一种马铃薯脱毒种薯高效繁育方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115474549A(43)申请公布日2022.12.16(21)申请号202211087062.1(22)申请日2022.09.06(71)申请人延安市农业科学研究所地址716000陕西省延安市宝塔区马家湾(72)发明人郑太波姚贵军党菲菲李媛闫俊张连杰杜红梅高瑞邓长芳宋云陈宇(74)专利代理机构佛山知正知识产权代理事务所(特殊普通合伙)44483专利代理师李亚婷(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)A01G2/10(2018.01)A01G22/25(2018.01)权利要求书4页说明书10页附图1页(54)发明名称一种马铃薯脱毒种薯高效繁育方法(57)摘要本发明提供一种马铃薯脱毒种薯高效繁育方法，涉及农作物培育技术领域。一种马铃薯脱毒种薯高效繁育方法，包括以下步骤：优良品种筛选、茎尖剥离、试管苗培养、病毒检测、脱毒苗快繁、原原种繁育、原种繁育、良种繁育。通过气候特点和环境条件，以脱毒种薯繁育技术研究为中心，以推动产业化发展为主线，集成、创新出马铃薯新、优品种筛选、茎尖剥离、试管苗培养、病毒检测、脱毒苗快繁、原原种繁育、原种繁育、良种生产优质高效繁育技术流程，解决了当前脱毒种薯生产环节繁琐、品质低、技术不系统、繁育成本高的问题，可操作性强，增加马铃薯种植效益，促进农业增收和当地经济发展。CN115474549ACN115474549A权利要求书1/4页1.一种马铃薯脱毒种薯高效繁育方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一：马铃薯脱毒S1.优良品种筛选在有关马铃薯科研、育种单位或马铃薯栽培优生区引进或征集各类马铃薯新品种进行品比试验，选用适合本地区大面积栽培的优质高产品种或具有特殊用途的品种，作为脱毒种用材料；S2.培养箱育芽将选择的薯块用自来水冲洗干净晾干后放入光照培养箱(温度24℃‑28℃)进行催芽；S3.消毒(1)实验室消毒：提前5～7d对实验室进行空间消毒，每1m3用40％甲醛20mL、高锰酸钾15g，先将高锰酸钾放入容器内，再注入甲醛溶液，密闭熏蒸24h；(2)器具消毒：将用于组培的所有器具放置121℃灭菌容器中灭菌20min进行消毒；(3)操作前消毒：操作人员应用肥皂仔细清洗手臂，更换消过毒的工作服、工作鞋、工作帽，进入操作台用75％酒精严格擦拭双手；(4)茎尖消毒：待芽萌发至2～3cm时，选取粗壮的芽，用解剖刀切下，剥去外叶，自来水下冲洗60～120min，用75％酒精溶液浸泡5s,用0.1％升汞溶液消毒6～8min，用无菌水对其冲洗5～8次，再用无菌滤纸吸干水分备用；步骤二、试管苗培育S1.茎尖剥离将消毒过的芽在40倍解剖镜下，剥离带1～2个叶原基的茎尖分生组织；S2.试管苗诱导将剥离的茎尖分生组织接种到添加0.5mg/L～1.5mg/L6‑BA的MS培养基上，放在温度24±2℃，光照时间16h，光照强度为2000lx～3000lx条件下进行培养45～60d后，茎尖成苗；S3.试管苗病毒检测针对试管苗采用RT‑PCR分子检测技术对马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)等病毒和马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVD)进行病毒检测，剔除长势弱，叶片黄化及带毒病株，获得脱毒苗；S4.脱毒苗扩繁将脱毒苗切成一叶一节的茎段，扦插在MS培养基上，培养条件参照试管苗诱导培养，40～45d进入下一轮扩繁，循环数代至栽插；步骤三：原原种繁育S1.选地建棚选择地势较高平坦，排灌方便，无病虫害，3年以上未种过马铃薯的轮作地搭建60目的防虫网棚，产地条件必须符合GB7331要求；S2.移苗、炼苗从培养室选择生长健壮、无污染，具有8～10片叶的脱毒瓶苗移到网室的炼苗床上，盖上农膜，培养6～7d；S3.确定栽插时间4月上旬至4月下旬，0cm～5cm地温稳定至12℃以上开始栽插；2CN115474549A权利要求书2/4页S4.脱毒苗准备将炼苗后的脱毒苗从培养瓶中取出，用经过75％酒精消毒的手术剪将植株顶端3～5cm长(3～5片叶)茎段剪下，基部用IBA、NAA、GGR溶液浸泡15～20min后栽插；S5.脱毒苗扦插采用畦栽方式，畦宽1.2m，每畦8行，株距12cm，每亩栽插密度控制在2.2万株左右，搭建120cm宽、50cm高的小拱棚；S6.田间管理缓苗期：初始阶段用农膜覆盖、保湿、保温，相对湿度控制在95％～100％，防止叶面失水，用95％的遮阳网，覆盖遮阳，将温度控制在24～28℃，4～5d后取掉95％的遮阳网换成75％的遮阳网，并通过农膜边缘揭洞放风，调节温度，逐渐降低温度，直至缓苗期结束后，取掉农膜及遮阳网；肥水管理：水分视田间干湿程度而定，一般5～7d用洒壶均匀喷洒常温水一次，追肥全部采用营养液喷