一种体液样本病毒保存液及其制备方法和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115725695A(43)申请公布日2023.03.03(21)申请号202211506513.0(51)Int.Cl.(22)申请日2022.11.28C12Q1/6806(2018.01)C12Q1/70(2006.01)(71)申请人福建傲农生物科技集团股份有限公C12R1/92(2006.01)司地址363000福建省漳州市芗城区金峰经济开发区兴亭路与宝莲路交叉处申请人福建傲芯种业科技集团有限公司广西柯新源原种猪有限责任公司乐山傲新育种有限公司(72)发明人蒋叶林周丽雯庄祥玲黄燕丁能水龙毅余杰吴有林(74)专利代理机构北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙)11463专利代理师黄燕权利要求书1页说明书7页(54)发明名称一种体液样本病毒保存液及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种体液样本病毒保存液及其制备方法和应用，涉及病毒核酸检测技术领域。其组分按终浓度计包括：氯化钠12.8‑19.2g/L、磷酸氢二钠2.28‑3.41g/L、氯化钾0.32‑0.48g/L、磷酸二氢钾0.43‑0.65g/L、液体生物防腐剂Proclin3000.16‑0.24g/L、反式‑1,2‑环己二胺四乙酸0.58‑0.87g/L、聚乙二醇128‑192g/L。其可以保存体液中病毒核酸完整性，解决体液病毒样本采样和运输可能造成的核酸降解的问题，提高使用荧光定量PCR法进行病毒检测的灵敏度和准确性，确保下游PCR反应的有效扩增，维持待检病毒核酸浓度，提高检出率。CN115725695ACN115725695A权利要求书1/1页1.一种体液样本病毒保存液，其特征在于，其组分按终浓度计包括：氯化钠12.8‑19.2g/L、磷酸氢二钠2.28‑3.41g/L、氯化钾0.32‑0.48g/L、磷酸二氢钾0.43‑0.65g/L、液体生物防腐剂Proclin3000.16‑0.24g/L、反式‑1,2‑环己二胺四乙酸0.58‑0.87g/L、聚乙二醇128‑192g/L。2.根据权利要求1所述的体液样本病毒保存液，其特征在于，其组分按终浓度计包括：氯化钠14‑18g/L、磷酸氢二钠2.6‑3.1g/L、氯化钾0.35‑0.45g/L、磷酸二氢钾0.5‑0.6g/L、液体生物防腐剂Proclin3000.18‑0.22g/L、反式‑1,2‑环己二胺四乙酸0.6‑0.8g/L、聚乙二醇150‑170g/L。3.根据权利要求1所述的体液样本病毒保存液，其特征在于，其组分按终浓度计包括：氯化钠16.0g/L、磷酸氢二钠2.84g/L、氯化钾0.4g/L、磷酸二氢钾0.54g/L、液体生物防腐剂Proclin3000.2g/L、反式‑1,2‑环己二胺四乙酸0.72g/L、聚乙二醇160g/L。4.根据权利要求1‑3任一项所述的体液样本病毒保存液，其特征在于，所述聚乙二醇为PEG6000。5.根据权利要求1‑3任一项所述的体液样本病毒保存液，其特征在于，所述体液样本病毒保存液的pH为7.2‑7.5。6.根据权利要求1‑3任一项所述的体液样本病毒保存液，其特征在于，所述组分还包括余量的水。7.一种体液样本病毒保存液的制备方法，其特征在于，其包括将如权利要求1‑6任一项所述的体液样本病毒保存液的组分与水混合并配制成上述终浓度。8.如权利要求1‑6任一项所述的体液样本病毒保存液在制备病毒核酸检测中病毒保存液的应用。9.一种病毒核酸的检测方法，其特征在于，将病毒样品置于如权利要求1‑6任一项所述的体液样本病毒保存液中混合均匀，在检测前，先对混合物进行离心，取沉淀物进行重悬混匀，接着对病毒核酸进行纯化并检测。10.一种病毒核酸的检测试剂盒，其特征在于，其包括如权利要求1‑6任一项所述的体液样本病毒保存液、纯化试剂和检测试剂。2CN115725695A说明书1/7页一种体液样本病毒保存液及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及生物分子技术领域，具体而言，涉及一种体液样本病毒保存液及其制备方法和应用。背景技术[0002]病毒是一种由蛋白质外壳和内部的遗传物质组成、无细胞结构的特殊生物。由于结构非常简单，无法进行生存代谢，需要依赖宿主细胞中的物质和能量产生新一代病毒，实现复制式增殖。[0003]病毒核酸的检测，适用于疾病的早期诊断、疑难样本的辅助诊断、病程监控及预测等多个重要领域。目前临床上最有效、最灵敏的病毒核酸检测方法是实时荧光定量PCR法，但是该方法要求病毒核酸具有一定的完整性，从而确保检测的灵敏度和准确性。因此，保证病毒核酸的完整性对下游的基因分析具有重要的意义。[0004]动物临床上的体液病毒样本一般包括血液(血清、血浆)、口腔液、精液、去势液、羊水等，其成分比较复杂，含有较多内源性的酶，