花色苷合成相关蛋白IbMYB113及其编码基因与应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113621039A(43)申请公布日2021.11.09(21)申请号202110955183.2A01H5/02(2018.01)(22)申请日2021.08.19A01H6/82(2018.01)C12R1/01(2006.01)(71)申请人云南农业大学C12R1/19(2006.01)地址650201云南省昆明市盘龙区沣源路452号云南农业大学(72)发明人郭华春李茂兴李有涵王琼(74)专利代理机构北京隆达恒晟知识产权代理有限公司11899代理人李中强(51)Int.Cl.C07K14/415(2006.01)C12N15/29(2006.01)C12N15/84(2006.01)C12N1/21(2006.01)C12N5/10(2006.01)权利要求书1页说明书6页序列表2页附图2页(54)发明名称花色苷合成相关蛋白IbMYB113及其编码基因与应用(57)摘要本发明涉及花色苷合成相关蛋白IbMYB113及其编码基因与应用。该IbMYB113蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO:2所示；其编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。本发明从甘薯红色薯皮中克隆了IbMYB113蛋白及其编码基因，将IbMYB113基因连接到植物表达载体，通过农杆菌介导的遗传转化获得过表达IbMYB113的转基因烟草植株，表现为全株色素积累，高效液相色谱法检测飞燕草色素和矢车菊色素含量显著增加。本发明提供的IbMYB113蛋白及其编码基因对于促进植物花色苷的合成与积累具有重要的理论意义和应用价值。CN113621039ACN113621039A权利要求书1/1页1.花色苷合成相关蛋白IbMYB113蛋白，其特征在于：其氨基酸序列如SEQIDNO:2所示。2.权利要求1所述的花色苷合成相关蛋白IbMYB113蛋白的编码基因，其特征在于：为编码如SEQIDNO:2所示的氨基酸序列的核酸分子。3.如权利要求2所述的编码基因，其特征在于：其核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。4.含有权利要求2或3所述的IbMYB113蛋白的编码基因的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因植物细胞系。5.如权利要求4所述的重组载体，其特征在于：该重组载体为将质粒pHELLSGATE12的XhoI和XbaI两个限制性酶切位点之间的小片段替换为IbMYB113蛋白的编码基因得到的重组载体pHELLSGATE12‑IbMYB113。6.权利要求1所述蛋白质IbMYB113，或，权利要求2或3所述IbMYB113蛋白的编码基因，或，权利要求4所述含有权利要求2或3所述的IbMYB113蛋白的编码基因的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因植物细胞系，在调控植物花青素合成及种类和含量中的应用。7.权利要求1所述蛋白质IbMYB113，或，权利要求2或3所述IbMYB113蛋白的编码基因，或，权利要求4所述含有权利要求2或3所述的IbMYB113蛋白的编码基因的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因植物细胞系，在促进植物飞燕草色素和矢车菊色素合成与积累中的应用。8.一种培育转基因植物的方法，其特征在于：包括如下步骤：将IbMYB113蛋白的编码基因或核酸分子导入受体植物，获得转基因植物；所述IbMYB113蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO:2所示；与受体植物相比，转基因植物花色苷含量提高。9.如权利要求6或7所述的应用，或，权利要求8所述的方法，其特征在于：所述植物为烟草。10.一种培育转基因烟草的方法，其特征在于：将pHELLSGATE12质粒中XhoI和XbaI两个限制性酶切位点之间的小片段替换为IbMYB113蛋白的编码基因或核酸分子，得到的重组载体pHELLSGATE12‑IbMYB113，将该重组载体导入烟草中，获得IbMYB113过表达的转基因烟草；与常规烟草相比，转基因烟草花色苷含量提高，特别是飞燕草色素和矢车菊色素的合成与积累明显增强。2CN113621039A说明书1/6页花色苷合成相关蛋白IbMYB113及其编码基因与应用技术领域[0001]本发明属于植物生物技术领域，具体涉及花色苷合成相关蛋白IbMYB113及其编码基因克隆与应用。背景技术[0002]甘薯是世界上重要的粮食作物、经济作物和能源作物之一，薯皮色主要有白色、浅黄、黄色、浅红色、红色、紫色、深紫色等；薯肉色主要有白色、黄色、橙色、红色、紫色、深紫色、混合色等。红色和紫色甘薯品种主要是含有花色苷，因具有漂亮的薯块外观和优秀的保健功能非常受消费者青睐。[0003]花色苷是一种水溶性天然色素，广泛存在于高等植物中，是类黄酮代谢途径中最主要的代谢产物。目前自然界已经发现超过635种花色苷，植物中常见的主要有6种，分别是天竺葵色