抗CD3抗CD20双特异性单链抗体介导的B淋巴瘤细胞体外裂解作用.docx

抗CD3抗CD20双特异性单链抗体介导的B淋巴瘤细胞体外裂解作用抗CD3/抗CD20双特异性单链抗体介导的B淋巴瘤细胞体外裂解作用(（集锦4篇）），下面是小编给大家带来的抗CD3/抗CD20双特异性单链抗体介导的B淋巴瘤细胞体外裂解作用，以供大家参考，我们一起来看看吧!篇1：抗CD3/抗CD20双特异性单链抗体介导的B淋巴瘤细胞体外裂解作用抗CD3/抗CD20双特异性单链抗体介导的B淋巴瘤细胞体外裂解作用在构建并成功表达抗CD3/抗CD20双特异性单链抗体(bscCD3×CD20)的基础上,对其在体外介导T淋巴细胞杀伤RamousB淋巴瘤细胞的.生物活性进行了分析.AnnexinV/PI(AV/PI)染色和形态学观察及扫描电镜分析表明bscCD3×CD20介导的B淋巴瘤细胞体外裂解作用是通过先诱导靶细胞凋亡而继发坏死、裂解的方式实现的.非放射性细胞毒性分析表明bscCD3×CD20介导的T淋巴细胞杀伤活性随抗体浓度、反应时间和效靶比的升高而增加.在抗体浓度为5μg/mL、作用时间为24h、效靶比为10:1时,杀伤活性最高可达87.3%.采用美国SuperArray人细胞凋亡芯片检测细胞杀伤起始阶段细胞凋亡相关基因的表达水平变化,许多凋亡相关基因的表达均发生了不同程度的上调或下调,其中ATM基因表达升高了187倍,p53基因升高了15倍,提示ATM-p53途径可能是bscCD3×CD20介导T细胞诱导B淋巴瘤细胞凋亡的主要途径.作者：于蕊李世崇吴本传刘红叶玲玲刘兴茂王启伟陈昭烈YURuiLIShi-ChongWUBen-ChuanLIUHongYELing-LingLIUXing-MaoWANGQi-WeiCHENZhao-Lie作者单位：军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071刊名：生物工程学报ISTICPKU英文刊名：CHINESEJOURNALOFBIOTECHNOLOGY年，卷(期)：22(3)分类号：Q754关键词：CD3CD20双特异性单链抗体细胞裂解B细胞淋巴瘤篇2：抗人精浆蛋白/抗CD3双特异性单链抗体的活性研究抗人精浆蛋白/抗CD3双特异性单链抗体的活性研究目的:构建并表达抗人精浆蛋白/抗CD3的双特异性单链抗体(BsscFv),并检测其生物学活性.方法:利用重叠延伸拼接PCR,拼接抗人精浆蛋白scFv基因和抗CD3scFv基因,并在中间引入柔性短肽(GlySerGly)2,构建抗人精浆蛋白/抗CD3的BsscFv基因.测序正确后,将融合基因亚克隆入真核表达载体中,并在HeLa细胞中进行表达,采用流式细胞术(FCM)和51Cr释放试验,评价BsscFv的抗原结合活性和体外介导的特异性杀伤靶细胞的效应,以及利用裸鼠前列腺癌模型观察其在体内的抑瘤作用.结果:测序分析证实,BsscFv基因片段的大小为1.5kb,编码500个氨基酸,该序列与设计的完全一致.SDS-PAGE和Westernblot分析证明:表达产物存在于HeLa细胞的培养上清中,其相对分子质量(Mr)为61000.FCM结果显示:BsscFv可特异性的结合前列腺癌细胞LNCaP和CD3+淋巴瘤细胞Jurkat,结合率分别为54.1%和53.7%.体外实验表明,BsscFv可介导CTL对LNCaP细胞的杀伤.与对照组相比较,接种LNCaP的裸鼠在体内注射激活的.CTL和BsscFv治疗后,肿瘤的生长明显受到抑制(P王禾,武国军,WANGHe,WUGuo-jun(第四军医大学西京医院泌尿外科,陕西,西安,710032)刊名：细胞与分子免疫学杂志ISTICPKU英文刊名：CHINESEJOURNALOFCELLULARANDMOLECULARIMMUNOLOGY年，卷(期)：200622(4)分类号：Q789关键词：前列腺肿瘤CD3单链抗体双特异性抗体篇3：抗HBsAg单链抗体特异性单克隆抗体的制备及应用抗HBsAg单链抗体特异性单克隆抗体的制备及应用目的获得抗HBsAg单链抗体(HBScFv)的单克隆抗体,并初步研究其在抗HBsAg类小分子抗体及其融合蛋白质的纯化、活性鉴定方面的应用.方法利用杂交瘤技术,以大肠杆菌表达的重组抗HBScFv为抗原,免疫Balb/c小鼠,再将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合.通过ELISA法、Western-blot鉴定特异性单克隆抗体,通过免疫双扩散法鉴定单抗亚型,并将筛选到的高效价单抗用于抗HBsAgFab抗体等重组蛋白质的亲和色谱及ELISA鉴定.结果建立了9株能够稳定分泌抗HBScFv特异性单克隆抗体的'细胞株,其细胞上清效价为1:160～1:12800,腹水效价为1:50000～1:400000;单克隆抗体的亚类分析结果显示有6株为IgG1,其余3株为IgG2a.初步应用结果表明制备的单克隆抗