护剂B按体积比4：1～4：2混合，制成病毒储存液，置-15℃以下保存；b.疫苗制备：将病毒储存液室温放置，至完全融化，用稀释液将病毒储存液稀释至10万～100万RID/ml，然后按稀释的病毒液与耐热保护剂体积比1：1加入保护剂A和剩余的保护剂B，充分混匀后，进行定量分装，冷冻干燥，制成猪瘟耐热保护剂活疫苗。5.根据权利要求3或4所述的猪瘟耐热保护剂活疫苗的制备方法，其特征在于，所述稀释液为乳汉液、汉克氏液或PBS液。6.一种猪瘟耐热保护剂活疫苗，其特征在于，它按照权利要求3或4所述的方法生产的猪瘟耐热保护剂活疫苗。2CN105535987A说明书1/5页一种耐热保护剂、猪瘟耐热保护剂活疫苗及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及一种耐热保护剂、猪瘟耐热保护剂活疫苗及其制备方法，属于生物技术领域。背景技术[0002]猪瘟俗称"烂肠瘟"，是一种具有高度传染性的疫病，其特征是急性呈败血性变化，实质器官出血，坏死和梗死；慢性呈纤维素性坏死性肠炎。猪瘟是威胁养猪业的主要传染病之一，一年四季都可发生，常给养猪业造成毁灭性损失，预防猪瘟最有效的方法就是接种猪瘟疫苗。[0003]市场上常用的猪瘟疫苗主要有两种：猪瘟细胞苗和猪瘟脾淋苗。这两种疫苗在储运时均需在-15℃的条件下冷冻保存，在使用的终端很难达到保存条件的要求，疫苗容易失活，造成免疫效果参差不齐，从而引起免疫失败导致疫病爆发。其中猪瘟脾淋苗还存在高温季节生产技术难度大、半成品保存期短（-15℃以下保存仅有15日）和溶解不佳等问题。因此，研发一种半成品保存期长、保护功能强的猪瘟活疫苗耐热冻干保护技术显得尤为重要。