一种牛肌肉生长抑制素蛋白单克隆抗体及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114891101A(43)申请公布日2022.08.12(21)申请号202111473952.1G01N33/68(2006.01)(22)申请日2021.12.02(71)申请人吉林省农业科学院地址130000吉林省长春市净月高新开发区生态大街1363号(72)发明人秦立红赵玉民吴健曹阳刘基伟董刚辉刘洪亮罗晓彤朱永超(74)专利代理机构哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司23211专利代理师王志新(51)Int.Cl.C07K16/22(2006.01)C12N15/13(2006.01)G01N33/577(2006.01)权利要求书1页说明书5页序列表5页附图2页(54)发明名称一种牛肌肉生长抑制素蛋白单克隆抗体及其应用(57)摘要本发明公开一种牛肌肉生长抑制素蛋白单克隆抗体及其应用，属于生物技术领域。单克隆抗体具有如SEQIDNO.15所示氨基酸序列的轻链可变区和如SEQIDNO.16所示氨基酸序列的重链可变区。牛MSTN蛋白单克隆抗体量的增加，可刺激肌肉细胞的增生，增加肌肉发育速度，提高肉牛肌肉占比，牛MSTN蛋白单克隆抗体与牛MSTN蛋白结合能力EC50达到稀释0.14倍。在肉牛育种过程中，该抗体能有效快速的定位牛肌肉生长抑制素蛋白，实现辅助育种的快速有效化。CN114891101ACN114891101A权利要求书1/1页1.一种牛肌肉生长抑制素蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体轻链的可变区的CDR‑L1的氨基酸序列为SSVSY，CDR‑L2的氨基酸序列为LTS，CDR‑L3的氨基酸序列如SEQIDNO:7所示；所述单克隆抗体重链的可变区的CDR‑H1的氨基酸序列如SEQIDNO:10所示，CDR‑H2的氨基酸序列如SEQIDNO:12所示，CDR‑H3的氨基酸序列如SEQIDNO:14所示。2.根据权利要求1所述的牛肌肉生长抑制素蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体重链的可变区的CDR‑H1的基因序列如SEQIDNO:9所示，所述单克隆抗体重链的可变区的CDR‑H2的基因序列如SEQIDNO:11所示，所述单克隆抗体重链的可变区的CDR‑H3的基因序列如SEQIDNO:13所示。3.根据权利要求1所述的牛肌肉生长抑制素蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述重链的基因序列如SEQIDNO.8所示。4.根据权利要求1所述的牛肌肉生长抑制素蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述重链氨基酸序列如SEQIDNO.16所示。5.根据权利要求1所述的牛肌肉生长抑制素蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体轻链的可变区的CDR‑L1的基因序列如SEQIDNO:5所示，所述单克隆抗体轻链的可变区的CDR‑L2的基因序列为GTCACATCC，所述单克隆抗体轻链的可变区的CDR‑L3的基因序列如SEQIDNO:6所示。6.根据权利要求1所述的牛肌肉生长抑制素蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述轻链的基因序列如SEQIDNO.4所示。7.根据权利要求1所述的牛肌肉生长抑制素蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述轻链的氨基酸序列如SEQIDNO.15所示。8.编码权利要求1‑7任一所述牛肌肉生长抑制素蛋白单克隆抗体的基因。9.携带权利要求8所述基因的载体或细胞。10.权利要求1‑7任一所述单克隆抗体在制备检测牛肌肉生长抑制素试剂盒中的应用。2CN114891101A说明书1/5页一种牛肌肉生长抑制素蛋白单克隆抗体及其应用技术领域[0001]本发明属于生物技术领域，具体涉及一种牛肌肉生长抑制素蛋白单克隆抗体及其应用。背景技术[0002]牛肌肉生长抑制素是一种牛体内天然产生的蛋白质，具有动物肌肉抑制生长的功能。肌肉生长抑制素(Myostatin，MSTN)是抑制肌细胞增殖与分化的关键基因，对骨骼肌生长发育起着负调控作用，还参与到机体脂肪沉积等其他生命过程中。MSTN不仅能够调控肌肉生长，也能调控脂肪的发育，而这两者对于肉牛产肉量和肉质均起到关键作用，研究显示MSTN可以在肉牛育种中作为分子靶标，通过分子标记辅助育种、基因编辑等方法提高肉牛肌肉发育效率、提升产肉量、优化肌肉和脂肪分布，同时提高育种效率。[0003]目前通用的是肌肉生长抑制素(Myostatin，MSTN)基因检测方法，如荧光定量PCR等。这种方法能在快速最大化的实现基因拷贝数的检测。但是目前该方法需要配套的分子生物学仪器，基层普及度不高。另外，仅仅检测基因的表达量，无法检测出实际最终实际蛋白的表达量。因此本研究研发的牛肌肉生长抑制素能在蛋白水平上检测表达水平，辅助提高育种效率。发明内容[0004]本发明的目的是为了提供一种特异检测牛肌肉生长抑制素的试剂。[0005]本发明提供一种牛肌肉生长抑制素蛋白单克隆抗体，所述