一种具有抗菌活性化合物及其纯化制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108191879A(43)申请公布日2018.06.22(21)申请号201810017231.1C12P17/18(2006.01)(22)申请日2018.01.09C12R1/545(2006.01)(71)申请人滨州医学院地址264003山东省烟台市莱山区观海路346号(72)发明人张淑敏谢则平郭琳杨小平杨芹冯玲玲张露(74)专利代理机构沈阳优普达知识产权代理事务所(特殊普通合伙)21234代理人俞鲁江(51)Int.Cl.C07D491/107(2006.01)A61P31/10(2006.01)A01P3/00(2006.01)A01P1/00(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图1页(54)发明名称一种具有抗菌活性化合物及其纯化制备方法和应用(57)摘要本发明提供了一种具有抗菌活性化合物及其纯化制备方法和应用，该化合物是从链霉菌中纯化制备得到，可用于制备抗菌药物及生物农药。研究表明该化合物具有广谱抗菌活性，可明显抑制真菌及细菌的生长，有新型抗菌药物开发的价值。CN108191879ACN108191879A权利要求书1/1页1.一种具有抗菌活性化合物，其特征在于：化合物化学式为C22H15NO5，R构型，结构式如下：2.如权利要求1所述的具有抗菌活性化合物的应用，其特征在于：所述具有抗菌活性化合物可应用于制备抗菌药物及生物农药。3.如权利要求1所述的具有抗菌活性化合物的纯化制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将从海洋样品中分离得到的灰色链霉菌划线接种于固体培养基上，28℃培养3～4日，直至长出白色的孢子，接种到液体培养基，28℃，150～220rpm/min，摇床培养8～12日收获发酵物；(2)过滤发酵物获得发酵液和菌丝体，发酵液经大孔吸附树脂柱提取，菌丝体经丙酮破碎提取，减压浓缩提取物，合并后利用有机溶剂萃取，减压浓缩得总浸膏；(3)总浸膏经硅胶柱层析，通过甲醇/二氯甲烷混合洗脱溶液进行梯度洗脱，收集洗脱组分，将收集的洗脱组分进行ODS反相柱层析，收集80％有机醇洗脱部分，浓缩，进行HPLC高效液相色谱制备得到外消旋体混合物，并进一步通过手性HPLC制备得到抗菌化合物。4.根据权利要求3所述的具有抗菌活性化合物的纯化制备方法，其特征为：步骤(1)所述培养基为半海水ISP2培养基、纯海水ISP2培养基的一种,优选为半海水ISP2培养基。5.根据权利要求3所述的具有抗菌活性化合物的纯化制备方法，其特征为：步骤(2)所述大孔吸附树脂柱，为弱极性或非极性的大孔吸附树脂，优选弱极性。6.根据权利要求3所述的具有抗菌活性化合物的纯化制备方法，其特征为：步骤(2)所述萃取选用的溶剂可以为乙酸乙酯、正丁醇中的一种，优选为乙酸乙酯。7.根据权利要求3所述的具有抗菌活性化合物的纯化制备方法，其特征为：步骤(3)所述甲醇/二氯甲烷混合洗脱溶液甲醇与二氯甲烷的体积比为5:95。8.根据权利要求3所述的具有抗菌活性化合物的纯化制备方法，其特征为：步骤(3)所述的有机醇为甲醇、乙醇中的一种，优选为乙醇。9.根据权利要求3所述的具有抗菌活性化合物的纯化制备方法，其特征为：步骤(3)所述高效液相色谱溶剂，可用甲醇、乙醇、乙腈等溶剂中的一种或几种，优选甲醇，其与水的配比优选55％。2CN108191879A说明书1/4页一种具有抗菌活性化合物及其纯化制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及药物化学领域，具体涉及一种抗菌化合物及其纯化制备方法，以及其在制备抗菌药物及生物农药中的应用。背景技术[0002]由于抗生素的滥用，耐药菌以及由耐药菌，特别是革兰氏阴性耐药菌引起的感染在全世界范围内已经到了前所未有的程度，原有抗生素的治疗效果已经大幅降低，新的疾病不断出现，快速发现高效、优质新抗生素成为全世界的重要课题。抗生素是以放线菌为代表的药用微生物的次级代谢产物，发现包括新物种在内的新药用微生物资源是发现新抗生素的基础之一。经过几十年的深入挖掘，从普通生境中发现新药用微生物菌种和新抗生素的机率均大大降低，而极端环境(如：海洋、荒漠、盐湖、冰川等)中的药用微生物尚未大规模勘探和开发。发明内容[0003]为解决上述技术问题，本发明提供了一种抗菌化合物及其纯化制备方法，该化合物是从一种链霉菌中纯化制备得到，可用于制备抗菌药物及生物农药。研究表明该化合物具有广谱抗菌活性，可明显抑制真菌及细菌的生长，有新型抗菌药物开发的价值。[0004]具体技术方案如下：[0005]一种具有抗菌活性化合物，化合物化学式为C22H15NO5，R构型，结构式如下：[0006][0007]所述具有抗菌活性化合物可应用于制备抗菌药物及生物农药。[0008]具有抗菌活性化合物的纯化制备方法，包括