一种试管苗支架及其在柑橘茎尖微芽嫁接脱毒中的应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114766359A(43)申请公布日2022.07.22(21)申请号202210427333.7(22)申请日2022.04.22(71)申请人华中农业大学地址430070湖北省武汉市洪山区狮子山街1号(72)发明人姜玲杜松杨月华姜家琳汪方奎(74)专利代理机构武汉华之喻知识产权代理有限公司42267专利代理师王珣珏张彩锦(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图2页(54)发明名称一种试管苗支架及其在柑橘茎尖微芽嫁接脱毒中的应用(57)摘要本发明属于柑橘无病毒良种繁育技术领域，具体公开了一种试管苗支架及其在柑橘茎尖微芽嫁接脱毒中的应用，该试管苗支架由食品级聚丙烯材料制成，用于在试管内固定并支撑试管苗。本发明试管苗支架耐高温高压，对液体培养基的pH值影响小，不容易产生析出物，稳定性好，可重复使用，操作方便。CN114766359ACN114766359A权利要求书1/1页1.一种试管苗支架，其特征在于：该试管苗支架由食品级聚丙烯材料制成，用于在试管内固定并支撑试管苗。2.根据权利要求1所述的试管苗支架，其特征在于：包括中心环，所述中心环沿其内沿向中心延伸出放射状条，用于固定并支撑插入所述中心环内的试管苗；所述中心环沿其外沿向外延伸出至少两个第一支撑脚，用于向垂直于所述中心环所在平面的方向翻折以支撑所述中心环。3.根据权利要求2所述的试管苗支架，其特征在于：所述放射状条对称排布。4.根据权利要求2所述的试管苗支架，其特征在于：所述至少两个第一支撑脚沿所述中心环的外沿等间距分布。5.根据权利要求2‑4任一所述的试管苗支架，其特征在于：所述中心环沿其外沿向外还延伸出至少两个第二支撑脚，用于向垂直于所述中心环所在平面且与所述第一支撑脚翻折方向相反的方向翻折。6.根据权利要求5所述的试管苗支架，其特征在于：所述第二支撑脚的数量与所述第一支撑脚的数量相同，且所述第二支撑脚与所述第一支撑脚交替分布。7.根据权利要求5所述的试管苗支架，其特征在于：所述第一支撑脚为山字形，且其顶部与所述中心环连接；所述第二支撑脚为T形。8.权利要求1‑7任一所述的试管苗支架在柑橘茎尖微芽嫁接脱毒中的应用，其特征在于：应用时，将所述试管苗支架浸入柑橘茎尖微芽嫁接专用培养基中。9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：在培养试管苗之前，对装有所述试管苗支架和所述柑橘茎尖微芽嫁接专用培养基的试管进行高温高压灭菌处理。10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述柑橘茎尖微芽嫁接专用培养基为以下5种培养基中的任意一种：培养基A：MS培养基+30g/L蔗糖，pH＝6.3；培养基B：MT培养基+30g/L蔗糖，pH＝6.3；培养基C：MT培养基+30g/L蔗糖，pH＝6.4；培养基D：MT培养基+30g/L蔗糖+0.5mg/L赤霉素，pH＝6.3；培养基E：3/4浓度的MT培养基+30g/L蔗糖+0.5mg/L赤霉素，pH＝6.4。2CN114766359A说明书1/5页一种试管苗支架及其在柑橘茎尖微芽嫁接脱毒中的应用技术领域[0001]本发明属于柑橘无病毒良种繁育技术领域，更具体地，涉及一种试管苗支架及其在柑橘茎尖微芽嫁接脱毒中的应用。背景技术[0002]柑橘黄龙病是由亚洲韧皮杆菌侵染所引起的、发生在柑橘上的毁灭性病害，严重地影响了柑橘产业的持续发展。由于病原菌难以培养，也给黄龙病的防控带来了很大的阻碍，控制柑橘黄龙病造成严重的经济损失是果树研究人员亟待解决的任务。柑橘木虱是黄龙病病原的传播媒介，带病苗木的调运也加速了柑橘黄龙病的传播。迄今，控制柑橘黄龙病及其它病毒和类似病毒病，还没有有效的药剂治疗方法。目前，主要采用的措施是：挖除病树，防治木虱，搭建防虫网，加强园区管理，这些技术措施可以产生一定的效果，但投入的成本很高，效果有限。加强培育无毒苗，保证苗木健康无毒是非常重要的防病途径之一。此外，利用茎尖微芽嫁接培育无病毒苗木也是控制柑橘衰退病、柑橘黄脉病等病毒性病害的重要途径之一。[0003]茎尖微芽嫁接脱毒是获得柑橘良种无病毒苗木的有效方法。1977年，Navarro教授研究出利用茎尖微芽嫁接获得无病毒苗木的方法(Navarroetal.,1977)。柑橘茎尖微芽嫁接脱毒的原理是利用茎尖分生组织所含病毒浓度含量低或者不带病毒，或者是由于疏导组织还没有形成，病原无法运输到顶端分生组织，因而可以利用茎尖进行脱毒。最新研究表明：茎尖分生组织一定范围内的细胞受到干细胞的保护，这也为解释植物茎尖一定范围内细胞不带病原提供了理论依据。由于柑橘为木本植物，它在进行组织培养时，生根是非常困难的，因此，只有利用砧木进行嫁接，从而解决生根难的问题。在双目实体显微镜下，利用柑橘黄