一种阳光玫瑰葡萄无病毒试管苗培养方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114847158A(43)申请公布日2022.08.05(21)申请号202210285575.7(22)申请日2022.03.22(71)申请人河北农业大学地址071001河北省保定市灵雨寺街289号(72)发明人师校欣杜国强刘文林张向昆王莉乔月莲(74)专利代理机构北京冠和权律师事务所11399专利代理师田春龙(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)B08B9/087(2006.01)权利要求书2页说明书6页附图4页(54)发明名称一种阳光玫瑰葡萄无病毒试管苗培养方法(57)摘要本发明的一种阳光玫瑰葡萄无病毒试管苗培养方法，包括如下步骤：步骤一、取葡萄试管苗，变温条件下在温控箱内热处理20d，变温条件为38℃/8h、32℃/8h，依次循环；步骤二、取1.5mm左右的茎尖、茎尖下第一腋芽和第二腋芽进行培养，获得脱毒处理后的试管苗经过RT‑PCR核酸检测，脱毒率100％，获得葡萄无病毒试管苗。应用葡萄茎尖分生组织和茎尖下第一、二腋芽培养结合热处理技术可脱除病毒并进行优良品种的快速繁殖，在短期内获得大量整齐一致的无病毒苗木，能高效率繁殖葡萄优质脱毒试管苗。CN114847158ACN114847158A权利要求书1/2页1.一种阳光玫瑰葡萄无病毒试管苗培养方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、取葡萄试管苗，变温条件下在温控箱内热处理20d；步骤二、取1.5mm左右的茎尖、茎尖下第一腋芽和第二腋芽进行培养，获得脱毒苗。2.根据权利要求1所述的一种阳光玫瑰葡萄无病毒试管苗培养方法，其特征在于，所述步骤一中，变温条件为38℃/8h、32℃/8h，依次循环。3.根据权利要求1所述的一种阳光玫瑰葡萄无病毒试管苗培养方法，其特征在于，所述步骤二中，脱毒处理后的葡萄试管苗经过RT‑PCR核酸检测，脱毒率100％，获得葡萄无病毒试管苗。4.根据权利要求2所述的一种阳光玫瑰葡萄无病毒试管苗培养方法，其特征在于，所述温控箱包括：箱体(1)、隔板(2)、加热棒(3)、挡板(4)、驱动箱(5)、移动板(6)、工作台(7)、放置槽(8)，所述箱体(1)内间隔设置有竖直方向的隔板(2)，所述隔板(2)的两侧均设置有加热棒(3)，所述隔板(2)底端铰接有挡板(4)，所述箱体(1)下端设置有驱动箱(5)，所述驱动箱(5)内设置有移动板(6)，所述移动板(6)能水平方向往复移动，所述移动板(6)上设置有工作台(7)，所述工作台(7)顶端设置有若干放置槽(8)。5.根据权利要求4所述的一种阳光玫瑰葡萄无病毒试管苗培养方法，其特征在于，所述驱动箱(5)的内壁上设置有水平方向的导轨(9)，所述移动板(6)一端与所述导轨(9)滑动连接，所述移动板(6)底端设置有移动齿条(10)，所述移动齿条(10)下方设置有水平方向的固定齿条(11)，所述固定齿条(11)与所述驱动箱(5)内壁底部连接，所述移动齿条(10)与所述固定齿条(11)之间设置有第一齿轮(12)和第二齿轮(13)，所述第一齿轮(12)分别与所述移动齿条(10)、所述固定齿条(11)啮合，所述第二齿轮(13)分别与所述移动齿条(10)、所述固定齿条(11)啮合，连接杆(14)一端与所述第一齿轮(12)的圆心处转动连接，连接杆(14)另一端与所述第二齿轮(13)的圆心处转动连接，摆杆(15)一端与第一转轴(16)一端连接，第一转轴(16)另一端穿过所述连接杆(14)的中间处与扫刷(17)连接，所述第一转轴(16)与所述连接杆(14)转动连接，所述驱动箱(5)的外壁上设置有散热口(18)，所述散热口(18)上设置有过滤网(19)，所述扫刷(17)与所述过滤网(19)接触，摆杆(15)另一端与转杆(20)的一端转动连接，转杆(20)的另一端与第二转轴(21)一端连接，第二转轴(21)另一端与所述驱动箱(5)内壁转动连接，所述第二转轴(21)上设置有第三齿轮(22)，所述驱动箱(5)内壁上转动连接有第三转轴(23)，所述第三转轴(23)上设置有第四齿轮(24)，所述第三齿轮(22)与所述第四齿轮(24)啮合，所述驱动箱(5)内壁上设置有第一电机(25)，所述第一电机(25)的输出轴与圆盘(26)的圆心处连接，所述圆盘(26)上沿圆周方向间隔设置有两个齿牙(27)，所述齿牙(27)能与所述第四齿轮(20)啮合。6.根据权利要求4所述的一种阳光玫瑰葡萄无病毒试管苗培养方法，其特征在于，所述箱体(1)内壁上设置有温度传感器(28)和控制器(29)，所述温度传感器(28)与所述控制器(29)电性连接，所述控制器(29)与加热棒(3)电性连接。7.根据权利要求4所述的一种阳光玫瑰葡萄无病毒试管苗培养方法，其特征在于，所述驱动箱(5)的外壁上设置有开