红托竹荪多肽及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115724907A(43)申请公布日2023.03.03(21)申请号202210987978.6C07K1/30(2006.01)(22)申请日2022.08.17A61K38/08(2019.01)A61P17/02(2006.01)(71)申请人青岛农业大学地址266109山东省青岛市城阳区长城路700号(72)发明人李文香唐若琪刘萍孙亚男程凡升马萌(74)专利代理机构济南泉城专利商标事务所37218专利代理师王翠翠(51)Int.Cl.C07K7/06(2006.01)C12P21/06(2006.01)C07K1/36(2006.01)C07K1/34(2006.01)权利要求书1页说明书5页序列表（电子公布）附图4页(54)发明名称红托竹荪多肽及其应用(57)摘要本发明公开了一种红托竹荪多肽及其应用，旨在研究红托竹荪多肽的特定肽段进行体外细胞增殖进行试验，有利于在细胞水平上对药物作用的分子生物学机理进行深入的研究，为开发新的潜在细胞增殖药物提供有效途径，同时为开发红托竹荪菌种资源提供一定的理论基础。CN115724907ACN115724907A权利要求书1/1页1.一种多肽，其特征在于，所述多肽选自SEQIDNO：1至SEQIDNO：3所示的肽段中的任意一条。2.一种药物组合物，其特征在于，包括权利要求1中所述的多肽。3.根据权利要求2所述的一种药物组合物，其特征在于，包括药学上可接受的辅剂。4.权利要求1所述的多肽或权利要求2或3所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于促进细胞增殖。5.一种权利要求1所述的多肽的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）红托竹荪50℃烘24h，烘干后粉碎；（2）称取20g红托竹荪干粉于烧杯中，按1:20的料液比向烧杯中加入蒸馏水400ml，放到超声波清洗器中超声提取，将提取液5000r/min离心10min，收集上清液；加入3倍无水乙醇溶液静置过夜，8000r/min离心15min，取上清液在40˚C下旋转蒸发浓缩，浓缩后冷冻干燥，得到粗蛋白；（3）将粗蛋白溶于超纯水中，制成蛋白溶液，用1MNaOH调节pH值至6.5，加入中性蛋白酶充分震荡后，加酶量5000U/g，酶解的温度为50℃，置水浴中酶解4h，酶解完成后，置沸水浴中灭活酶15min，酶解液3500r/min离心8min，收集上清液，利用150g/L的三氯乙酸沉淀上清液中未水解的蛋白质，3500r/min离心8min，收集上清液，得到红托竹荪多肽；（4）将收集到的上清液通过超滤离心管进行分子量分级，得到不同分子量的红托竹荪多肽，将多肽测序得到SEQIDNO：1至SEQIDNO：3所示肽段。6.根据权利要求5所述的一种红托竹荪多肽的提取方法，其特征在于，超声提取的条件为：超声功率设置为400W，温度设为50℃，提取时间为20min。2CN115724907A说明书1/5页红托竹荪多肽及其应用技术领域[0001]本发明属于生物技术领域，具体涉及一种红托竹荪多肽及其应用。背景技术[0002]皮肤是脊椎动物最大的身体器官，可以保护身体免受机械和化学损伤。当皮肤受伤时，就会发生伤口愈合反应。皮肤创面愈合是一个复杂的多细胞过程，角质形成细胞的增殖和迁移在表皮再生过程中起关键作用。上皮细胞是伤口愈合过程中的重要屏障。一般来说，上皮细胞会不断再生。当皮肤受伤时，上皮细胞被激活增殖。随后，完整的表皮在创面上再生。因此，上皮细胞的增殖速度是维持屏障功能的关键因素。[0003]生物活性肽是一种具有生物活性并能影响人体健康的蛋白质成分这些生物活性肽具有多种生理功能，如激素作用、免疫调节、抗血栓、降压、降胆固醇、抗菌、抗病毒和抗癌等作用事实上，生物活性肽在药物研究中受到越来越多的关注，营养和功能食品市场对这些活性肽表现出极大的兴趣。[0004]竹荪是一种鬼笔科腐生真菌，因其独特的风味和较高的营养价值而受到人们的喜爱。它也被称为“蘑菇王后”有4个常见的可食用品种，分别是红托竹荪、长裙竹荪、短裙竹荪和棘托竹荪。近年来，从竹荪中分离出的许多活性成分被报道具有抗炎、抗氧化、免疫调节和神经保护作用。然而，关于红托竹荪（DictyophorarubrovalvataM.Zang）活性肽的提取及其作用的研究较少，其促进表皮细胞增殖的潜在机制尚不清楚。因此，研究红托竹荪多肽的结构特征、生物学功能及分子机制具有重要意义。发明内容[0005]本发明提供一种红托竹荪多肽及其应用，旨在研究红托竹荪多肽的特定肽段进行体外细胞增殖进行试验，有利于在细胞水平上对药物作用的分子生物学机理进行深入的研究。为开发新的潜在细胞增殖药物提供有效途径，同时为开发红托竹荪菌种资源提供一定的理论基础。[0006]本发明