一种基于单倍体育种技术创制甜玉米DH系的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115633635A(43)申请公布日2023.01.24(21)申请号202211224728.3(22)申请日2022.10.09(71)申请人武汉市农业科学院地址430065湖北省武汉市洪山区白沙洲大道173号(72)发明人徐长城胡侦华朱晋王俊良(74)专利代理机构重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙)50230专利代理师任苇(51)Int.Cl.A01H1/08(2006.01)A01C1/00(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图2页(54)发明名称一种基于单倍体育种技术创制甜玉米DH系的方法(57)摘要本发明公开了一种基于单倍体育种技术创制甜玉米DH系的方法，涉及玉米育种技术领域，其技术方案要点是：S1：选取材料；选择进行创制甜玉米DH系的母本玉米系与父本玉米系进行杂交；S2：单倍体诱导；种植母本玉米系与父本玉米系各若干株并进行诱导杂交，收获诱导后的杂交的果穗；对果穗进行烘干、脱粒后逐粒采用遗传标记法鉴别单倍体子粒；S3：单倍体加倍；对经步骤S2鉴别出的单倍体子粒进行单倍体加倍。证明了利用诱导系诱导甜玉米产生单倍体是可行的。用0.06％秋水仙素+2％二甲基亚砜进行浸芽处理，加倍有效率(植株散粉率)为32％，有效果穗率为71.88％。获得了类型丰富的甜玉米DH系。CN115633635ACN115633635A权利要求书1/1页1.一种基于单倍体育种技术创制甜玉米DH系的方法，其特征是，包括如下步骤：S1：选取材料；选择进行创制甜玉米DH系的母本玉米系与父本玉米系进行杂交；S2：单倍体诱导；种植母本玉米系与父本玉米系各若干株并进行诱导杂交，收获诱导后的杂交的果穗；对果穗进行烘干、脱粒后逐粒采用遗传标记法鉴别单倍体子粒；S3：单倍体加倍；对经步骤S2鉴别出的单倍体子粒进行单倍体加倍；其单倍体加倍的方法为：a.催芽；全部拟单倍体子粒采用常规方法进行浸种催芽并去除杂苗，获得芽苗；b.加倍；单倍体子粒幼芽长到2cm左右时，用刀片削掉幼芽顶端露出一个小口，然后在秋水仙溶液中浸泡8～12h，再用清水冲洗0.5h，剔除药害损失的芽苗；c.幼苗培养；将芽苗播种到育苗盘中并在光照培养室中培养，苗期去除杂株；d.移栽；幼苗3～4叶时移栽到大田，田间管理措施同一般大田管理；e.授粉；散粉、吐丝期，选取雌雄发育协调的植株进行单株套袋授粉；f.采收；果穗外苞叶发黄、籽粒开始凹陷时开始采收，淘汰穗腐病、粒腐病严重的果穗，去除苞叶，利用烘箱及时烘干果穗；g.考种；果穗烘干后及时进行单穗考种、编号和脱粒，调查穗形、穗长、穗粗、穗行、籽粒颜色，淘汰硬籽粒、霉烂籽粒。2.根据权利要求1所述的一种基于单倍体育种技术创制甜玉米DH系的方法，其特征是：所述步骤S1中，选取“广良甜27号”为母本、“HZI‑1诱导系”为父本进行诱导杂交。3.根据权利要求1所述的一种基于单倍体育种技术创制甜玉米DH系的方法，其特征是：所述步骤S2中，采用遗传标记法鉴别单倍体子粒，紫色或无色粒顶、紫色胚芽尖的子粒为非单倍体子粒；紫色粒顶、无色胚芽尖的子粒为单倍体子粒。4.根据权利要求1所述的一种基于单倍体育种技术创制甜玉米DH系的方法，其特征是：所述步骤S2中，采用遗传标记法鉴别单倍体子粒，并计算单倍体诱导率，单倍体诱导率＝(单倍体子粒数/子粒总数)×100％。5.根据权利要求1所述的一种基于单倍体育种技术创制甜玉米DH系的方法，其特征是：所述步骤S3中加倍过程中，秋水仙溶液的浓度为0.06％秋水仙素和2％DMSO的混合液。2CN115633635A说明书1/7页一种基于单倍体育种技术创制甜玉米DH系的方法技术领域[0001]本发明涉及玉米育种技术领域，更具体地说，它涉及一种基于单倍体育种技术创制甜玉米DH系的方法。背景技术[0002]玉米自交系选育是优良杂交种选育的基础和关键。利用常规育种技术(杂交选育法、回交选育法、轮回选择法等)培育品质性状、农艺性状、抗病性、丰产性优异的甜玉米自交系至少需要6～8代,且耗费大量的人力、物力和财力。作为现代玉米育种的革命技术，单倍体育种可以快速、高效地固定玉米基因型，只需2～3代即可获得稳定优良的自交系，从而缩短了育种周期，提高了选择效率，加快了育种进程。[0003]单倍体的产生有自然发生和人工诱导两种，但自然发生单倍体的频率极低，一般为十万分之一。目前，通常采用人工诱导的方法获得单倍体，主要方法有花药培养、物理或化学药剂诱导和孤雌生殖诱导等。但由于玉米花药培养效率低、基因型障碍大、染色体加倍困难，所以难以在玉米育种上得到较好应用。利用射线照射玉米花粉，再授粉诱导产生单倍体或利用秋水仙素(COL)、二甲基亚砜(DMSO)等化学药剂的单剂或组合剂处理雌穗诱发孤雌生殖都可以产生