一种高效的棉花转基因植株嫁接技术.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115380721A(43)申请公布日2022.11.25(21)申请号202211227050.4(22)申请日2022.10.09(71)申请人湖北省农业科学院经济作物研究所地址430064湖北省武汉市洪山区南湖大道43号(72)发明人韩光明蓝家样陈全求张胜昔李国荣(74)专利代理机构北京深川专利代理事务所(普通合伙)16058专利代理师疏亚雅(51)Int.Cl.A01G2/30(2018.01)A01G22/50(2018.01)权利要求书2页说明书6页(54)发明名称一种高效的棉花转基因植株嫁接技术(57)摘要本发明公开了一种高效的棉花转基因植株嫁接技术，具体包括如下步骤：S1.材料准备；S2.准备根茎；将温室培养的健壮棉花根茎植株移入植物组培室；去掉子叶上面的部分；将茎垂直切开2‑3cm深；S3.准备接穗；选择准备移植的转基因棉花植物；只保留一片展开的叶子，去掉其余的叶子；将转基因棉花植物的植株底部切成深的“V”形；S4.嫁接；把接穗垂直插入到“V”形砧木的基部，直到它稳定；每天监测生长环境，至接穗长出大约两片新叶，移植物被转移到温室；最后将其转移到一个大种植盆里。该高效的棉花转基因植株嫁接技术，采用嫁接技术对体细胞胚胎发生的转基因棉花植株进行再生，嫁接技术显著提高了转基因棉花移栽的成活率，操作简单，成活率高。CN115380721ACN115380721A权利要求书1/2页1.一种高效的棉花转基因植株嫁接技术，其特征在于：具体包括如下步骤：S1.材料准备；准备材料包括：转基因棉花植物、健壮棉花根茎、大小种植盆、土壤混合物、MS培养基、保鲜膜、手术刀和塑料袋；S2.准备根茎；a.土壤混合物在120‑130℃下消毒30分钟；b在小种植盆里装满消毒过的土壤；c.健壮棉花根茎植株是在温室里的小种植盆里培养的；d.1.5‑2周后，将健壮棉花根茎植株移入植物组培室；e.去掉子叶上面的部分；f.将茎垂直切开2‑3cm深；S3.准备接穗；a.选择准备移植的转基因棉花植物；b.将转基因棉花植物从试管中取出；c.只保留一片展开的叶子，去掉其余的叶子；d.将转基因棉花植物的植株底部切成深的“V”形；S4.嫁接；a.把接穗垂直插入到“V”形砧木的基部，直到它稳定；b.移植物部分用保鲜膜缠绕固定；c.接枝植物须用塑料袋盖住；d.接枝植物生长在16小时光照/8小时黑暗周期，1500勒克斯光照下，温度设置为28±2℃；e.除去砧木节上长出的嫩枝；f.每天监测土壤，如有必要，添加水和1/2MS培养基；g.1周后，从移植物上取下塑料袋或杯子；h.大约2周后，接穗长出大约两片新叶，移植物被转移到温室；i.再过3周，植物被转移到一个大种植盆里。2.根据权利要求1所述的一种高效的棉花转基因植株嫁接技术，其特征在于：所述转基因棉花植物是通过农杆菌介导转化后的体细胞胚胎获得，且健壮棉花根茎植株为湖北省农业科学院的科学家培育的国审棉花品种EZ9。3.根据权利要求1所述的一种高效的棉花转基因植株嫁接技术，其特征在于：大小种植盆包括直径15‑20厘米的小种植盆和直径约30‑35厘米的大种植盆分别用于前后期不同大小植株的栽种移植。4.根据权利要求1所述的一种高效的棉花转基因植株嫁接技术，其特征在于：所述土壤混合物为预施有机肥的砂质或黏质土壤，所述培养基为Murashige和Skoog(MS)培养基。5.根据权利要求1所述的一种高效的棉花转基因植株嫁接技术，其特征在于：所述S2步骤中茎垂直切开位置为茎秆中间位置以保持两边平衡，且切茎深度具体以直到茎维管组织满足接穗固定为准。6.根据权利要求1所述的一种高效的棉花转基因植株嫁接技术，其特征在于：所述S3步2CN115380721A权利要求书2/2页骤中需要通过手术刀切割植株底部切成深的“V”形结构，且切口的v形底座切面保持光滑以便于接穗和砧木对接固定牢固。7.根据权利要求1所述的一种高效的棉花转基因植株嫁接技术，其特征在于：所述S3步骤中接穗的大小不得低于0.3cm，且接穗的大小优选为0.8‑1.0cm。8.根据权利要求1所述的一种高效的棉花转基因植株嫁接技术，其特征在于：所述S4步骤中在接穗长出两片新叶前，保持除去砧木节上长出的嫩枝，避免多个叶片需要更多的水分和营养导致接穗因缺水和营养不足而死亡。9.根据权利要求1所述的一种高效的棉花转基因植株嫁接技术，其特征在于：所述S4步骤中盖住嫁接植株的主要目的是保持湿度，在嫁接后的前一周监测湿度保持湿度为70％‑90％，避免接穗和砧木之间还没有形成新的维管组织时水分过度流失导致接穗死亡。3CN115380721A说明书1/6页一种高效的棉花转基因植株嫁接技术技术领域[0001]本发明涉及棉花栽培相关技术领域，具体