新型鸭呼肠孤病毒传代致弱毒株及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114891753A(43)申请公布日2022.08.12(21)申请号202111442711.0(51)Int.Cl.(22)申请日2021.11.30C12N7/00(2006.01)C12N15/46(2006.01)(83)生物保藏信息A61K39/15(2006.01)CCTCCNO：V2021442021.05.25A61P31/14(2006.01)(71)申请人山东省农业科学院家禽研究所（山G01N33/569(2006.01)东省无特定病原鸡研究中心）地址250023山东省济南市天桥区交校路1号申请人青岛蔚蓝生物股份有限公司(72)发明人于可响黄兵李玉峰丛雁方于春梅商敏路晓刘丽萍(74)专利代理机构北京国坤专利代理事务所(普通合伙)11491专利代理师赵红霞权利要求书1页说明书14页附图3页(54)发明名称新型鸭呼肠孤病毒传代致弱毒株及其应用(57)摘要本发明公开了一株新型鸭呼肠孤病毒传代致弱毒株，已于2021年05月25日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：V202144，保藏地址为：中国武汉武汉大学。本发明还公开了以该致弱毒株为种毒的新型鸭呼肠孤病毒活疫苗。本发明的新型鸭呼肠孤病毒传代致弱毒株，是在鸡胚成纤维细胞上传代后经克隆纯化而得的自然缺失弱毒株，毒力显著降低，接种雏鸭无不良反应，是具有较高安全性的疫苗候选弱毒株。以该弱毒株研制的疫苗免疫雏鸭可有效抵挡强毒攻击，安全性高，不返强，遗传稳定性好。CN114891753ACN114891753A权利要求书1/1页1.一株新型鸭呼肠孤病毒传代致弱毒株，已于2021年05月25日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：V202144，保藏地址为：中国武汉武汉大学，邮编430072。2.根据权利要求1所述的新型鸭呼肠孤病毒传代致弱毒株，其特征在于：是由强毒株DE株突变而得，突变至少包括以下5个σC基因上的核苷酸突变位点和4个氨基酸突变位点：核苷酸突变位点：第41位C突变为T，第201位C突变为T，第218位T突变为G，第851位T突变为C，第924位T突变为G；氨基酸突变位点：第14位P突变为L，第73位L突变为R，第284位L突变为S，第308位N突变为K。3.权利要求1或2所述的新型鸭呼肠孤病毒传代致弱毒株在防治新型鸭呼肠孤病毒中的应用。4.权利要求1或2所述的新型鸭呼肠孤病毒传代致弱毒株在制备新型鸭呼肠孤病毒弱毒疫苗中的应用。5.权利要求1或2所述的新型鸭呼肠孤病毒传代致弱毒株在制备防治新型鸭呼肠孤病毒的药物中的应用。6.权利要求1或2所述的新型鸭呼肠孤病毒传代致弱毒株在制备防治由新型鸭呼肠孤病毒引起的疾病的药物中的应用。7.一种新型鸭呼肠孤病毒弱毒疫苗，是以权利要求1或2所述的新型鸭呼肠孤病毒传代致弱毒株为种毒的新型鸭呼肠孤病毒活疫苗。8.根据权利要求7所述的新型鸭呼肠孤病毒弱毒疫苗，其特征在于：通过以下方法制备得到：将上述新型鸭呼肠孤病毒传代致弱毒株在鸡胚成纤维细胞上传代培养，病毒滴度达3.50到10TCID50/0.1ml以上，加入冻干保护剂制成弱毒疫苗。9.一种用于诊断新型鸭呼肠孤病毒的检测抗原，为权利要求1或2所述的新型鸭呼肠孤病毒传代致弱毒株的病毒颗粒。2CN114891753A说明书1/14页新型鸭呼肠孤病毒传代致弱毒株及其应用技术领域[0001]本发明涉及一株新型鸭呼肠孤病毒传代致弱毒株及其应用，属于动物医学疫苗领域。背景技术[0002]禽呼肠孤病毒(avianreovirus，ARV)属于呼肠孤病毒科、正呼肠孤病毒属，病毒粒子无囊膜，为20面体对称，基因组为线性双股RNA，分10个节段，极易发生基因重配与突变。该病毒宿主广泛，可感染多种禽类。[0003]目前禽呼肠孤病毒在我国主要存在3种不同致病型：1、由鸡呼肠孤病毒(Chickenreovirus,CRV)引起的鸡病毒性关节炎、矮小综合征等，主要表现关节炎、腱鞘炎、生长发育不良；2、由番鸭呼肠孤病毒(Muscovyduckreovirus,MDRV)引起的番鸭、鹅“花肝病”，主要表现肝脏有黄白色坏死灶；3、由新型鸭呼肠孤病毒(NovelDuckReovirus,NDRV)引起的鸭鹅“脾坏死病”，主要表现肝脾坏死和出血。造成这3种疾病的禽类呼肠孤病毒无论从流行病学、临床症状和病理变化，还是从基因序列和血清学等方面，均表现出较大的差异。[0004]新型鸭呼肠孤病毒可以感染樱桃谷鸭、麻鸭、番鸭、半番鸭、野鸭、鹅等多个水禽品种，主要引起雏鸭发病死亡，成年鸭感染不表现症状，但能垂直传播，引起后代雏鸭发病。该病在2005年前后在中国南方一些省份，如福建、广东、浙江等地的鸭群中开始出现，后蔓延至全国主