一种白肉灵芝菌株L4495及其栽培方法与应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114766285A(43)申请公布日2022.07.22(21)申请号202210455471.6A01G18/20(2018.01)(22)申请日2022.04.24A01G18/50(2018.01)(83)生物保藏信息GDMCCNo：621042021.12.27(71)申请人云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所地址650205云南省昆明市盘龙区北京路2238号#省农科院生物所(72)发明人何俊李树红李娥贤叶洋罗红梅方晓军(74)专利代理机构昆明正原专利商标代理有限公司53100专利代理师于洪金耀生(51)Int.Cl.权利要求书1页说明书11页A01G18/40(2018.01)序列表4页附图7页(54)发明名称一种白肉灵芝菌株L4495及其栽培方法与应用(57)摘要本发明涉及一种白肉灵芝菌株L4495及栽培方法与应用，属于微生物技术领域。该菌株已于2021年12月27日保藏于中国广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号GDMCCNo：62104。本发明通过液体发酵培养的方法制作菌种，将获得的液体菌种接种于栽培袋中，发菌完成后种植于经济林下，发现经济林下种植相较设施栽培投入少、管理简单、品质高、效益好，栽培白肉灵芝L4495多糖含量在1.58%，三萜含量在3.26%。本发明驯化得到了适宜林下栽培的白肉灵芝野生菌株资源，开展液体深层发酵培养，为灵芝属的种质资源异地保护和进一步开发利用奠定基础。另外，白肉灵芝菌株L4495的子实体或者发酵液可用于制备抗肿瘤的药物。CN114766285ACN114766285A权利要求书1/1页1.一种白肉灵芝菌株L4495，其特征在于，已于2021年12月27日保藏于中国广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号GDMCCNo：62104。2.权利要求1所述的白肉灵芝属菌株L4495的栽培方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤（1），无菌条件下通过取白肉灵芝菌株L4495组织，接种到PDA培养基的上，密封放置于24℃的培养箱恒温培养9‑11d；步骤（2），将步骤（1）培养好的菌种接种于液体培养基中，置于摇床中26‑28℃、140‑160r/min培养11‑13天；其中，液体培养基为：可溶性淀粉5.9‑6.1g，黄豆粉0.48‑0.51g，磷酸二氢钾0.29‑0.31g，MgSO4·7H2O0.48‑0.52g，VB20.09‑0.11g，水200mL；pH=6.9‑7.1；步骤（3），将步骤（2）培养好的液体菌种接种至栽培袋中，置于23‑25℃培养室中暗培养至菌丝长满栽培袋；栽培袋中栽培基质包括按照质量分数计的如下组分：阔叶树木屑66‑68份、麸皮19‑21份、甘蔗渣10‑12份、石膏0.98‑1.02份、石灰1.98‑2.02份；含水量60‑65%步骤（4），将步骤（3）培养好的栽培袋运至经济林下覆土栽培，待子实体长至成熟，菌盖边缘仅有1‑2mm淡黄边时采收子实体。3.根据权利要求2所述的白肉灵芝属菌株L4495的栽培方法，其特征在于，步骤（1）中，取1‑1.5cm白肉灵芝菌株L4495组织接种到PDA培养基中。4.根据权利要求2所述的白肉灵芝属菌株L4495的栽培方法，其特征在于，步骤（2）中，取蚕豆粒大小的1至2块接种于液体培养基中；液体培养基为：可溶性淀粉6.03g，黄豆粉0.49g，磷酸二氢钾0.3g，MgSO4·7H2O0.5g，VB20.1g，水200mL；pH=6.93。5.根据权利要求2所述的白肉灵芝属菌株L4495的栽培方法，其特征在于，步骤（2）中，摇床培养温度为27℃，摇床培养转速为150r/min。6.根据权利要求2所述的白肉灵芝属菌株L4495的栽培方法，其特征在于，步骤（3）中，将步骤（2）培养好的液体菌种以每袋20ml的量接种至栽培袋中，置于23‑25℃培养室中暗培养25‑35天至菌丝长满栽培袋。7.根据权利要求2所述的白肉灵芝属菌株L4495的栽培方法，其特征在于，步骤（4）中，在经济林下覆土栽培的具体方法为：选取背阴保水、林木茂盛的经济林地块，地上挖出29‑31cm深，95‑105cm宽的沟槽，林木稀疏且不能挖沟的地方挖出29‑31cm深、39‑41cm长、14‑16cm宽的畦，将步骤（3）培养好的栽培袋上表面开3‑4cm小孔竖立放到沟槽或畦中，覆土3‑5cm栽培。8.根据权利要求2所述的白肉灵芝属菌株L4495的栽培方法，其特征在于，步骤（4）中，栽培后120至150天，子实体长至成熟。9.权利要求1所述灵芝属菌株L4495的菌丝体或者发酵液在制备抗肿瘤的药物中的应用。2CN114766285A说明书1/11页一种白肉灵芝菌株L4495及其栽培方法与应用技术领域[0001]本发明属于微生物技术领域