植物地上部组织特异性表达的启动子及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113913430A(43)申请公布日2022.01.11(21)申请号202111332408.5A01H5/00(2018.01)(22)申请日2021.11.11A01H6/20(2018.01)(71)申请人中国热带农业科学院橡胶研究所地址570100海南省海口市龙华区城西学院路4号(72)发明人仇键范睿深魏芳杨文凤高宏华吴明(74)专利代理机构北京汉智嘉成知识产权代理有限公司11682代理人高芬芳金洁(51)Int.Cl.C12N15/113(2010.01)C12N15/11(2006.01)C12N15/29(2006.01)C12N15/82(2006.01)权利要求书1页说明书4页序列表2页附图1页(54)发明名称植物地上部组织特异性表达的启动子及其应用(57)摘要本发明公开了植物地上部组织特异性表达的启动子及其应用。本发明所提供的启动子，为如下1)或2)或3)所示：1)其核苷酸序列是序列表中序列1所示DNA分子；2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且具有启动子功能的DNA分子；3)与1)限定的DNA分子具有90％以上的同源性且具有启动子功能的DNA分子。本发明所提供的启动子可通过基因工程，在不影响根、种子中基因表达的情况下，特异改善茎、叶等地上组织的光合作用、病虫害抗性等特性，以提高转基因作物的生物安全性，在植物基因工程研究中具有广泛的应用前景。CN113913430ACN113913430A权利要求书1/1页1.一种DNA分子，为如下1)或2)或3)所示∶1)其核苷酸序列是序列表中序列1所示DNA分子；2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且具有启动子功能的DNA分子；3)与1)限定的DNA分子具有90％以上的同源性且具有启动子功能的DNA分子。2.含有权利要求1所述DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于：所述重组载体为在植物表达载体的多克隆位点或重组位点插入权利要求1所述DNA分子得到的重组载体。4.扩增权利要求1所述DNA分子的全长的引物对。5.权利要求1所述DNA分子在启动目的基因表达中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述启动目的基因表达为启动目的基因特异性表达。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所诉特异性表达为植物地上部组织特异性表达。8.一种培育转基因植物的方法，是在出发植物中用权利要求1所述的DNA分子启动目的基因的表达，得到表达所述目的基因的转基因植物。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述表达所述目的基因，是在植物地上部组织特异性表达所述目的基因。10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于：所述植物为拟南芥。2CN113913430A说明书1/4页植物地上部组织特异性表达的启动子及其应用技术领域[0001]本发明涉及生物技术领域，特别地涉及植物地上部组织特异性表达的启动子及其应用。背景技术[0002]启动子(promoter)作为DNA序列上重要的调控元件，包含着基因表达的核心调控信息，是表达载体的重要组成部分。开发和利用高效、特异的启动子对于植物基因工程育种具有重要的研究意义和应用价值。常用的启动子可分为3类：组成型、组织特异性和诱导型启动子。组成型启动子驱动基因在所有组织部位和全部发育阶段持续表达，不受时空限制和诱导因素的诱导，易诱导基因表达量太高而对植物的生长发育造成影响，是目前利用组成型强启动子结合功能基因来改良作物品质时遇到的障碍。组织特异性启动子按照植物组织器官可以分为营养器官表达和生殖器官表达的特异性启动子。不仅能使目的基因的表达产物在一定器官或组织部位累积，增加区域表达量，还可以避免植物营养的不必要浪费，作为植物工程中最富有前景的调控元件，组织特异性启动子一直是生物学领域内的研究热点，并且已经在发育生物学研究、以及植物基因工程方面得到了应用。[0003]目前，广泛应用的组织特异性启动子包括叶片、根、韧皮部、维管束、花器官、果实、种子等组织特异表达启动子，地上组织特异性启动子鲜有报道。周君莉等曾公开一种能在植物地上组织特异表达的启动子(CN102876710A)。该启动子主要在单子叶植物水稻的地上组织特异中表达。发明内容[0004]有鉴于此，本发明的主要目的是提供一种植物地上部组织特异性表达的启动子及其应用。[0005]本发明所提供的启动子，获自橡胶树，为如下1)或2)或3)所示∶[0006]1)其核苷酸序列是序列表中序列1所示DNA分子；[0007]2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且具有启动子功能的DNA分子；[0008]3)与1)限定的DNA分子具有90％以上的同源性且具有启动子功