一种铁皮石斛种子贮存方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115606361A(43)申请公布日2023.01.17(21)申请号202211327682.8(22)申请日2022.10.27(71)申请人云南省农业科学院药用植物研究所地址650205云南省昆明市盘龙区北京路2238号(72)发明人董志渊杨丽英胡明举丛琨石亚娜石瑶袁理春王家金(74)专利代理机构昆明正原专利商标代理有限公司53100专利代理师程相桂陈左(51)Int.Cl.A01C1/00(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图1页(54)发明名称一种铁皮石斛种子贮存方法(57)摘要本发明涉及种子保存技术领域，具体是一种铁皮石斛种子贮存方法，本发明不需要用液氮冷冻，通过将消毒后的铁皮石斛种子用干燥器干燥，然后再在4‑25℃贮存，可有效延长种子的贮存期，且贮存后6个月后的种子仍能保持较好活性，本发明可降低铁皮石斛种子的储存成本和储存难度。CN115606361ACN115606361A权利要求书1/1页1.一种铁皮石斛种子贮存方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）无菌条件下，用吸水剂脱水干燥种子至含水量3.00‑7.00%；（2）将脱水干燥后的种子，在无菌环境中转入无菌的冻存管中，密封贮存。2.根据权利要求1所述的铁皮石斛种子贮存方法，其特征在于，步骤（1）中，干燥过程中环境湿度控制在1‑3%RH，干燥温度20‑25℃。3.根据权利要求1所述的铁皮石斛种子贮存方法，其特征在于，步骤（2）中，密封贮存温度为4‑25℃。4.根据权利要求1至3任一项所述的铁皮石斛种子贮存方法，其特征在于，步骤（1）中，无菌环境中，消毒灭菌处理后蒴果，切取种子，放入已灭菌的带除菌过滤膜的培养盒中进行吸水干燥。5.根据权利要求4所述的铁皮石斛种子贮存方法，其特征在于，所述的灭菌种子来源于采收饱满、未开裂，果皮黄绿色的蒴果。6.根据权利要求1所述的铁皮石斛种子贮存方法，其特征在于，所述吸水剂为变色硅胶或氯化钙。2CN115606361A说明书1/4页一种铁皮石斛种子贮存方法技术领域[0001]本发明属于种子保存技术领域，具体的说，涉及一种铁皮石斛种子贮存方法。背景技术[0002]铁皮石斛（DendrobiumofficinaleKimuraetMigo）为兰科石斛属附生植物，以干燥茎入药，为我国的传统药材，味甘，微寒，具益胃生津，滋阴清热等功效。铁皮石斛药材长期依赖野生资源，导致资源日渐枯竭，20世纪90年代以来，铁皮石斛人工栽培技术逐步成熟，采用种子无菌萌发技术，成功实现种苗规模化生产。[0003]由于铁皮石斛蒴果完全成熟时易开裂，种子暴露在空气中，不方便外植体消毒，目前生产中一般采用随采随播的方式，即消毒处理成熟未开裂蒴果，切取种子进行无菌播种。[0004]石斛新鲜种子含水量较高（30‑40%），生理代谢活动较旺盛，采摘后如果不及时播种，直接长时间储存，种子易失去活性。由于铁皮石斛种子细小，一个蒴果含有上万粒种子，非常适合采用超低温保存技术进行贮存。将种子存放在‑196℃液氮超低温环境中，几乎可完全停止种子生命代谢活动，从而达到长期储存的目的。相关研究表明，经干燥处理24ｈ的铁皮石斛种子在液氮(‑196℃)中保存60、90d，种子活力显著高于常温、４℃及‑20℃下的种子活力，而种子常温（25℃）保存90d，种子活力下降明显，萌发率仅为33.80％；4℃下保存90天，种子活性降低至52.21%。张治国等研究发现铁皮石斛种子含水量降到8.21%，其萌发率与未脱水的种子萌发率相近，而种子含水量8.21%‑18.79%时，液氮冷冻贮存萌发率与正常种子没有明显差别。王君晖等研究发现铁皮石斛种子含水量为8%‑19%时,液氮超低温保存后种子的存活率可达95%。但液氮保存石斛种子中，冻存和化冻两个过程，易发生细胞损伤，影响种子活性，往往需要添加PVS2等保护剂进行预处理，增强种子的超低温耐性。这无形中增加了液氮储存石斛种子的难度和成本。此外，研究也发现液氮储存的石斛种子，萌发期会延长7‑10d。关于超低温贮存前后细胞生理生化变化规律仍不清楚。[0005]对于石斛种苗生产企业，超低温贮存需要具备专门液氮存贮设备及相应种子贮存操作技术，推广应用难度较大，生产中急需一种有效简便的种子贮存技术方法，以满足石斛种子中短期贮存需要。发明内容[0006]为了克服背景技术中存在的问题，本发明提供一种铁皮石斛种子贮存方法，通过在无菌条件下控制干燥湿度，降低石斛种子含水量，不需要冷冻即可有效延长石斛种子的保存期，且所得种子保存时间可达6个月以上，贮存后种子活力90.00%以上。本发明的技术降低了石斛种子的保存成本和技术难度，满足了种苗生产企业对铁皮石斛种子中短期贮存的需要。[0007]为实现上述目的，本发明是