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牙鲆碱性磷酸酶基因5调控区的克隆及其功能检测牙鲆碱性磷酸酶基因5调控区的克隆及其功能检测(整理6篇),下面是小编整理过的牙鲆碱性磷酸酶基因5调控区的克隆及其功能检测,欢迎大家阅读分享借鉴,希望对大家有所帮助。篇1:牙鲆碱性磷酸酶基因5调控区的克隆及其功能检测牙鲆碱性磷酸酶基因5调控区的克隆及其功能检测通过基因组步移的方法扩增出一段924bp的牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区序列,在线软件分析表明5'调控区内可能含有GKLF、Oct、CREB、E2F、CEBP、GATA-1、Pitx-1、Pit-、RARE/TRE、AP4等转录因子结合位点.采用DNA重组的方法,将克隆得到的5'调控区片段插入启动子缺失的增强型绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-1中,构建重组表达载体pEGFP-JFALP.重组载体瞬时转染COS-7细胞,在倒置荧光显微镜下可以检测到绿色荧光信号,且荧光信号随着时间的`延长而增强.结果表明本实验克隆的牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区具有一定的启动子活性,为今后进一步研究碱性磷酸酶基因表达调控的分子机制奠定基础.作者:施志仪顾一峰陈晓武胡燕林ShiZhiyiGuYifengChenXiaowuHuYanlin作者单位:上海水产大学生物技术研究中心,上海,90刊名:生物技术通报PKU英文刊名:BIOTECHNOLOGYBULLETIN年,卷(期):“”(2)分类号:Q95关键词:碱性磷酸酶基因5'调控区克隆功能篇2:人FXR基因5调控区功能分析人FXR基因5调控区功能分析为研究人法尼酯衍生物X受体(FXR)基因5'调控区的功能,在对人FXR基因进行生物信息学分析的`基础上,用5'RACE法确定该基因的转录起始位点碱基是A.采用PCR技术,扩增人基因组DNA中FXR基因5'上游序列,构建了5种含不同长度启动子序列的荧光素酶报告基因表达体系.将它们瞬时转染HepG2细胞,检测其荧光素酶活性.结果表明,-1651~+200、-1496~+200区域的启动子活性无明显区别,-847~+200区域的启动子活性最高,-544~+200区域启动子活性较前显著降低.研究提示,FXR基因转录所必需的基因启动子序列在-847~-544范围内.作者:娄桂予陈敏李渝萍李强陈彬陈健廖荣霞周度金LOUGui-YuCHENMinLIYu-PingLIQiangCHENBinCHENJianLiaoRong-XiaZHOUDu-Jin作者单位:第三军医大学生物化学与分子生物学教研室,重庆,400038刊名:中国生物化学与分子生物学报ISTICPKU英文刊名:CHINESEJOURNALOFBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGY年,卷(期):22(4)分类号:Q78关键词:法尼酯衍生物X受体启动子转录调控篇3:奶山羊β-乳球蛋白基因5、3调控区的克隆和序列分析奶山羊β-乳球蛋白基因5、3调控区的克隆和序列分析目的:克隆奶山羊β-乳球蛋白(BLG)基因5'、3'调控区,并对其进行序列分析.方法:从徐淮奶山羊组织中提取基因组DNA,采用高保真长模板PCR法克隆得到奶山羊BLG基因4.2kb的5'调控区和1.8kb的3'调控区;将纯化后的PCR产物克隆到pGEM-TEasy载体中,经酶切鉴定和序列测定验证克隆的正确性.结果:部分序列分析表明,奶山羊BLG基因5'区与GenBank中登录的山羊和绵羊BLG基因5'区的同源性分别为100%和95%,3'区的同源性分别为99%和93%;克隆得到的.奶山羊BLG基因调控区与山羊BLG伪基因显著不同,二者5'区和3'区的同源性分别为83%和88%.结论:克隆得到的奶山羊BLG基因调控区可用于构建乳腺特异性表达载体,用于外源基因在转基因动物乳腺中的高效表达.作者:周咏松成勇殷烈徐冬兰柏亚军郭磊袁玉国ZHOUYong-SongCHENGYongYINLieXUDong-LanBAIYa-JunGUOLeiYUANYu-Guo作者单位:扬州大学,兽医学院,江苏省转基因动物制药工程研究中心,江苏,扬州,225009刊名:生物技术通讯ISTIC英文刊名:LETTERSINBIOTECHNOLOGY年,卷(期):19(4)分类号:Q78关键词:奶山羊β-乳球蛋白基因克隆DNA序列分析篇4:鹅IGF-Ⅰ基因5调控区单核苷酸多态性分析鹅IGF-Ⅰ基因5调控区单核苷酸多态性分析以皖西白鹅和朗德鹅为素材,设计引物对鹅的`IGF-Ⅰ基因5'端非编码区序列克隆测序,运用PCR-SSCP方法检测IGF-Ⅰ基因5'调控区的单核苷酸多态性.检测发现该区域存在4个SNP位点,分别是:A-26T、A-215G、A-314G、A-325T.作者:杜晓东张绍胜姜润深夏生林耿照玉袁绍友作者单位:杜晓东,张绍胜,姜润深,耿照玉(安徽农业大学动物科