转录因子MrPigB突变体及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115716868A(43)申请公布日2023.02.28(21)申请号202210917863.X(22)申请日2022.08.01(71)申请人华中农业大学地址430070湖北省武汉市洪山区狮子山街1号(72)发明人李牧段雅丽杜芸(74)专利代理机构成都坤伦厚朴专利代理事务所(普通合伙)51247专利代理师吴亦雨(51)Int.Cl.C07K14/37(2006.01)C12N15/80(2006.01)C12N1/15(2006.01)C12P1/02(2006.01)C12R1/645(2006.01)权利要求书1页说明书12页序列表（电子公布）(54)发明名称转录因子MrPigB突变体及其应用(57)摘要本发明属于生物工程领域，具体涉及转录因子MrPigB突变体及其应用。具体技术方案为：一种MrPigB突变体，在原始MrPigB基础上进行突变，突变位点包括：将原始序列中的第25号位点的谷氨酸突变为谷氨酰胺，将第32号位点的精氨酸突变为谷氨酸，将第41号位点的赖氨酸突变为天冬酰胺，将第46号位点的丝氨酸突变为苏氨酸；所述原始MrPigB的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。本发明对转录因子MrPigB的关键位点氨基酸进行突变，获得了MrPigB突变体。首次通过突变MrPigB以提高红曲色素的产量，并有效提高红曲黄色素产量和比例。携带有突变MrPigB的红曲菌株，使红曲黄色素在总红曲色素中的比例从27％提高到72％，同时总红曲色素产量较原始菌株提高15％。CN115716868ACN115716868A权利要求书1/1页1.一种MrPigB突变体，其特征在于：在原始MrPigB基础上进行突变，突变位点包括：将原始序列中的第25号位点的谷氨酸突变为谷氨酰胺，将第32号位点的精氨酸突变为谷氨酸，将第41号位点的赖氨酸突变为天冬酰胺，将第46号位点的丝氨酸突变为苏氨酸；所述原始MrPigB的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.一种MrPigB突变体，其特征在于：所述MrPigB突变体的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。3.权利要求1或2所述MrPigB突变体在红曲菌重组中的应用。4.利用权利要求1或2所述MrPigB突变体制备的重组红曲菌。5.权利要求1或2所述MrPigB突变体在提升红曲菌产红曲色素能力中的应用。6.权利要求1或2所述MrPigB突变体在提升红曲菌产红曲黄色素能力中的应用。2CN115716868A说明书1/12页转录因子MrPigB突变体及其应用技术领域[0001]本发明属于生物工程领域，具体涉及转录因子MrPigB突变体及其应用。背景技术[0002]红曲色素是一种被广泛使用的食品着色剂，由红曲菌(Monascusspp.，也称红曲霉)发酵制得，主要包括红曲红色素、红曲黄色素和红曲橙色素。现有研究发现：红曲黄色素不仅色彩艳丽，并且具有多种生物活性，例如抑制癌细胞生长、消炎、抗菌和降血脂等。因此，红曲黄色素成为新的研究热点。然而，自然条件下，红曲菌产生的三种红曲色素中，红曲黄色素的含量占比较低甚至最低。因此，如何提高红曲菌产红曲黄色素的能力，成为当前工业生产的重要课题。[0003]红曲色素的生物合成是一个非常复杂的多酶串联催化过程。红曲菌基因组中，负责红曲色素合成的相关基因聚集在一起，被称为红曲色素生物合成基因簇。该基因簇中包含14个酶或转运蛋白基因，以及2个转录因子：MrPigB和MrPigI。转录因子是一类蛋白质，能够特异性地识别并结合特定的启动子片段，从而激活或抑制启动子下游的基因表达。MrPigB是负责激活红曲色素生物合成基因簇的转录因子，其功能对于红曲色素合成具有至关重要的作用。然而，目前尚无通过MrPigB基因改造以调控红曲色素合成的相关报道。发明内容[0004]本发明的目的是提供一种转录因子MrPigB突变体及其应用。[0005]为实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案是：一种MrPigB突变体，在原始MrPigB基础上进行突变，突变位点包括：将原始序列中的第25号位点的谷氨酸突变为谷氨酰胺，将第32号位点的精氨酸突变为谷氨酸，将第41号位点的赖氨酸突变为天冬酰胺，将第46号位点的丝氨酸突变为苏氨酸；所述原始MrPigB的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。[0006]相应的，一种MrPigB突变体，所述MrPigB突变体的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。[0007]相应的，所述MrPigB突变体在红曲菌重组中的应用。[0008]相应的，利用所述MrPigB突变体制备的重组红曲菌。[0009]相应的，所述MrPigB突变体在提升红曲菌产红曲色素产量中的应用。[0010]相应的，所述MrPigB突变体在提升红曲菌产红曲黄色