一种在植物花药发育后期特异性表达的强启动子CP05及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115927323A(43)申请公布日2023.04.07(21)申请号202211073308.XC12N15/11(2006.01)(22)申请日2022.09.02C12N15/10(2006.01)C12Q1/6895(2018.01)(71)申请人西南大学C12R1/01(2006.01)地址400715重庆市北碚区天生路2号(72)发明人陈新龙何光华陈梅张梓睿王孟轩徐海玲(74)专利代理机构重庆信航知识产权代理有限公司50218专利代理师穆祥维(51)Int.Cl.C12N15/113(2010.01)C12N15/84(2006.01)C12N1/21(2006.01)A01H5/02(2018.01)A01H6/20(2018.01)权利要求书1页说明书5页序列表（电子公布）附图1页(54)发明名称一种在植物花药发育后期特异性表达的强启动子CP05及其应用(57)摘要本发明公开了一种在植物花药发育后期特异性表达的强启动子CP05、含有CP05的基因表达盒、重组表达载体、重组菌和转基因植物细胞系，在植物花药发育后期特异性表达的强启动子CP05、基因表达盒、重组表达载体、重组菌和转基因植物细胞系可高效驱动外源基因在植物花药发育后期特异性表达，表达水平精确，可避免目的基因在植物其他组织持续表达带来的不利影响，可用于创制植物雄性不育系，在植物基因工程和杂种优势的利用中具有很好的应用前景。并且，本发明公开的在植物花药发育后期特异性表达的强启动子CP05的核苷酸序列较短，全长仅999bp，易于克隆，可有效降低启动子的克隆难度和成本，有助于提高重组表达载体的构建和转化效率，有助于快速获得转基因植物。CN115927323ACN115927323A权利要求书1/1页1.一种在植物花药发育后期特异性表达的强启动子CP05，其具有如SEQIDNo.1所示的核苷酸序列。2.含有权利要求1所述的在植物花药发育后期特异性表达的强启动子CP05的基因表达盒。3.含有权利要求2所述基因表达盒的重组表达载体。4.含有权利要求2所述基因表达盒的重组菌。5.含有权利要求2所述基因表达盒的转基因植物细胞系。6.权利要求1所述的在植物花药发育后期特异性表达的强启动子CP05、或权利要求2所述的基因表达盒、或权利要求3所述的重组表达载体、或权利要求4所述的重组菌、或权利要求5所述的转基因植物细胞系在驱动外源目的基因在植物花药发育后期特异性表达的应用。7.权利要求1所述的在植物花药发育后期特异性表达的强启动子CP05、或权利要求2所述的基因表达盒、或权利要求3所述的重组表达载体、或权利要求4所述的重组菌、或权利要求5所述的转基因植物细胞系在制备转基因植物中的应用。8.PCR扩增权利要求1所述的在植物花药发育后期特异性表达的强启动子CP05的引物对，所述引物对的核苷酸序列如SEQIDNo.2和SEQIDNo.3所示。9.一种分离或鉴定权利要求1所述的在植物花药发育后期特异性表达的强启动子CP05的方法，其特征在于，所述方法包括使用SEQIDNo.2和SEQIDNo.3引物对从哥伦比亚型拟南芥基因组DNA中经PCR扩增得到权利要求1所述的在植物花药发育后期特异性表达的强启动子CP05的核苷酸序列。10.与权利要求1所述的在植物花药发育后期特异性表达的强启动子CP05互补的DNA分子。2CN115927323A说明书1/5页一种在植物花药发育后期特异性表达的强启动子CP05及其应用技术领域[0001]本发明涉及植物基因工程与分子生物学领域，具体涉及一种在植物花药发育后期特异性表达的强启动子CP05及其应用。背景技术[0002]植物基因表达调控主要是转录水平的调控，由多种顺式作用元件和反式作用因子协调控制。启动子是重要的顺式作用元件，在转录调控中起关键作用。组织特异性启动子只在某些特定组织或器官中驱动基因表达，能在植物体内对外源基因表达进行定时定量的精确调控，可有效降低组成型启动子在不同部位持续表达造成的能量损失或外源蛋白过量积累对植物生长发育的不利影响，在植物基因工程领域具有广泛的应用价值。尽管目前已公开了多种植物启动子，但对于组织特异性启动子的开发仍相对缓慢，还不能满足转基因产业化不断扩大的需求。[0003]花药是植物有性繁殖阶段的重要器官，通常将花药特异性启动子用于雄性不育系种质资源创制、雄性育性恢复和研究花药发育过程中的某些代谢过程或基因调控途径等。一方面，可将植物花药特异性启动子与细胞毒素基因嵌合构建表达载体，通过转化植株来阻断花粉发育，创造雄性不育植株；也可通过驱动外源基因在花药中特异性表达来恢复育性。另一方面，在研究花药中某些代谢过程或基因调控途径时，可通过某个花药特异性启动子驱动基因