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第二章核酸结构和功效核酸(nucleicacid)一、核酸发觉和研究工作进展二、核酸分类及分布第一节核酸化学组成及其一级结构TheChemicalComponentandPrimaryStructureofNucleicAcid核酸化学组成嘌呤(purine)戊糖核苷:AR,GR,UR,CR脱氧核苷:dAR,dGR,dTR,dCR核苷酸:AMP,GMP,UMP,CMP脱氧核苷酸:dAMP,dGMP,dTMP,dCMP电脑模型图简化式体内主要游离核苷酸及其衍生物5´端二、核酸一级结构A第二节DNA空间结构与功效DimensionalStructureandFunctionofDNADNA二级结构-双螺旋结构DNA双螺旋结构研究背景和历史意义DNA双螺旋结构模型关键点DNA超螺旋结构及其在染色质中组装DNA超螺旋结构原核生物DNA高级结构DNA在真核生物细胞核内组装DNA功效一、DNA二级结构——双螺旋结构(一)DNA双螺旋结构研究背景和历史意义Chargaff规则任何一个生物中各碱基相对百分比相同即:A=T,G=C;不一样生物DNA,其碱基组成不一样;同一个体不一样器官、组织DNA,其碱基组成相同。DNA双螺旋结构发觉历史意义:揭示了生物体遗传信息储存及表示分子机制开创了当代分子生物学是生物学发展史上里程碑(二)DNA双螺旋结构模型关键点(Watson,Crick,1953)(二)DNA双螺旋结构模型关键点(Watson,Crick,1953)碱基互补配对核酸结构与功能专家讲座核酸结构与功能专家讲座(二)DNA双螺旋结构模型关键点(Watson,Crick,1953)(三)DNA双螺旋结构多样性二、DNA超螺旋结构及其在染色质中组装意义DNA超螺旋结构整体或局部拓扑学改变及其调控对于DNA复制和RNA转录过程具相关键作用。(二)原核生物DNA高级结构(三)DNA在真核生物细胞核内组装核酸结构与功能专家讲座核酸结构与功能专家讲座三、DNA功效第三节RNA结构与功效RNA种类、分布、功效一、信使RNA结构与功效*mRNA结构特点帽子结构mRNA核内向胞质转位mRNA稳定性维系翻译起始调控*mRNA功效把DNA所携带遗传信息,按碱基互补配对标准,抄录并传送至核糖体,用以决定其合成蛋白质氨基酸排列次序。*tRNA一级结构特点含10~20%稀有碱基,如DHU3´末端为—CCA-OH5´末端大多数为G含有TCN,N二甲基鸟嘌呤*tRNA二级结构——三叶草形氨基酸臂DHU环反密码环额外环TΨC环*rRNA结构*rRNA种类(依据沉降系数)核蛋白体组成四、其它小分子RNA及RNA组学snmRNAs种类核内小RNA核仁小RNA胞质小RNA催化性小RNA小片段干涉RNARNA组学研究细胞中snmRNAs种类、结构和功效。同一生物体内不一样种类细胞、同一细胞在不一样时间、不一样状态下snmRNAs表示含有时间和空间特异性。核酸和蛋白质比较核酸理化性质ThePhysicalandChemicalCharactersofNucleicAcid核酸结构与功能专家讲座1.DNA或RNA定量OD260=1.0相当于50μg/ml双链DNA40μg/ml单链DNA(或RNA)20μg/ml寡核苷酸2.判断核酸样品纯度DNA纯品:OD260/OD280=1.8RNA纯品:OD260/OD280=2.0二、DNA变性(denaturation)例:变性引发紫外吸收值改变热变性Tm:变性是在一个相当窄温度范围内完成,在这一范围内,紫外光吸收值到达最大值50%时温度称为DNA解链温度,又称融解温度(meltingtemperature,Tm)。其大小与G+C含量成正比。三、DNA复性与分子杂交在DNA变性后复性过程中,假如将不一样种类DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中,只要两种单链分子之间存在着一定程度碱基配对关系,在适宜条件(温度及离子强度)下,就能够在不一样分子间形成杂化双链(heteroduplex)。这种杂化双链能够在不一样DNA与DNA之间形成,也能够在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。核酸结构与功能专家讲座DNA-DNA杂交双链分子核酸结构与功能专家讲座探针第五节核酸酶Nuclease核酸酶是指全部能够水解核酸酶依据底物不一样分类DNA酶(deoxyribonuclease,DNase):专一降解DNA。RNA酶(ribonuclease,RNase):专一降解RNA。依据切割部位不一样核酸内切酶:分为限制性核酸内切酶和非特异性限制性核酸内切酶。核酸外切酶:5´→3´或3´→5´核酸外切酶。参加DNA合成与修复及RNA合成后剪接等主要基因复制和基因表示过程负责去除多出、结构和功效异常核酸,同时也能够去除侵入细