DNA的粗提取与鉴定.ppt

DNA的粗提取与鉴定一、课题重点与难点问题思考与讨论：当氯化钠的物质的量浓度为2mol／L时，DNA的溶解度最大，浓度为0．14mol／L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使DNA在盐溶液中溶解或析出DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则可以溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步分离（二）、DNA的鉴定原理三、DNA的粗提取与鉴定的实验设计动物细胞的破碎较易，例如，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。①植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜.答：研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量变少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等.讨论：为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？（四）DNA的析出与鉴定2、DNA的鉴定案例：以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取1、准备鸡血细胞液2、方法步骤2、方法步骤讨论：②溶解细胞核内的DNA讨论：加入蒸馏水的目的？⑤将DNA的粘稠物再溶解⑦提取含杂质较少的DNA答：因为DNA不溶于冷酒精，而其他物质可以溶解在酒精中，使含杂质较少的DNA丝状物可以析出,悬浮于溶液中取两支20mL的试管，各加入氯化钠的物质的量浓度为2mol／L的溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化讨论：答：整个实验共“两次蒸馏水，四次过滤，两次析出”②四次过滤③两次析出