4型蓝舌病病毒VP2蛋白中和性B细胞抗原表位多肽及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107082802A(43)申请公布日2017.08.22(21)申请号201710116956.1A61K39/15(2006.01)(22)申请日2017.03.01A61P31/14(2006.01)(71)申请人东北农业大学地址150030黑龙江省哈尔滨市香坊区木材街59号(72)发明人唐丽杰李一经徐义刚王丽乔薪瑗姜艳平崔文李佳璇(74)专利代理机构北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司11139代理人孙皓晨马鑫(51)Int.Cl.C07K14/14(2006.01)C12N15/46(2006.01)G01N33/68(2006.01)G01N33/569(2006.01)权利要求书1页说明书4页序列表1页附图2页(54)发明名称4型蓝舌病病毒VP2蛋白中和性B细胞抗原表位多肽及其应用(57)摘要本发明公开了一种4型蓝舌病病毒VP2蛋白中和性B细胞抗原表位多肽及其应用。本发明采用噬菌体展示技术对BTVVP2蛋白抗原表位氨基酸进行筛选。经过3轮淘选后进行测序，测序结果经分析比对后获得共同的短肽序列为160NH161。实验证明，160NH161与4A-1G7上清、腹水均发生特异性反应并且160NH161与1-24型BTV阳性标准血清反应特异性良好。本发明的提出，对于4型BTV的临床诊断提供了新的技术手段，也为后续建立BTV的型特异性鉴别诊断方法以及4型BTV相关表位疫苗的制备奠定了物质基础。CN107082802ACN107082802A权利要求书1/1页1.4型蓝舌病病毒(BluetongueVirus，BTV)VP2蛋白中和性B细胞抗原表位多肽，其特征在于，所述的抗原表位多肽含有SEQIDNO.1所示的氨基酸序列。2.如权利要求1所述的中和性B细胞抗原表位多肽，其特征在于，所述的抗原表位多肽的氨基酸序列如SEQIDNO.1或SEQIDNO.2所示。3.编码权利要求1或2所述的中和性B细胞抗原表位多肽的核苷酸序列。4.一种表达载体，其特征在于含有权利要求3所述的核苷酸序列。5.权利要求1或2所述的中和性B细胞抗原表位多肽在制备检测或诊断蓝舌病病毒感染试剂中的应用。6.如权利要求5所述的应用，其特征在于所述的蓝舌病病毒包括BTV-4、BTV-8、BTV-9、BTV-18、BTV-20以及BTV-9。7.权利要求1或2所述的中和性B细胞抗原表位多肽在制备预防或治疗蓝舌病药物中的用途。8.如权利要求7所述的应用，其特征在于所述的蓝舌病由BTV-4、BTV-8、BTV-9、BTV-18、BTV-20或BTV-9所导致。2CN107082802A说明书1/4页4型蓝舌病病毒VP2蛋白中和性B细胞抗原表位多肽及其应用技术领域[0001]本发明涉及一种抗原表位多肽及其应用，特别涉及4型蓝舌病病毒VP2蛋白的中和性B细胞抗原表位多肽及其在诊断或治疗蓝舌病中的应用，本发明属于医药技术领域。背景技术[0002]蓝舌病(Bluetongue，BT)是一种在热带和亚热带国家常见，感染反刍动物的虫媒病毒性动物传染病。BT是由蓝舌病病毒(BluetongueVirus，BTV)引起的，可感染羊、牛和骆驼等反刍动物的传染病。BTV感染动物，植物，昆虫并且通过诸如蚊子、库蠓、蜱虫等节肢动物传播。BTV属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)十二个属之一的环状病毒属(Orbivirus)。BTV最早发现于1876年，呈世界性分布。目前已从非洲、欧洲、亚洲、北美、南美和大洋洲的多个热带、亚热带和温带地区国家分离到BTV，并且其分布范围不断扩大，危害日趋严重。我国已检测出BTV-1、BTV-2、BTV-3、BTV-4、BTV-5、BTV-7、BTV-12、BTV-15、BTV-16、BTV-24十种血清型，其中BTV-1和BTV-16为我国主要的致病血清型。[0003]VP2蛋白是构成BTV外壳的主要结构蛋白，大多中和表位都存在于VP2蛋白上，故其能够诱导机体产生对BTV的中和反应。VP2蛋白由L2基因编码。有数据表明L2基因在各血清型间差异较大，L2基因的变异与BTV血清型之间有密切联系，证明VP2蛋白为型特异性蛋白，可以用来区别BTV各血清型间的不同，因此VP2蛋白血清型的主要决定因素。[0004]BTV呈现蔓延趋势，近些年不断出现新疫情。BTV具有多型性，并且其不断变异，目前已经分离出27个血清型，不同血清型之间无交叉免疫力。同时，4型BTV能感染绵羊、骆驼等反刍动物，其发病急，死亡率高，对养殖业造成的损害巨大。因此，建立型特异性鉴别诊断方法从而防控BTV尤为重要。发明内容[0005]本发明所要解决的技术问题是提供一种4型蓝舌病病毒VP2蛋白的中和性B细胞抗原表位多肽及其在