一种盐酸特拉唑嗪半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法与应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114409604A(43)申请公布日2022.04.29(21)申请号202111536235.9C07K14/79(2006.01)(22)申请日2021.12.15C07K16/44(2006.01)G01N33/577(2006.01)(71)申请人华南农业大学G01N33/543(2006.01)地址510642广东省广州市天河区五山路G01N33/53(2006.01)483号(72)发明人雷红涛潘康亮关甜王锦李向梅沈兴徐振林沈玉栋(74)专利代理机构广州粤高专利商标代理有限公司44102代理人段卉(51)Int.Cl.C07D239/94(2006.01)C07K14/765(2006.01)C07K14/77(2006.01)C07K14/795(2006.01)权利要求书2页说明书12页附图3页(54)发明名称一种盐酸特拉唑嗪半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法与应用(57)摘要本发明提供了一种盐酸特拉唑嗪半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法与应用，本发明制备得到了两种半抗原，半抗原T‑2C和半抗原T‑SG，应用半抗原T‑2C得到人工抗原T‑2C，并进一步制备得到用于检测盐酸特拉唑嗪的特异性抗体，应用人工抗原T‑SG‑OVA作为包被原，该抗体对盐酸特拉唑嗪具有良好的灵敏度和特异性，最低检测限为0.38ng/mL，半抑制浓度为5.72ng/mL，利用该抗体建立了盐酸特拉唑嗪的免疫分析方法，实现了盐酸特拉唑嗪快速、准确的检测。CN114409604ACN114409604A权利要求书1/2页1.一种盐酸特拉唑嗪半抗原，其特征在于，所述半抗原的结构式如式(I)所示，2.一种盐酸特拉唑嗪半抗原，其特征在于，所述半抗原的结构式如式(II)所示，3.权利要求1所述盐酸特拉唑嗪半抗原的制备方法，其特征在于，将盐酸特拉唑嗪、溴乙酸乙酯、碳酸铯和碘化钠与溶剂N,N‑二甲基甲酰胺充分反应；分离纯化，并将分离纯化的反应物溶解于甲醇，然后充分水解，调节pH为6～7，即得。4.权利要求2所述盐酸特拉唑嗪半抗原的制备方法，其特征在于，将盐酸特拉唑嗪、丁二酸酐、三乙胺、4‑二甲氨基吡啶与溶剂N,N‑二甲基甲酰胺充分反应，分离纯化即得。5.权利要求1或2所述盐酸特拉唑嗪半抗原在制备盐酸特拉唑嗪人工抗原中的应用。6.一种盐酸特拉唑嗪人工抗原，其特征在于，由权利要求1或2所述盐酸特拉唑嗪半抗原偶联载体蛋白得到。7.一种盐酸特拉唑嗪人工抗原组合，其特征在于，包括免疫原和包被原，所述免疫原由权利要求1所述半抗原偶联载体蛋白得到的；所述包被原为权利要求6所述盐酸特拉唑嗪人工抗原。8.一种盐酸特拉唑嗪抗体，其特征在于，利用权利要求1所述盐酸特拉唑嗪半抗原偶联载体蛋白得到的人工抗原免疫动物制备得到。9.一种检测盐酸特拉唑嗪的免疫分析方法，其特征在于，以权利要求6所述盐酸特拉唑2CN114409604A权利要求书2/2页嗪人工抗原为抗原，以权利要求8所述盐酸特拉唑嗪抗体为检测抗体进行检测。10.一种检测盐酸特拉唑嗪的试剂盒，其特征在于，包含权利要求6所述盐酸特拉唑嗪人工抗原和权利要求8所述盐酸特拉唑嗪抗体。3CN114409604A说明书1/12页一种盐酸特拉唑嗪半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法与应用技术领域[0001]本发明涉及食品检测领域，更具体地，涉及一种盐酸特拉唑嗪半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法与应用。背景技术[0002]盐酸特拉挫嗪(terazosinhydrochloride)，化学名称是1‑(4‑氨基‑6,7‑二甲氧基‑2‑喹唑啉基)‑4‑[(四氢呋喃‑2‑甲酰基)哌嗪盐酸盐，是哌唑嗪的同类物，由美国Abbot公司研制，于1985年开始用于临床，是一个突触后α1—肾上腺素能受体阻滞剂。它能使血管扩张，降低血管外周阻力，从而达到降低血压的效果，并且能够松弛膀胱颈和前列腺囊，对前列腺肥大症状有明显缓解作用。由于其良好的临床表现，在1987年经美国FDA批准用于高血压的治疗，后经美国泌尿学会的推荐，1992年临床医生把它作为良性前列腺肥大治疗的首选药物。盐酸特拉唑嗪在我国上市以来，一直用于轻、中度高血压和良性前列腺肥大的治疗，特点是不受食物的影响，口服吸收好，在人体内生物利用度高，药效持续时间较长，半衰期是哌唑嗪的2～3倍，取得了良好的临床疗效。[0003]盐酸特拉唑嗪作为降压类西药起效迅速，疗效确切，市场应用广泛，但服用不当易产生毒副作用，需在临床医生指导下服用。[0004]针对盐酸特拉唑嗪的检测，已报道的方法有薄层色谱法(thinlayerchromatography，TLC)、紫外分光光度法、荧光法、毛细管电泳法、高效液相色谱法(highperformanceli