一种亮盖灵芝菌株L5478及其人工栽培方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115975817A(43)申请公布日2023.04.18(21)申请号202211278283.7(51)Int.Cl.(22)申请日2022.10.19C12N1/14(2006.01)A01G18/00(2018.01)(66)本国优先权数据A01G18/20(2018.01)202210429598.02022.04.22CNA01G18/40(2018.01)(83)生物保藏信息C12R1/645(2006.01)GDMCCNo：621072021.12.27(71)申请人云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所地址650205云南省昆明市盘龙区北京路2238号云南省农科院生物所(72)发明人李树红李娥贤何俊罗红梅雷涌涛苏开美叶洋(74)专利代理机构昆明正原专利商标代理有限公司53100权利要求书1页说明书13页专利代理师于洪金耀生序列表（电子公布）附图3页(54)发明名称一种亮盖灵芝菌株L5478及其人工栽培方法(57)摘要本发明涉及一种亮盖灵芝菌株L5478及其人工栽培方法，属于微生物技术领域。所述的亮盖灵芝新菌株L5478，已于2021年12月27日保藏于中国广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号GDMCCNo：62107。本发明运用形态学和多基因联合分析，鉴定菌株L5478为亮盖灵芝，明确ITS、nrLSU、tef1‑α和rpb2基因序列作为识别该菌株的分子标记。本发明亮盖灵芝L5478菌株可在云南亚热带至温带区域正常出菇，分子标记可以准确的识别该菌株，为特色种质资源的保护和合理开发利用提供了可靠的数据支持和品种资源，且易于推广应用。CN115975817ACN115975817A权利要求书1/1页1.一种亮盖灵芝菌株L5478，其特征在于，已于2021年12月27日保藏于中国广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号GDMCCNo：62107。2.权利要求1所述的亮盖灵芝菌株L5478的人工栽培方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤（1），菌种制作：取野生灵芝组织分离获得的母种采用母种培养基复壮后接种于原种培养瓶中扩大培养，待菌丝体长满培养瓶后，将原种续转接于栽培种容器中培养，菌丝体长满栽培种容器后，最后将栽培种转接入栽培料袋中，培养至菌丝体长满料袋；步骤（2），栽培管理：将步骤（1）获得的栽培袋搬运至栽培地，进行小孔开袋覆土栽培；步骤（3），子实体采收：待子实体长至成熟期，菌盖不再增大，菌盖的颜色从红棕色转为红褐色，且菌盖仅有1‑2mm淡黄色边缘时采收；所述的母种培养基，包括按重量份数计如下组分：马铃薯198‑202份、葡萄糖18‑20份、蛋白胨2‑3份、磷酸二氢钾0.19‑0.21份、硫酸镁0.19‑0.21份、琼脂16‑17份，水998‑1002份；原种培养瓶中的原种料，包括按重量份数计如下组分：荞子59‑61份、木屑19‑21份、麦麸16‑18份、糖1‑2份、石膏1‑2份、石灰1‑2份；栽培种容器中的栽培种料，包括按重量份数计如下组分：荞子10‑15份、木屑70‑75份、麦麸10‑15份、糖1‑2份、石膏1‑2份、石灰1‑2份；栽培袋中的栽培料，包括按重量份数计如下组分：木屑76‑78份、麦麸19‑21份、石灰0.98‑1.02份、石膏0.98‑1.02份、白糖0.98‑1.02份。3.根据权利要求2所述的亮盖灵芝菌株L5478的人工栽培方法，其特征在于，步骤（1）的具体方法为：采用组织分离法获得亮盖灵芝L5478纯菌种，4℃低温冰箱保存；使用前4‑6h将母种试管取出，放置20‑25℃恒温暗培养箱活化，采用母种培养基复壮及扩繁，培养10‑15天，制得平板母种，按1：10比例转接至原种培养瓶中扩大培养，22‑25℃恒温暗培养25‑30天，待菌丝体长满培养瓶后，将原种按1：20比例转接至栽培种培养容器中扩大培养，22‑25℃恒温暗培养25‑30天，待菌丝体长满培养容器后，将栽培种按1：40比例接入栽培袋中，20‑25℃暗光培养40‑50天、保持空气相对湿度50%‑70%。4.根据权利要求2所述的亮盖灵芝菌株L5478的人工栽培方法，其特征在于，步骤（2）的具体方法为：将长满菌丝的栽培菌袋搬运至栽培地，放置于阴凉的地方恢复养菌和后熟7‑10天后，用开口工具在灵芝菌棒的上端棒肩处剪去上端菌袋塑料，开出2‑5厘米小孔进行小孔开袋覆土栽培；用机械或人工开0.80‑1.20米宽，深0.10‑0.20米，将栽培袋立袋放置，袋间距10‑15cm进行摆袋，然后进行覆土，厚度3‑5cm，覆土后进行亮盖灵芝出菇管理。5.根据权利要求4所述的亮盖灵芝菌株L5478的人工栽培方法，其特征在于，亮盖灵芝出菇管理时，保持温度20‑26℃，空气相对湿度80%‑90%，菌袋覆土后6‑8