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人α防御素融合表达、纯化及生物活性检测人α防御素融合表达、纯化及生物活性检测(精选7篇),下面是小编为大家整理后的人α防御素融合表达、纯化及生物活性检测,以供大家参考借鉴!篇1:人α防御素融合表达、纯化及生物活性检测人α防御素融合表达、纯化及生物活性检测目的:获得大量重组人α防御素(HDα)并检测其活性,为其深入研究提供必要的材料.方法:体外化学合成得到带有羟氨裂解位点编码序列的HDα基因片段,克隆入pBV220-IL-4表达载体构建重组表达载体pBV220-IL-4-HDα.测序正确后将重组质粒转入大肠杆菌DH5α中进行温度诱导表达.经羟氨裂解去除IL-4后,对所得蛋白进行纯化、复性,以SDS-PAGE和生物学活性检测鉴定其特性.结果:经温度诱导后,融合蛋白主要以包涵体的形式表达,表达产物约占菌体总蛋白的20%;羟氨裂解切除IL-4后,所得目的蛋白的纯度约为99.8%.抑菌活性试验和克隆形成试验显示,所得HDα对细菌生长有明显的`抑制作用.结论:成功地构建了HDα基因的重组表达质粒,获得稳定表达的工程菌,并建立了复性与纯化技术,为进一步对其进行功能研究与应用奠定了基础.作者:傅海燕张剑路凡蒲勤王孝功卢兹凡徐俊卿赵忠良FUHai-yanZHANGJianLUFanPUQinWANGXiao-gongLUZi-fanXUJun-qingZHAOZhong-liang作者单位:傅海燕,张剑,路凡,蒲勤,王孝功,卢兹凡,赵忠良,FUHai-yan,ZHANGJian,LUFan,PUQin,WANGXiao-gong,LUZi-fan,ZHAOZhong-liang(第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710032)徐俊卿,XUJun-qing(第四军医大学西京医院放射科,陕西,西安,710032)刊名:细胞与分子免疫学杂志ISTICPKU英文刊名:CHINESEJOURNALOFCELLULARANDMOLECULARIMMUNOLOGY年,卷(期):22(2)分类号:Q786关键词:人α防御素(HDα)表达纯化生物学活性检测篇2:sTNFRⅡ和VIP融合蛋白的基因克隆表达、纯化及活性检测sTNFRⅡ和VIP融合蛋白的基因克隆表达、纯化及活性检测可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(sTNFRⅡ)和血管活性肠肽(VIP)对类风湿性关节炎(RA)均有治疗作用,但两者的作用机制不同.制备两者融合蛋白,可能具有更好的防治类风湿关节炎的`作用.用含有VIP基因序列的上游引物和sTNFRⅡ的下游引物,用PCR扩增出由连接序列将VIP和sTNFRⅡ基因连接的片段,再亚克隆到原核表达载体pET32a,在大肠杆菌DH5α内诱导表达.表达的产物经离子交换、疏水层析纯化,并用体外中和试验检测其抑制TNF细胞毒及肝细胞膜特异性脂蛋白(Lsp)诱导的细胞毒生物活性.结果显示构建的pET32a-VIP-sTNFRⅡ表达载体在大肠杆菌DH5α内以包涵体形式表达,疏水层析结合离子交换层析纯化后,融合蛋白具有较好的抑制炎症分子诱导的炎症反应生物活性,为将来应用打下基础.作者:王虹曾位森陈金华王珊珊刘丹杨艳妮陈百宏李玲WANGHongZENGWei-senCHENJin-huaWANGShan-shanLIUDanYANGYan-niCHENBai-hongLiLing作者单位:广州蓝星生物科技开发有限公司,广州,510663刊名:中国生物工程杂志ISTICPKU英文刊名:CHINABIOTECHNOLOGY年,卷(期):200626(5)分类号:Q78关键词:sTNFRⅡVIP融合蛋白表达纯化篇3:重组人PD-1IgV融合蛋白的克隆、表达、纯化及生物学活性检测重组人PD-1IgV融合蛋白的克隆、表达、纯化及生物学活性检测目的:获得具有生物学活性的'重组人PD-1IgV(rhPD-1IgV)蛋白.方法:人工合成PD-1IgV基因,并将该基因克隆入原核表达载体pQE-30中.转化宿主细胞大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达重组融合rhPD-1IgV蛋白.对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Westernblot检测分析.结果:rhPD-1IgV的Mr约为15×103,与根据其氨基酸组成计算的理论值一致.成功纯化了rhPD-1IgV蛋白,并对其进行了复性和浓缩,且复性后的蛋白可与其配体B7-H1结合,显示出良好的结合活性.结论:成功地克隆、表达和纯化了rhPD-1IgV蛋白.作者:王伟华张英起颜真WANGWei-HuaZHANGYing-QiYANZhen作者单位:第四军医大学药学系生物技术中心,陕西,西安,710033刊名:第四军医大学学报ISTICPKU英文刊名:JOURNALOFTHEFOURTHMILITARYMEDICALUNIVERSITY年,卷