樟疫霉效应子蛋白SCR323321及其编码基因与应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114891077A(43)申请公布日2022.08.12(21)申请号202210292032.8(22)申请日2022.03.24(71)申请人南京林业大学地址210018江苏省南京市玄武区龙蟠路159号(72)发明人戴婷婷何海彬焦斌斌李亚星(74)专利代理机构镇江至睿专利代理事务所(普通合伙)32529专利代理师刘静(51)Int.Cl.C07K14/37(2006.01)C12N15/31(2006.01)C12N15/84(2006.01)A01H6/82(2018.01)A01H5/00(2018.01)权利要求书1页说明书8页序列表2页附图3页(54)发明名称樟疫霉效应子蛋白SCR323321及其编码基因与应用(57)摘要本发明公开了一种来源于樟疫霉的SCR(Smallcysteine‑rich)效应子蛋白SCR323321及其编码基因和应用，该蛋白序列为序列表中的SEQIDNo.1的氨基酸残基序列。本发明以农杆菌GV3101为宿主、利用PVX病毒表达载体对该基因进行瞬时表达，采用注射接种法接种本氏烟(NicotianaBenthamiana)，证明了效应子蛋白SCR323321具有抑制植物组织细胞死亡乃至使注射部位出现显著坏死症状的功能。本发明对于充实植物病原卵菌与寄主互作的分子机制资料信息，以及建立卵菌病害的综合防治技术策略都有重要意义。CN114891077ACN114891077A权利要求书1/1页1.樟疫霉效应子蛋白SCR323321，其特征在于，所述蛋白如1)至2)任一所述，1)氨基酸序列如SEQIDNO：1所示；2)将1)所示的氨基酸序列经一个或几个氨基酸残基的取代/缺失/添加，并具有效应子功能的蛋白质。2.编码权利要求1所述蛋白的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子如下a)至b)任一所示，a)核苷酸序列如SEQIDNO：2所示；b)在严格条件下可与a)所述的核苷酸序列杂交的核苷酸序列。3.含有权利要求2所述核酸分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。4.根据权利要求3所述的重组载体，其特征在于，所述重组载体为重组过表达载体或重组克隆载体。5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于，所述重组表达载体中含有35S启动子。6.权利要求1所述的蛋白或权利要求2所述的核酸分子，或权利要求3、4或5中任一所述的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌在如下1)或2)中的应用：1)抑制植物细胞死亡；2)制备用于抑制植物细胞死亡的产品。7.一种用于抑制植物细胞死亡的产品，其活性成分为权利要求1所述的蛋白，或权利要求2所述的核酸分子，或权利要求3‑5中任一所述的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。8.根据权利要求6所述的应用或权利要求7所述的产品，其特征在于：所述植物细胞来源于双子叶植物或单子叶植物。9.根据权利要求8所述的应用或权利要求8所述的产品，其特征在于：所述双子叶植物为烟草。2CN114891077A说明书1/8页樟疫霉效应子蛋白SCR323321及其编码基因与应用技术领域[0001]本发明属于樟疫霉效应子技术领域，具体涉及樟疫霉效应子蛋白SCR323321及其编码基因与应用背景技术[0002]樟疫霉(Phytophthoracinnamomi)是已知的最具破坏性的植物病原卵菌之一，在世界范围内广泛分布，寄主范围接近5000种。樟疫霉是一种世界性严重危害花卉、森林苗木的土传病原菌之一。它在我国东南沿海地区包括上海、江苏、浙江、福建以及台湾有一定程度分布。不但分布广泛，而且严重引起某些诸如山茶花、杜鹃、雪松、香樟树等植物的发病与死亡。国外研究表明，寄主植物病害发生与该菌在土壤中的分布和消长变化有关。因此他们对该菌在土壤中的密度进行大量研究后认为，该菌在自然土壤中不但呈季节性变化而且与环境生态因子的变化相关。例如，在澳大利亚森林区，在夏季其密度最高，在此期间土壤温湿度较为适宜；冬季最少，因为土壤温度低于10℃。[0003]卵菌作为典型的半活体营养寄生植物病原菌，目前对于卵菌中的疫霉菌研究较广泛。疫霉菌在与寄主植物长期互作的过程中进化出一系列可以分泌到体外的效应子，这些效应子能够与植物免疫反应信号通路的细胞膜识别受体蛋白或通路下游靶标相互作用，干扰寄主植物防御功能，促进自身的侵染定殖，对植物产生致病性(JonesandDangl,2006)。疫霉菌能够产生一种效应子蛋白质——小半胱氨酸富集蛋白(Smallcysteine‑rich，SCR)，诱导植物致病基因的表达和程序性细胞死亡。PcF/SCR被认为是另外一类能够引起植物细胞死亡的毒素，然而目前并不清楚樟疫霉SCR类效应蛋白参与致病的机制。SCR被认为是另外一类能够引起植物细胞死亡的毒素，